Este protocolo demonstra passo-a-passo detalhes de como extrair o primeiro molar inferior no camundongo. Ele fornece um método alternativo para pesquisadores com foco na cicatrização e regeneração dos ossos maxilares.
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Artigo de método
O Estabelecimento de um Modelo de Cicatrização de Molares Mandibulares Murinos
Neste artigo
Resumo
Resumo
Este estudo introduz o desenvolvimento de um modelo de extração molar na mandíbula murina para fornecer um modelo viável para o estudo da regeneração óssea alveolar e ossificação intramembranosa. Camundongos C57/J6 foram utilizados para extrair o primeiro molar inferior para estabelecer este modelo. Eles foram sacrificados e as mandíbulas bilaterais retiradas em 1 e 4 semanas pós-cirurgia, respectivamente. Subsequente coleta estereoscópica seriada, avaliação histológica e coloração por imunofluorescência foram realizadas para demonstrar o sucesso da cirurgia. Imediatamente após a cirurgia, as imagens estereoscópicas mostraram um alvéolo de extração vazio. A hematoxilina e a eosina (H&E) em 1 semana e a coloração de Masson em 4 semanas de pós-operatório mostraram que a área da raiz original estava parcial e totalmente preenchida por trabéculas ósseas, respectivamente. A coloração por imunofluorescência mostrou que, em comparação com o lado da homeostase, a expressão de Sp7 aumentou com 1 semana de pós-operatório, sugerindo osteogênese vigorosa na fossa alveolar. Todos esses resultados demonstraram um modelo praticável de cicatrização de alvéolos para extração dentária murina. Estudos futuros revelando os mecanismos de cicatrização de defeitos maxilares ou cicatrização de alvéolos poderão adotar esse método.
Introdução
A cicatrização do alvéolo após exodontia é um cenário clínico comum, que pode resultar em complicações inconsequentes, como hemorragia alveolar, alveolite seca ou mesmo osteomielite mandibular sob cicatrização indesejável 1,2,3. Essas comorbidades podem comprometer a qualidade de vida dos pacientes e, pior ainda, desafiar vitalmente a reabilitação protética devido à perda ósseamaciça4. Embora os estágios de cicatrização do alvéolo tenham sido elucidados, eles são inadequados para direcionar o cuidado clínico pós-cirurgia de exodontia quando se deparam ....
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Protocolo
Todos os procedimentos em animais neste estudo foram revisados e aprovados pelo Comitê de Ética da Escola de Estomatologia da China Ocidental, Universidade de Sichuan (WCHSIRB-D-2017-041). Camundongos adultos C57BL/6, obtidos de fonte comercial (ver Tabela de Materiais), foram utilizados para o presente estudo.
1. Preparo pré-cirúrgico
- Preparação do instrumento
- Prepare várias agulhas de seringas descartáveis (26G, 25G, 23G; ver Tabela de Materiais) para serem usadas como elevadores. Flexionar a cabeça da agulha aproximadamente 20°-40°, como mostra a Fig....
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Resultados
Para elucidar o uso prático desse método, o primeiro molar inferior direito de dois camundongos C57BL/6 saudáveis (3 meses de idade, ambos fêmeas) foi extraído e acompanhado por 1 semana e 4 semanas, respectivamente. As mandíbulas esquerdas não danificadas foram usadas como controles saudáveis. A Figura 1A mostra as características específicas do aparelho cirúrgico, incluindo agulhas 26-23 G e um tweezer oftálmico dentado. A agulha 26 G é removida e dobrada. A agulha de 25 G é dobrada a apro.......
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Discussão
O modelo de cicatrização de alvéolos murinos é um método importante para desvendar os mecanismos subjacentes na cicatrização e regeneração óssea, resolvendo desafios clínicos. Estudos existentes demonstraram a possibilidade do modelo de extração de incisivos e do modelo de extração de molares superiores, enquanto estudos não utilizaram o modelo de primeiro molar inferior13,17,18. No entanto, os incisivos são cruciais para a vida.......
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Divulgações
Todos os dados e imagens originais estão incluídos neste artigo. Os autores declaram a inexistência de conflitos de interesse.
Agradecimentos
Este trabalho é apoiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) e 82100982 (F.L.), e pelo Programa de Ciência e Tecnologia da Província de Sichuan 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 23/25/26 de instrumento | médico de Chengdu Xinjin Shifeng da agulha de G & Instrumentos Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
| C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China | C57/B6J | |
| DAPI | Beyotime | Cat#C1005 | |
| de Incorporação | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
| Kit de Coloração de Hematoxilina e Eosina | Biosharp | BL700B | |
| Isoflurano | RWD Life Science Co., Ltd | R510-22-10 | |
| Masson s Kit de Mancha Tricrômica | Solarbio | G1340 | |
| Microtome | Leica | RM2235 | |
| Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
| Coelho policlonal | anti-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
| Pinças | Chengdu Xinjin Shifeng Aparelhos Médicos & Instrumentos Co. LTD. | SB2-115 |
Referências
- Mamoun, J. Dry socket etiology, diagnosis, and clinical treatment techniques. Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 44 (2), 52-58 (2018).
- Laraki, M., Chbicheb, S., El Wady, W. A....
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Reimpressões e permissões
