एक कैल्शियम फॉस्फेट-प्रेरित माउस पेट महाधमनी धमनीविस्फार मॉडल
Summary
यह प्रोटोकॉल एएए की पैथोलॉजिकल विशेषताओं और आणविक तंत्र का अध्ययन करने के लिए कैल्शियम फॉस्फेट-प्रेरित पेट महाधमनी धमनीविस्फार (एएए) माउस मॉडल का वर्णन करता है।
Abstract
पेट की महाधमनी धमनीविस्फार (एएए) एक जीवन-धमकाने वाली हृदय रोग है जो दुनिया भर में होता है और पेट की महाधमनी के अपरिवर्तनीय फैलाव की विशेषता है। वर्तमान में, कई रासायनिक रूप से प्रेरित मुराइन एएए मॉडल का उपयोग किया जाता है, प्रत्येक एएए के रोगजनन के एक अलग पहलू का अनुकरण करता है। कैल्शियम फॉस्फेट-प्रेरित एएए मॉडल एंजियोटेंसिन II- और इलास्टेस-प्रेरित एएए मॉडल की तुलना में एक तेज़ और लागत प्रभावी मॉडल है। माउस महाधमनी के लिए सीएपीओ4 क्रिस्टल के आवेदन के परिणामस्वरूप लोचदार फाइबर क्षरण, चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं का नुकसान, सूजन और महाधमनी फैलाव से जुड़े कैल्शियम जमाव होता है। यह लेख CaPO4-प्रेरित AAA मॉडल के लिए एक मानक प्रोटोकॉल का परिचय देता है। प्रोटोकॉल में सामग्री तैयार करना, इन्फ्रारेनल पेट महाधमनी के एडवेंटिटिया के लिए सीएपीओ4 का सर्जिकल अनुप्रयोग, महाधमनी धमनीविस्फार की कल्पना करने के लिए महाधमनी की कटाई और चूहों में हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण शामिल हैं।
Introduction
पेट की महाधमनी धमनीविस्फार (एएए) एक घातक हृदय रोग है जो पेट की महाधमनी के स्थायी फैलाव की विशेषता है, जिसमें टूटने के बाद उच्च मृत्यु दर होती है। एएए उम्र बढ़ने, धूम्रपान, पुरुष लिंग, उच्च रक्तचाप और हाइपरलिपिडिमिया1 से जुड़ा हुआ है। कई पैथोलॉजिकल प्रक्रियाओं को एएए गठन में योगदान करने के लिए दिखाया गया है, जिसमें बाह्य मैट्रिक्स फाइबर प्रोटियोलिसिस, प्रतिरक्षा कोशिका घुसपैठ और संवहनी चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं का नुकसान शामिल है। वर्तमान में, एएए के पैथोलॉजिकल तंत्र मायावी बने हुए हैं, और एएए1 के उपचार के लिए कोई सिद्ध दवाएं नहीं हैं। कुछ मानव महाधमनी नमूनों के अस्तित्व के कारण मानव एएए में अनुसंधान सीमित है; इस प्रकार, कई रासायनिक संशोधन-प्रेरित पशु एएए मॉडल स्थापित किए गए हैं और व्यापक रूप से अपनाए गए हैं, जिनमें चमड़े के नीचे एंजियोटेंसिन II (एंजीआईआई) जलसेक, पेरिवास्कुलर या इंट्राल्यूमिनल इलास्टेस इनक्यूबेशन, और पेरिवास्कुलर कैल्शियम फॉस्फेट अनुप्रयोग2 शामिल हैं। एक आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला माउस मॉडल इन्फ्रारेनल पेट महाधमनी के एडवेंटिटिया के लिए कैल्शियम फॉस्फेट (सीएपीओ4) का अनुप्रयोग है, जो लागत प्रभावी है और आनुवंशिक संशोधन की आवश्यकता नहीं है।
एन्यूरिज्मल परिवर्तन को प्रेरित करने के लिए खरगोशों की कैरोटिड धमनी के लिए सीएसीएल2 के प्रत्यक्ष पेरिओर्टिक अनुप्रयोग को शुरू में गर्ट्ज़ एट अल.3 द्वारा रिपोर्ट किया गया था और बाद में चूहों के पेट की महाधमनी पर लागू किया गया था। चूहों में सीएपीओ4 क्रिस्टल का उपयोग करके महाधमनी फैलाव में तेजी लाने के लिए मॉडल यामानौची एट अल द्वारा विकसित किया गया था। चूहों में सीएपीओ4 की घुसपैठ मानव एएए में देखी गई कई रोग संबंधी विशेषताओं को पुन: उत्पन्न करती है, जिसमें गहन मैक्रोफेज घुसपैठ, बाह्य मैट्रिक्स गिरावट और कैल्शियम जमाव शामिल हैं। मानव एएए के जोखिम कारक, जैसे हाइपरलिपिडिमिया, चूहों में सीएपीओ4-प्रेरित एएए को भी बढ़ातेहैं। चूहों में एंजीआई छिड़काव-प्रेरित एएए के विपरीत, सीएपीओ 4-प्रेरित एएए इन्फ्रारेनल महाधमनी क्षेत्र में होता है, जो मानव एएए की नकल करता है। वर्तमान में, आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों में एएए विकास के लिए संवेदनशीलता का आकलन करने और दवाओं 6,7 के एंटी-एएए प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए इस विधि को व्यापक रूप से लागू किया गया है।
Protocol
Representative Results
Discussion
सीएपीओ4 का पेरिओर्टिक अनुप्रयोग चूहों में एएए को प्रेरित करने के लिए एक मजबूत दृष्टिकोण है। कई अध्ययनों ने सीएपीओ4 मॉडल का उपयोग किया है और लगातार बताया है कि यह चूहों 7,9 म?…
Acknowledgements
इस शोध को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (एनएसएफसी, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 और 91529203) और चीन के राष्ट्रीय कुंजी आर एंड डी कार्यक्रम (2019वाईएफए 0801600) से वित्त पोषण द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
| CaCl2 | MECKLIN | C805225 | |
| NaCl | Biomed | SH5001-01 | |
| PBS | HARVEYBIO | MB5051 | |
| Small animal ventilator | RWD | H1550501-012 |
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