É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Modelo de impacto de cartilagem reprodutível para gerar osteoartrite pós-traumática em coelhos

2.5K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/64450

⸱

21 de novembro de 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

O modelo aberto de impacto do côndilo femoral medial em coelhos é confiável para estudar a osteoartrite pós-traumática (PTOA) e novas estratégias terapêuticas para mitigar a progressão da PTOA. Este protocolo gera um defeito cartilaginoso isolado do côndilo femoral medial posterior em coelhos utilizando uma torre de queda baseada em carruagem com cabeça de impacto.

Resumo

A osteoartrite pós-traumática (PTOA) é responsável por 12% de todos os casos de osteoartrite nos Estados Unidos. A PTOA pode ser iniciada por um único evento traumático, como uma carga de alto impacto atuando na cartilagem articular, ou por instabilidade articular, como ocorre com a ruptura do ligamento cruzado anterior. Atualmente, não existem terapêuticas eficazes para prevenir a PTOA. O desenvolvimento de um modelo animal confiável de PTOA é necessário para entender melhor os mecanismos pelos quais o dano cartilaginoso procede e investigar novas estratégias de tratamento para aliviar ou prevenir a progressão da PTOA. Este protocolo descreve um modelo de impacto do côndilo femoral de coelho aberto, baseado em torre de queda, para induzir dano cartilaginoso. Este modelo forneceu cargas de pico de 579,1 ± 71,1 N, e tensões de pico de 81,9 ± 10,1 MPa com uma carga de tempo para pico de 2,4 ± 0,5 ms. A cartilagem articular dos côndilos femorais mediais impactados (CFMs) apresentou maiores taxas de células apoptóticas (p = 0,0058) e possuía escores mais altos na Osteoarthritis Research Society International (OARSI) de 3,38 ± 1,43 em comparação com as CFMs contralaterais não impactadas (0,56 ± 0,42) e outras superfícies cartilaginosas do joelho impactado (p < 0,0001). Não foram detectadas diferenças nos escores do OARSI entre as superfícies articulares não impactadas (p > 0,05).

Introdução

A osteoartrite pós-traumática (OTP) é uma das principais causas de incapacidade em todo o mundo, sendo responsável por 12%-16% da osteoartrite (OA) sintomática1. O padrão-ouro atual para o tratamento da OA terminal é a artroplastia total de joelho e quadril2 ou artrodese, como no caso da artrite tíbio-talar ou subtalar em estágio terminal. Apesar de amplamente bem sucedida, a artroplastia pode apresentar complicações dispendiosas e mórbidas3. Além disso, a artroplastia é menos desejável em pacientes com menos de 50 anos, dada a baixa sobrevida livre de revisões do implante de 77%-83%

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

O procedimento a seguir foi realizado com aprovação do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais (IACUC) da Faculdade de Medicina da Universidade de Indiana. Todas as cirurgias de sobrevida foram realizadas em condições estéreis, conforme descrito pelas diretrizes do NIH. Os riscos de dor e infecção foram manejados com analgésicos e antibióticos adequados para otimizar os resultados bem-sucedidos. Coelhos machos da raça Nova Zelândia Brancos, esqueleticamente maduros, pesando entre 3,0 e 4,0 kg, foram utilizados para o presente estudo.

1. Fabricação de torre de queda

  1. Gere desenhos CAD para componentes da t....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

O sucesso desse procedimento foi monitorado imediatamente após o impacto pela visualização do côndilo pelo cirurgião (Figura 4A) e por radiografias para garantir que não ocorresse fratura (Figura 4B). Existe o risco de falha do impacto levando a uma fratura intraoperatória do côndilo. Isso ocorreu tipicamente devido à colocação inadequada do pino de Steinman (Figura 5). Utilizando esse modelo, houve uma taxa de falha da fratura secu.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Este procedimento cirúrgico visa gerar danos consistentes da cartilagem à superfície de sustentação de peso do côndilo femoral medial de coelhos em um modelo de PTOA. Uma vantagem desse procedimento é que a abordagem posterior do joelho permite a visualização direta do côndilo femoral medial posterior completo, podendo ser realizada em aproximadamente 37 min (Tabela 2). Deve-se ressaltar também que este é um modelo de lesão aberta e pode levar a alterações inflamatórias agudas além do impacto devido a po.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Roman Natoli dá palestras para a AO Trauma North America, é editor de seção da Current Osteoporosis Reports e recebeu royalties de livros didáticos de Morgan e Claypool. Todd McKinley recebe royalties da Innomed. Os demais autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Este estudo foi apoiado pelo DoD Peer Reviewed Medical Research Program - Investigator-Initiated Research Award W81XWH-20-1-0304 da U.S. ARMY MEDICAL RESEARCH ACQUISITION ACTIVITY, pelo NIH NIAMS R01AR076477 e por um Comprehensive Musculoskeletal T32 Training Program do NIH (AR065971) e pelo NIH NIAMS Grant R01 AR069657. Os autores gostariam de agradecer a Kevin Carr por fornecer sua experiência em usinagem e fabricação para este projeto, e a Drew Brown e ao Indiana Center for Musculoskeletal Health Bone Histology Core por ajudar com a histologia.

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Parafuso de cabeça chataMcMaster-Carr92210A194Parafuso de cabeça chata de aço inoxidável, 8-32, lâminas de bisturi de 1/2"
#15Bisturi McKesson 1029066 McKesson No. 15 Aço Inoxidável / Plástico Cabo de Punho Clássico Estéril Descartável
Haste roscada de 1/2"-20McMaster-Carr99065A120Haste roscada de 1/2"-20
Seringade 10 mLMcKesson1031801Para irrigação; Seringa de Propósito Geral McKesson 10 mL Blister Pack Luer Lock Tip Sem Segurança
Seringa de 3 mLMcKesson1031804Para injeção de lidocaína/bupiviacaína; Seringa de Propósito Geral McKesson 3 mL Blister Pack Luer Lock Tip Sem Segurança.
3-0 polissorbEthiconJ332H3-0 Vircryl, CT-2, 1/2 círculo, 26 mm,
cônico 4-0 monossorbEthiconZ397H4-0 PDS 2, FS-2, 3/8 círculo, 19mm, borda de corte
5-0 polysorbMed Vet InternationalNC9335902Med Vet International 5-0 ETHICON COATED VICRYL C-3
AcelerômetroKistler8743A5Acelerômetro
Adson-Browns Ferramentasde precisão Forceps World500177Pinça Adson-Brown, 12 cm, Reta, Mandíbulas TC, 7 x 7 Dentes
AlfaxaloneJurox49480-002-01Alfaxan Multidose por Jurox : 10 mg/mL
BuprenorfinaPar Pharmaceuticals42023-0179-05Buprenorfina HCL injeção: 0,3 mg/mL
Butorfanol Zoetis54771-2033Tartarato de Butorfanol  10mg/ml por Zoetis
Clorexidina Esfoliante para as MãosBD371073BD E-Z Scrub 107 Escova/Esponja Cirúrgica, 4% CHG, Pinça Vermelha
STRYKER14023Stryker 4100-62 pinça de arame 0.28-0.71''Peça
mão de driver sem fioSTRYKEROR-S4300Stryker 4300 CD3 Driver sem fio 3
Retratores de críqueteNovosurgicalG3510 212x Tesoura de Dissector de Ação Cruzada Heiss (Holzheimer)
Jorvet labsJ0662Aesculap AG, Metzenbaum, Tesoura, Reta 5 3/4″
Colarinho ElizabethianElizaSoft62054Coleira de Recuperação Elizabetana ElizaSoft
Enrofloxacina CustomMedsEnrofloxacina composta por Custom Meds
Pomada para os OlhosPivetal 46066-753-55Lágrimas Artificiais Pivetais - recentemente recolhido
Colar de eixo de montagem frontalMcMaster-Carr5631T11Colar de eixo de montagem frontal
Verde rápidoMillipore SigmaF7258Verde rápido
FreerJorvet labsJ0226Qde elevador mais livre
-1McMaster-Carr91251A197Parafuso de cabeça de soquete de aço de liga de óxido preto, 8-32, parafuso de cabeça 3/4"
-2McMaster-Carr92196A194Parafuso de cabeça cilíndrica de aço inoxidável, 8-32, parafuso de cabeça 1/2"
-3McMaster-Carr92196A146Parafuso de cabeça cilíndrica de aço inoxidável, 8-32, parafuso de cabeça 1/2"
-4McMaster-Carr92196A151Parafuso de cabeça cilíndrica de aço inoxidável, 6-32, solução
Gill No. 1Millipore SigmaGHS132-1L, Gill No. 1
Porca sextavadaMcMaster-Carr91841A007Porca sextavada de aço inoxidável, 6-32
Grampo de alavanca de retençãoMcMaster-Carr5126A71Grampo de alternância de retenção
Dispositivo de impacton/an/aplataforma de
impacton/an/a
K-wiresJorvet LabsJ0250APinos Steinman Intramedulares JorVet, Trocar-Trocarte 1/16" x 7"
Lab ViewNational Instrumentsn/a n/a
Célula de CargaKistler9712B5000Célula
de Carga MATLABThe MathWorks Inc.n/an/a
MicroscópioLeicaDMi-8Microscópio Leica DMi8 com software LAS-X
MidazolamAlmaject72611-749-10 Injeção decloridrato de midazolam: 5mg/ml por Almaject
batentes de profundidade da fresadoraMcMaster-Carr2949A71Paradas de profundidade da fresadora de fixação
Braço C móvelPhilips718095BV  Pulsera, Rolamento de esferas linear montado em arco C móvel
McMaster-Carr9338T7Rolamento de esferas linear montado
Chave deA2Z ScilabA2ZTCIN39TC Webster Porta-agulhas Mandíbulas lisas 5",
PentobarbitalVortech0298-9373-68Pentobarbital 390 mg/mL por Vortech
Safranin OMillipore SigmaHT90432Safranin O
Bateria pequenaSTRYKERNS0140366212 Bateria pequena - 9,6 V
Haste de aço, 2'Haste de aço McMaster-Carr89535K25, 2'
de6139-22Soro Fisiológico Estéril, 250 mL
Carregador de Bateria Stryker 6110-120 System 6STRYKEROR-S6110-120
Luvas cirúrgicasMcKesson1044729McKesson Perry Tamanho 6.5 Par Estéril Látex Comprimento do punho estendido Liso Marrom Não aprovado pela quimioterapia
Bata cirúrgicaMcKesson1104452Bata Cirúrgica Não Reforçada com Toalha McKesson Grande Azul Estéril AAMI Nível 3
Tesoura de SuturaJorvet LabsJ0910SASuper Corte, Mayo, Reta, 5 1/2″
Kit de coloração TUNELABP BioscienceA049TUNEL Kit de detecção de apoptose cromogênica
Afastadores WeitlanerFerramentas de ciência fina17012-112x Afastadores Weitlaner-Locktite
de peça de mão Parafuso de cabeça de hematoxilina de 3/4", Solução de hematoxilina personalizada personalizados agulha Premium Garrafas Despejo de Solução Médica AquaLite para Descartável

Referências

  1. Thomas, A. C., Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Palmieri-Smith, R. M. Epidemiology of posttraumatic osteoarthritis. Journal of Athletic Training. 52 (6), 491-496 (2017).
  2. Pasquale, M. K., et al. Healthcare Utilization and costs of knee or....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Explorar mais artigos

Modelo de Osteoartrite em CoelhosDano da Cartilagem ArticularImpacto do Côndilo FemoralTécnica de Torre de QuedaApoptose de CondrócitosPontuação OARSIModelo de Trauma ArticularProtocolo de Cirurgia Animal