Um Modelo de Aneurisma da Aorta Abdominal de Camundongo Induzido por Fosfato de Cálcio

Resumo

Este protocolo descreve um modelo de rato com aneurisma da aorta abdominal induzido por fosfato de cálcio (AAA) para estudar as características patológicas e os mecanismos moleculares dos AAAs.

Resumo

Um aneurisma da aorta abdominal (AAA) é uma doença cardiovascular com risco de vida que ocorre em todo o mundo e é caracterizada por dilatação irreversível da aorta abdominal. Atualmente, vários modelos de AAA murino quimicamente induzidos são usados, cada um simulando um aspecto diferente da patogênese do AAA. O modelo AAA induzido por fosfato de cálcio é um modelo rápido e custo-efetivo em comparação com os modelos AAA induzidos por angiotensina II e elastase. A aplicação de cristais de CaPO₄ na aorta do rato resulta em degradação de fibras elásticas, perda de células musculares lisas, inflamação e deposição de cálcio associada à dilatação da aorta. Este artigo apresenta um protocolo padrão para o modelo AAA induzido por CaPO₄. O protocolo inclui o preparo do material, a aplicação cirúrgica do CaPO₄ na adventícia da aorta abdominal infrarrenal, a colheita de aortas para visualização de aneurismas da aorta e análises histológicas em camundongos.

Introdução

Um aneurisma da aorta abdominal (AAA) é uma doença cardiovascular letal caracterizada por dilatação permanente da aorta abdominal, com altas taxas de mortalidade uma vez que ocorre a ruptura. O AAA está associado ao envelhecimento, tabagismo, sexo masculino, hipertensão arterial e hiperlipidemia¹. Vários processos patológicos demonstraram contribuir para a formação de AAA, incluindo proteólise de fibra de matriz extracelular, infiltração de células imunes e perda de células musculares lisas vasculares. Atualmente, os mecanismos patológicos do AAA permanecem elusivos, e não há medicamentos comprovados para o tratamento do AAA^1<....

Protocolo

Os estudos em animais foram realizados em conformidade com as diretrizes do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais do Centro de Ciências da Saúde da Universidade de Pequim e foram aprovados pelo Comitê de Ética Biomédica da Universidade de Pequim (LA2015142). Todos os camundongos para cirurgia foram anestesiados com isoflurano (1,5%-2%), e a anestesia foi cuidadosamente monitorada para evitar dor ou desconforto para os camundongos.

1. Preparação

1. Corte tiras de 0,3 cm de largura de luvas de borracha e gaze sem pó.
2. Compre ratos machos C57BL/6J de 8-10 semanas de idade. Abrigar os animais em um a....

Resultados

14 dias após a aplicação do CaPO₄, os camundongos machos C57BL/6J foram sacrificados e suas aortas foram colhidas e limpas. A morfologia das aortas foi fotografada para visualizar a formação de AAA. Como mostra a Figura 1A-B, a aplicação do CaPO₄ levou à dilatação da aorta abdominal infrarrenal. Histologicamente, o CaPO₄ resultou em uma degradação dramática das fibras elásticas, como ilustrado pelas quebras de elastina (

Discussão

A aplicação periaórtica de CaPO₄ é uma abordagem robusta para induzir AAA em camundongos. Vários estudos têm utilizado o modelo CaPO₄ e consistentemente relatado que este é um método rápido e reprodutível para estudar AAA em camundongos ^7,9. Este modelo é considerado para recapitular parte das características do aneurisma da aorta humana e fornecer insights mecanicistas sobre a patogênese AAA, incluindo inflamação e degradação da matriz extr.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
CaCl2	MECKLIN	C805225
NaCl	Biomed	SH5001-01
PBS	HARVEYBIO	MB5051
Ventilador para animais de pequeno porte	RWD	H1550501-012