Glomerüler filtrasyon hızı (GFR), böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için ideal bir belirteçtir. Bununla birlikte, seri kan ve idrar analizi ile inülin enjeksiyonu kullanan standart ölçüm yöntemi pratik değildir. Bu makalede, domuz yavrularında GFR’yi transdermal olarak ölçmek için pratik bir yöntem açıklanmaktadır.
Glomerüler filtrasyon hızının (GFR) transdermal ölçümü, bilinçli hayvanlarda böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için kullanılmıştır. Bu teknik, akut böbrek hasarı ve kronik böbrek hastalığını incelemek için kemirgenlerde iyi kurulmuştur. Bununla birlikte, transdermal sistemi kullanan GFR ölçümü, insanlara benzer bir böbrek sistemine sahip bir tür olan domuzlarda doğrulanmamıştır. Bu nedenle, anestezi uygulanan ve mekanik olarak ventilasyona tabi tutulan yenidoğan domuzlarında sepsisin transdermal GFR üzerine etkisini araştırdık. Polimikrobiyal sepsis, çekal ligasyon ve ponksiyon (CLP) ile indüklendi. Minyatür bir floresan sensöründen oluşan transdermal GFR ölçüm sistemi, intravenöz olarak enjekte edilen bir GFR izleyici olan floresein-izotiyosiyanat (FITC) konjuge sinistrinin temizlenmesini belirlemek için domuzun traşlı derisine bağlandı. Sonuçlarımız, CLP sonrası 12 saat sonrasında, GFR’de bir azalma ile serum kreatinininin arttığını göstermektedir. Bu çalışma, ilk kez, mekanik olarak ventilasyona tabi tutulan yenidoğan domuzlarında böbrek fonksiyonunun belirlenmesinde transdermal GFR yaklaşımının yararlılığını göstermektedir.
Böbrek fonksiyonunun pratik ve kantitatif bir değerlendirmesi, böbreklerin klirens prensibi1’e dayanarak kanı ne kadar iyi filtrelediğini söyleyen glomerüler filtrasyon hızı (GFR) ölçümüdür. GFR’yi ölçmenin daha önceki bir yöntemi, inülin veya sinistrin gibi eksojen bileşiklerin intravenöz enjeksiyonunu gerektirir ve klirenslerini tespit etmek için plazma / idrar seviyelerinin seri ölçümlerini yapar 2,3. Bu yöntem hantaldır, plazma ve idrar örneklerinin seri toplanmasını gerektirir4. Bir alternatif, kreatinin gibi endojen metabolik son ürünlerin ölçümüdür. Bununla birlikte, bu zaman alıcıdır ve zaman zaman yanlıştır, çünkü sadece glomerulus tarafından filtrelenmekle kalmaz, aynı zamandatübüller 5,6 tarafından da salgılanır. Ayrıca, kreatinin seviyesi cinsiyet, yaş, diyet ve kas kütlesi 7,8,9’dan etkilenir.
GFR’nin daha hassas, minimal invaziv ve yaygın olarak kullanılan bir ölçüsü, hayvanlarda gerçek zamanlı GFR’yi ölçen transdermal GFR monitörlerinin kullanılmasıdır 4,10. Yüksek oranda çözünür ve serbestçe filtrelenmiş eksojen bir böbrek belirteci olan Sinistrin, floresein-izotiyosiyanat (FITC) ile etiketlenmiştir. Bu konjuge bileşik intravenöz olarak enjekte edilir ve gerçek zamanlı böbrek fonksiyonu kan ve idrar örnekleri toplanmadan değerlendirilebilir11. Transdermal GFR ölçümünün kullanımı kemirgenlerde 12, köpekler13 ve kediler14’te doğrulanmıştır, ancak domuzlarda doğrulanmamıştır.
Domuz türleri, insanlarla çeşitli anatomik ve fizyolojik özellikleri paylaşır ve bu da onları çeşitli insan hastalıklarını incelemek için ideal hayvanlar haline getirir15. Translasyonel biyomedikal araştırmalarda domuzların kullanımı giderek daha popüler hale gelmiş ve insan fizyolojisini ve patofizyolojisini taklit ettiği için kemirgen modellerine göre tercih edilmiştir16. Yenidoğan domuzları, pediatrik hastalara özgü hastalıkların mekanizmalarını anlamada ilgi çekicidir17. Ayrıca, domuzdan insana organ naklindeki son gelişmeler, klinik öncesi ve klinik çalışmalar için tanı araçlarını genişletme dürtüsünü ortaya koymaktadır 18,19,20,21. Bu makale, ilk kez, yenidoğan domuzlarında GFR ölçümünde transdermal cihazın kullanımı için bir kılavuz sunmaktadır.
Bu yazıda, minyatür transdermal GFR monitörleri ve mekanik olarak havalandırılan, anestezi uygulanmış yenidoğan domuz modelinde FITC-sinistrin kullanılarak domuzlarda böbrek fonksiyonunu belirlemenin pratik adımları açıklanmaktadır. Önceki makaleler11,12,14 kemirgenlerinde deneysel transdermal GFR protokolleri oluşturmuştur, ancak domuzlarda protokol yoktur.
Son zamanlarda, inatçı …
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma, Dr. Adebiyi’ye verilen Ulusal Sağlık Enstitüleri R01 DK120595 ve R01 DK127625 hibeleri ile desteklenmiştir. Bu makalenin içeriği yalnızca yazarların sorumluluğundadır ve Ulusal Sağlık Enstitüleri’nin resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir. MediBeacon GmbH Saha Direktörü Dr. Daniel Schock-Kusch’a tavsiyeleri için teşekkür ederiz.
Alpha – Chloralose | Sigma-Aldrich | C0128-25G | Used for maintanining anesthesia |
Black braided silk 3-0 | Surgical Specialties | SP117 | Silk tie for blood vessel traction and ligation |
Centrifugation machine AccuSpin 8C | Fischer Scientific | 75-008-821 | Used to extract plasma from whole blood sample |
Endotracheal Tube 3.0 uncuffed | Progressive Medical International | 1109021995 | Inserted through tracheostomy |
FITC-Sinistrin 1.0 g | MediBeacon Inc. | FTCF S001 | Store at room temp and protect from light |
GEM Premier 3000 Blood gas analyzer | Instrumentation Laboratory | 5700 | For bedside blood gas analysis |
Heating Pad medium size 20 in x 29 in | Adroit Medical Systems | V029 | Connects to heat therapy pump |
HTP-Heat Therapy Pump | Adroit Medical Systems | HTP | Allows you to set temperature as needed. |
IDEXX Catalyst One | IDEXX Laboratories | 89-92525-00 | Plasma creatinine analysis |
Invasive blood pressure catheter 3.5Fr | Millar | SPR-524 | Inserted in femoral artery |
IV adminstration set with flow regulator | True Care | TCRTCBINF033G | Used to connect IV fluid bag to vein catheter |
Ketamine | Covetrus | 68317 | Used for induction of Anesthesia |
MediBeacon analysis software version 3.0 | MediBeacon Inc. | N/A | Software program used for analysing data to obtain sinistrin clearance half life and curve |
Millex-GV Syringe Filter Unit 0.22 µm | Millipore Sigma | SLGVR33RS | Syringe filter for chloralose injection |
Neonate/Infant Ventilator | Sechrist Millennium | 20409 | Connected to air supply to provide ventilation through endotracheal tube |
Phenobarbital Sodium + Phenytoin Sodium (Euthasol) | Covetrus | 72934 | Used for euthanasia |
Ringer Lactate 500 mL bag | Baxter | 2B2323Q | Maintanence fluid infusion |
Sterile Gloves | Henry Schein | 104-5920 | Used by operator during surgery |
Sterile Gown | Halyard Health | 95021 | Used by operator during surgery |
Steril Towel | Medline | 42131704 | Used as drape to maintaine sterile field when operating |
Suture 3-0 silk reverse cutting needle | Ethicon | NC1842168 | Used for suturing abdominal wall layers |
Transdermal Mini GFR Monitor | MediBeacon Inc. | TDM004 | Battery and USB connector included in package |
Transdermal monitor adhesive patch | MediBeacon Inc. | PTC-SM001 | Doubl sided adhesive patch for GFR probe |
Umbilical Tape 1/8 in x 20 yds | Fisher Scientific | NC9303017 | To secure endotracheal tube |
Venous Catheter size PE/5 | Micro medical tubing | BB31695 | For femoral vein cannulation |
Xylazine | Covetrus | 61035 | Used for induction of anesthesia |