Здесь представлен сравнительный анализ сырых и обработанных образцов корневища Cyperi (CR) с использованием сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения (UPLC-MS/MS) у крыс с первичной дисменореей. Изменения уровня метаболитов в крови и компонентов образца были исследованы между крысами, получавшими CR, и CR, обработанным уксусом (CRV).
Корневище ципери (КР) широко используется в гинекологии и является общим лекарством для лечения женских заболеваний в Китае. Поскольку обезболивающий эффект CR усиливается после обработки уксусом, CR, обработанный уксусом (CRV), обычно используется клинически. Однако механизм, с помощью которого обезболивающий эффект усиливается при обработке уксусом, неясен. В этом исследовании метод жидкостной хроматографии сверхвысокого давления тандемной масс-спектрометрии (UPLC-MS / MS) использовался для изучения изменений в уровнях экзогенных компонентов и метаболитов в крови между крысами, получавшими CR, и крысами, получавшими CRV, с дисменореей. Результаты показали различные уровни 15 компонентов и двух метаболитов в крови этих крыс. Среди них уровни (-)-миртенола и [(1R,2S,3R,4R)-3-гидрокси-1,4,7,7-тетраметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил]уксусной кислоты в группе CRV были значительно выше, чем в группе CR. CRV снижал уровень простаноидов 2-й серии и лейкотриенов 4-й серии с провоспалительной, агрегационной и вазоконстрикционной активностью и обеспечивал анальгезирующий эффект за счет модуляции метаболизма арахидоновой кислоты и линолевой кислоты и биосинтеза ненасыщенных жирных кислот. Это исследование показало, что обработка уксусом усиливает обезболивающий эффект CR и способствует нашему пониманию механизма действия CRV.
Первичная дисменорея (БП) является наиболее распространенным заболеванием в клинической гинекологии. Он характеризуется болью в спине, отеком, болью в животе или дискомфортом до или во время менструации без патологии органов малого таза в репродуктивной системе1. Отчет о его распространенности показал, что 85,7% студентов страдают от БП2. Низкие дозы оральных контрацептивов являются стандартной терапией, но их неблагоприятные побочные эффекты, такие как тромбоз глубоких вен, привлекают все большее внимание3. Распространенность тромбоза глубоких вен среди пользователей оральных контрацептивов составляет >1 на 1000 женщин, и риск наиболее высок в течение первых 6-12 месяцев и у пользователей старше 40 лет4.
Давно используемая в традиционной китайской медицине (ТКМ), корневище ципери (CR) получают из высушенного корневища Cyperus rotundus L. семейства Cyperaceae. CR регулирует нарушения менструального цикла и снимает депрессию и боль5. КР широко применяется в гинекологии и считается общим лекарством для лечения женскихболезней6. CR, обработанный уксусом (CRV), обычно используется клинически. По сравнению с CR, CRV показывает усиленную регуляцию менструации и облегчение боли. Современные исследования показали, что CR ингибирует циклооксигеназу-2 (ЦОГ-2) и последующий синтез простагландинов (ПГ), достигая таким образом противовоспалительного эффекта. Между тем, CR проявляет обезболивающий эффект без побочных эффектов7, что делает CR хорошим выбором для пациентов с дисменореей. Однако механизм, лежащий в основе регуляции менструации и обезболивания с помощью CRV, неясен. Исследования CR в основном были сосредоточены на изменениях в его активных химических компонентах и фармакологической активности, таких как его противовоспалительное, антидепрессивное и обезболивающее действие 8,9,10,11,12.
Хотя ингредиенты ТКМ сложны, они всасываются в кровь и должны достигать определенной концентрации в крови, чтобы быть эффективными13. Область скрининга активных ингредиентов ТКМ может быть сужена за счет использования стратегии определения компонентов в крови. Слепоты можно избежать при изучении химических компонентов in vitro, а односторонности можно избежать при изучении отдельных компонентов14. Сравнивая составы CR и CRV в крови, можно эффективно и быстро обнаружить изменения в активных ингредиентах обработанного CR. Эффективность лекарства – это процесс, посредством которого лекарство влияет на организм. Изменения компонентов препарата, обусловленные метаболическим ответом организма, которые могут быть связаны с механизмом действия препарата, могут быть определены с помощью метабономики. Метабономика направлена на измерение общих и динамических метаболических реакций, что согласуется с определением общей эффективности традиционной китайской медицины15. Кроме того, метаболиты являются конечным продуктом экспрессии генов, которая наиболее тесно связана с фенотипами16. Таким образом, метабономика может быть пригодна для изучения различий в метаболических путях между CR и CRV при лечении БП. Нецелевая метаболомика на основе жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения (ЖХ-МС/МС) характеризуется высокой пропускной способностью, высокой чувствительностью и высоким разрешением и может использоваться для измерения множества различных низкомолекулярных компонентов17,18 . Этот метод позволяет одновременно определять эндогенные метаболиты и экзогенные составляющие, всасываемые в кровь. Метабономика широко используется в исследованиях ТКМ19, токсикологиилекарств 20, управления здоровьем21, спорта22, продуктов питания23 и других областях.
В этом исследовании различия в экзогенных компонентах, всасываемых в кровь, и эндогенных метаболитов были измерены между крысами-дисменореей, обработанными CR, и крысами, обработанными CRV, с использованием нецелевой метаболомики на основе LC-MS / MS, чтобы выявить механизмы анальгетических эффектов CRV.
Из-за большого разнообразия и разной природы ТКМ эти травы иногда не работают в клинической практике, и это может быть связано с неправильной обработкой и отваром ТКМ. Механизмы ТКМ становятся все более очевидными с использованием современной науки и техники29,30<sup class…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана Научно-техническим проектом китайской медицины Комиссии по здравоохранению и планированию семьи Чунцина (номер проекта: ZY201802297), Общим проектом Чунцинского фонда естественных наук (номер проекта: cstc2019jcyj-msxmX065), Характерным планом создания команды высокоэффективной системы инноваций в области сельскохозяйственных технологий для современной горной местности Чунцина на 2022 год [10] и Проектом строительства ключевой дисциплины Китайской материи муниципальной комиссии по здравоохранению Чунцина Медикаментозная обработка.
Acetonitrile | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 197164 | |
BECKMAN COULTER Microfuge 20 | Beckman Coulter, Inc. | MRZ15K047 | |
Estradiol benzoate | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd | C10042616 | |
formic acid | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 177799 | |
LC 30A system | Shimadzu, Kyoto, Japan | 228-45162-46 | |
Olive oil | Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd | H25A11P111909 | |
Oxytocin synthetic | Zhejiang peptide biology Co., Ltd | 2019092001 | |
Rat PGF2α ELISA kit | Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd | 202101 | |
Rat PGFE2 ELISA kit | Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd | EDL202006217 | |
SPF Sprague-Dawley rats | Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd | Certificate number SCXK (Hunan) 2019-0004 | |
Tecan Infinite 200 PRO | Tecan Austria GmbH, Austria | 1510002987 | |
Triple TOF 4600 system | SCIEX, Framingham, MA, USA | BK20641402 | |
water | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 152720 |