Summary

प्राथमिक डिसमेनोरिया वाले चूहों में तरल क्रोमैटोग्राफी-टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री का उपयोग करके कच्चे और संसाधित साइपेरी राइजोमा नमूनों का विश्लेषण

Published: December 23, 2022
doi:

Summary

यहां, प्राथमिक डिसमेनोरिया वाले चूहों में अल्ट्रा-हाई परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-हाई-रिज़ॉल्यूशन टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (यूपीएलसी-एमएस / एमएस) का उपयोग करके कच्चे और संसाधित साइपरी राइजोमा (सीआर) नमूनों का तुलनात्मक विश्लेषण प्रस्तुत किया जाता है। मेटाबोलाइट्स और नमूना घटकों के रक्त स्तर में परिवर्तन की जांच सिरका (सीआरवी) के साथ संसाधित सीआर और सीआर के साथ इलाज किए गए चूहों के बीच की गई थी।

Abstract

साइपेरी राइजोमा (सीआर) का व्यापक रूप से स्त्री रोग में उपयोग किया जाता है और चीन में महिलाओं की बीमारियों के इलाज के लिए एक सामान्य दवा है। चूंकि सिरका के साथ प्रसंस्करण के बाद सीआर के एनाल्जेसिक प्रभाव को बढ़ाया जाता है, सिरका (सीआरवी) के साथ संसाधित सीआर आमतौर पर चिकित्सकीय रूप से उपयोग किया जाता है। हालांकि, जिस तंत्र द्वारा एनाल्जेसिक प्रभाव को सिरका प्रसंस्करण द्वारा बढ़ाया जाता है, वह स्पष्ट नहीं है। इस अध्ययन में, अल्ट्रा-हाई प्रेशर लिक्विड क्रोमैटोग्राफीटेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (यूपीएलसी-एमएस /एमएस) तकनीक का उपयोग एक्सोजेनस घटकों और मेटाबोलाइट्स के रक्त स्तर में परिवर्तन की जांच करने के लिए किया गया था। परिणामों से इन चूहों के रक्त में 15 घटकों और दो मेटाबोलाइट्स के अलग-अलग स्तर का पता चला। उनमें से, सीआरवी समूह में (-)-माइर्टेनोल और [(1आर, 2 एस, 3 आर, 4 आर)-3-हाइड्रॉक्सी-1,4,7,7-टेट्रामेथिलबिसाइक्लो[2.2.1]हेपटी-2-वाईएल] एसिटिक एसिड का स्तर सीआर समूह की तुलना में काफी अधिक था। सीआरवी ने प्रोइन्फ्लेमेटरी, प्लेटलेट एकत्रीकरण और वाहिकासंकीर्णन गतिविधियों के साथ 2-श्रृंखला प्रोस्टानोइड्स और 4-श्रृंखला ल्यूकोट्रिएन के स्तर को कम किया और एराकिडोनिक एसिड और लिनोलिक एसिड चयापचय और असंतृप्त फैटी एसिड के जैवसंश्लेषण को संशोधित करके एनाल्जेसिक प्रभाव प्रदान किया। इस अध्ययन से पता चला है कि सिरका प्रसंस्करण सीआर के एनाल्जेसिक प्रभाव को बढ़ाता है और सीआरवी की कार्रवाई के तंत्र की हमारी समझ में योगदान देता है।

Introduction

प्राथमिक डिसमेनोरिया (पीडी) नैदानिक स्त्री रोग में सबसे प्रचलित स्थिति है। यह प्रजनन प्रणाली में श्रोणि विकृति के बिना मासिक धर्म से पहले या दौरान पीठ दर्द, सूजन, पेट दर्द या असुविधा की विशेषताहै। इसके प्रसार पर एक रिपोर्ट से पता चला है कि 85.7% छात्र पीडी2 से पीड़ित हैं। कम खुराक वाले मौखिक गर्भ निरोधक मानक चिकित्सा हैं, लेकिन उनके प्रतिकूल दुष्प्रभाव, जैसे कि गहरी नस घनास्त्रता, ने बढ़ते ध्यान को आकर्षितकिया है। मौखिक गर्भनिरोधक उपयोगकर्ताओं के बीच गहरी नस घनास्त्रता का प्रसार प्रति 1,000 महिलाओं में >1 है, और जोखिम पहले 6-12 महीनों के दौरान और 40वर्ष से अधिक उम्र के उपयोगकर्ताओं में सबसे अधिक है।

पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) में लंबे समय तक उपयोग किया जाता है, साइपरी राइजोमा (सीआर) साइपरेसी परिवार के साइपरस रोटुंडस एल के सूखे राइजोम से लिया गया है। सीआर मासिक धर्म विकारों को नियंत्रित करता है और अवसाद और दर्द से राहतदेता है। सीआर का व्यापक रूप से स्त्री रोग में उपयोग किया जाता है और महिलाओं की बीमारियों के इलाज के लिए एक सामान्य दवा मानाजाता है। सिरका (सीआरवी) के साथ संसाधित सीआर आमतौर पर चिकित्सकीय रूप से उपयोग किया जाता है। सीआर की तुलना में, सीआरवी मासिक धर्म और दर्द से राहत के बढ़े हुए विनियमन को दर्शाता है। आधुनिक अध्ययनों से पता चला है कि सीआर साइक्लोऑक्सीजिनेज -2 (सीओएक्स -2) और प्रोस्टाग्लैंडिंस (पीजी) के बाद के संश्लेषण को रोकता है, इस प्रकार एक विरोधी भड़काऊ प्रभाव प्राप्त करता है। इस बीच, सीआर साइड इफेक्ट्स7 के बिना एक एनाल्जेसिक प्रभाव प्रदर्शित करता है, जिससे सीआर डिसमेनोरिया रोगियों के लिए एक अच्छा विकल्प बन जाता है। हालांकि, मासिक धर्म के विनियमन और सीआरवी द्वारा दर्द से राहत के प्रावधान में अंतर्निहित तंत्र स्पष्ट नहीं है। सीआर अनुसंधान ने मुख्य रूप से अपने सक्रिय रासायनिक घटकों और फार्माकोलॉजिकल गतिविधियों में परिवर्तन पर ध्यान केंद्रित किया है, जैसे कि इसके विरोधी भड़काऊ, एंटीडिप्रेसेंट और एनाल्जेसिक प्रभाव 8,9,10,11,12।

यद्यपि टीसीएम के तत्व जटिल हैं, वे रक्त में अवशोषित होते हैंऔर प्रभावी होने के लिए एक विशिष्ट रक्त एकाग्रता तक पहुंचना चाहिए। रक्त में घटक निर्धारण की रणनीति का उपयोग करके टीसीएम के सक्रिय अवयवों की जांच के दायरे को सीमित किया जा सकता है। विट्रो में रासायनिक घटकों का अध्ययन करने में अंधापन से बचा जा सकता है, और व्यक्तिगत घटकोंका अध्ययन करने में एकतरफापन से बचा जा सकता है। रक्त में सीआर और सीआरवी की रचनाओं की तुलना करके, संसाधित सीआर के सक्रिय अवयवों में परिवर्तन का प्रभावी ढंग से और जल्दी से पता लगाया जा सकता है। दवा प्रभावकारिता वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा एक दवा शरीर को प्रभावित करती है। शरीर की चयापचय प्रतिक्रिया के कारण दवा घटकों में परिवर्तन, जो दवा के क्रिया तंत्र से संबंधित हो सकता है, मेटाबोनोमिक्स के साथ निर्धारित किया जा सकता है। मेटाबोनोमिक्स का उद्देश्य समग्र और गतिशील चयापचय प्रतिक्रियाओं को मापना है, जो पारंपरिक चीनी चिकित्सा15 की समग्र प्रभावकारिता को निर्धारित करने के अनुरूप है। इसके अलावा, मेटाबोलाइट्स जीन अभिव्यक्ति का अंतिम उत्पाद हैं, जो फेनोटाइप16 से सबसे निकटता से संबंधित है। तरल क्रोमैटोग्राफी-उच्च-रिज़ॉल्यूशन टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस / एमएस) -आधारित अलक्षित मेटाबोलॉमिक्स को उच्च थ्रूपुट, उच्च संवेदनशीलता और उच्च रिज़ॉल्यूशन की विशेषता है और इसका उपयोग कई अलग-अलग छोटे आणविकघटकों को मापने के लिए किया जा सकता है 17,18 . यह विधि एक साथ रक्त में अवशोषित अंतर्जात मेटाबोलाइट्स और बहिर्जात घटकों को निर्धारित कर सकती है। मेटाबोनॉमिक्स का व्यापक रूप से टीसीएम19, ड्रग टॉक्सिकोलॉजी20, स्वास्थ्य प्रबंधन21, स्पोर्ट्स 22, फूड23 और अन्य क्षेत्रों पर अध्ययन में उपयोग किया गया है।

इस अध्ययन में, रक्त में अवशोषित बहिर्जात घटकों और अंतर्जात मेटाबोलाइट्स में अंतर को सीआरवी के एनाल्जेसिक प्रभावों के तंत्र को प्रकट करने के लिए एलसी-एमएस / एमएस-आधारित अलक्षित मेटाबोलॉमिक्स का उपयोग करके सीआर-उपचारित और सीआरवी-उपचारित डिसमेनोरिया मॉडल चूहों के बीच मापा गया था।

Protocol

सभी पशु-संबंधित प्रयोगों को टीसीएम के चोंगकिंग संस्थान की प्रयोग आचार समिति से अनुमोदन के साथ आयोजित किया गया था। चौबीस मादा स्प्राग डॉवले चूहों (एसडी) जो 8-10 सप्ताह के थे और जिनका वजन 200 ग्राम ± 20 ग्राम था, …

Representative Results

डिसमेनोरिया मॉडल प्रयोग का विश्लेषणनियंत्रण समूह में 30 मिनट के भीतर कोई रिटिंग प्रतिक्रिया नहीं थी क्योंकि इन चूहों को दर्द पैदा करने के लिए ऑक्सीटोसिन और एस्ट्राडियोल बेंजोएट के साथ इंट्रा?…

Discussion

टीसीएम की विस्तृत विविधता और विभिन्न प्रकृति के कारण, ये जड़ी-बूटियां कभी-कभी नैदानिक अभ्यास में काम नहीं करती हैं, और यह टीसीएम के अनुचित प्रसंस्करण और काढ़ा के कारण हो सकता है। टीसीएम के तंत्र समकाली?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस काम को चोंगकिंग नगरपालिका स्वास्थ्य और परिवार नियोजन आयोग चीनी चिकित्सा विज्ञान और प्रौद्योगिकी परियोजना (परियोजना संख्या: ZY201802297), चोंगकिंग प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन की सामान्य परियोजना (परियोजना संख्या: cstc2019jcyj-msxmX065), चोंगकिंग आधुनिक पर्वत क्षेत्र विशेषता उच्च दक्षता कृषि प्रौद्योगिकी प्रणाली नवाचार टीम बिल्डिंग प्लान 2022 [10], और चोंगकिंग नगरपालिका स्वास्थ्य आयोग चीनी मटेरिया की प्रमुख अनुशासन निर्माण परियोजना द्वारा समर्थित किया गया था। मेडिका प्रोसेसिंग।

Materials

Acetonitrile  Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA 197164
BECKMAN COULTER Microfuge 20 Beckman Coulter, Inc. MRZ15K047
Estradiol benzoate Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd C10042616
formic acid Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA 177799
LC 30A system Shimadzu, Kyoto, Japan 228-45162-46
Olive oil Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd H25A11P111909
Oxytocin synthetic Zhejiang peptide biology Co., Ltd  2019092001
Rat PGF2α ELISA kit Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd 202101
Rat PGFE2 ELISA kit Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd EDL202006217
SPF Sprague-Dawley rats Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd Certificate number SCXK (Hunan) 2019-0004
Tecan Infinite 200 PRO   Tecan Austria GmbH, Austria 1510002987
Triple TOF 4600 system SCIEX, Framingham, MA, USA BK20641402
water Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA 152720

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Chen, Y., Li, N., Wang, D., Fan, J., Chu, R., Li, S. Analysis of Raw and Processed Cyperi Rhizoma Samples Using Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry in Rats with Primary Dysmenorrhea. J. Vis. Exp. (190), e64691, doi:10.3791/64691 (2022).

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