L’établissement d’un modèle de guérison par voie d’extraction molaire mandibulaire murine
Summary
Ce protocole montre étape par étape les détails de la façon d’extraire la première molaire mandibulaire chez la souris. Il fournit une méthode alternative pour les chercheurs qui se concentrent sur la guérison et la régénération des os de la mâchoire.
Abstract
Cette étude introduit le développement d’un modèle d’extraction molaire dans la mandibule murine afin de fournir un modèle pratique pour étudier la régénération osseuse alvéolaire et l’ossification intramembraneuse. Des souris C57/J6 ont été utilisées pour extraire la première molaire mandibulaire afin d’établir ce modèle. Ils ont été euthanasiés et les mandibules bilatérales récoltées, respectivement 1 semaine et 4 semaines après la chirurgie. Une récolte stéréoscopique en série, une évaluation histologique et une coloration par immunofluorescence ultérieures ont été effectuées pour démontrer la réussite de la chirurgie. Immédiatement après la chirurgie, les images stéréoscopiques affichaient une douille d’extraction vide. L’hématoxyline et l’éosine (H & E) à 1 semaine et la coloration de Masson à 4 semaines après la chirurgie ont montré que la zone de la racine d’origine était partiellement et entièrement remplie de trabécules osseuses, respectivement. La coloration par immunofluorescence a montré que, par rapport à l’homéostasie, l’expression de Sp7 augmentait 1 semaine après la chirurgie, suggérant une ostéogenèse vigoureuse de la fosse alvéolaire. Tous ces résultats ont démontré un modèle pratique de guérison par extraction dentaire murale. Des études à venir révélant les mécanismes de cicatrisation des défauts de la mâchoire ou de la cicatrisation des alvéoles pourraient adopter cette méthode.
Introduction
La cicatrisation des alvéoles après extraction dentaire est un scénario clinique courant, qui peut entraîner des complications inconvenantes telles qu’une hémorragie des alvéoles, une cavité sèche ou même une ostéomyélite de la mâchoire sous cicatrisation indésirable 1,2,3. Ces comorbidités peuvent nuire à la qualité de vie des patients et, pire encore, remettre en question de manière vitale la rééducation prothétique en raison d’une perte osseuse massive4. Bien que les étapes de cicatrisation des alvéoles aient été élucidées, elles sont insuffisantes pour diriger les soins cliniques après la chirurgie d’extraction dentaire lorsqu’ils rencontrent divers défis de pronostic4.
De multiples études basées sur des modèles animaux ont été menées pour mieux comprendre les mécanismes sous-jacents du processus de guérison des alvéoles et éviter les situations ci-dessus. Sp7 est un régulateur principal dans la différenciation des ostéoblastes, jouant un rôle essentiel dans le développement du squelette, l’hémostase osseuse et la régénération osseuse 5,6. Les modèles rationnels de guérison des alvéoles pourraient afficher la redondance de Sp7 post-traumatique dans la régénération osseuse. De plus, distinct de la cicatrisation des fractures osseuses longues, un seul processus ostéogénique, l’ossification intramembraneuse, implique le processus de cicatrisation de la cavitéd’extraction 7. Cela rend le modèle d’extraction dentaire animale optimal pour étudier les thérapies implantaires, car l’ostéointégration implantaire obéit à la même règle ostéogénique8.
Pendant des décennies, le modèle d’extraction dentaire a été pratiqué chez les rats, les lapins etles chiens, car ces espèces ont de grandes dents qui sont pratiques à opérer sur 9,10,11. Cependant, compte tenu de la demande florissante de modification génétique et en tant que contexte génétique plus adaptatif aux humains, les souris sont de plus en plus utilisées pour établir un modèle d’extraction dentaire. Dès lors, les chercheurs pourraient démêler le rôle d’une population cellulaire spécifique dans le processus de guérison de l’alvéole en utilisant des souris modifiées par le génome au lieu d’observer les phénotypes seulement12. Parmi les modèles d’alvéoles d’extraction dentaire murine, les études précédentes ont démontré l’établissement et le processus de guérison des douilles d’extraction des dents maxillaires murines et des incisives13,14,15,16. Cependant, le schéma de guérison du pronostic et les points temporels détectives et observatifs peuvent différer d’un protocole à l’autre. Cela fait appel à un critère universel pour les chercheurs d’établir un modèle de guérison de l’alvéole murine.
Cette étude visait à constituer un modèle pratique de guérison des alvéoles murines pour les problèmes ci-dessus. Les molaires de la mandibule chez la souris ont des traits morphologiques distinctifs par rapport aux molaires maxillaires et aux incisives, apportant des avantages et des inconvénients uniques. Comme les modèles axés sur la mandibule murine sont actuellement basés sur le vide, ce protocole a tenté de fournir une méthode accomplie pour extraire la première molaire mandibulaire chez la souris. Nous espérons que ce protocole éclairera les chercheurs fondamentaux avec de nouvelles idées pour découvrir les mécanismes sous-jacents de la guérison des alvéoles et indiquer les soins cliniques.
Protocol
Representative Results
Discussion
Le modèle de guérison de l’alvéole murine est une méthode importante pour démêler les mécanismes sous-jacents de la guérison et de la régénération osseuses, résolvant finalement les défis cliniques. Les études existantes ont démontré la possibilité du modèle d’extraction incisive et du modèle d’extraction molaire maxillaire, alors que les études n’ont pas utilisé le modèle de première molaire mandibulaire13,17,18<sup clas…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail est soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) et 82100982 (F.L.), et par le Programme scientifique et technologique de la province du Sichuan 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.).
Materials
| 23/25/26 G needle | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
| C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China | C57/B6J | |
| DAPI Staining Solution | Beyotime | Cat#C1005 | |
| Embedding Cassettes | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
| Hematoxylin and Eosin Stain Kit | Biosharp | BL700B | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co.,Ltd | R510-22-10 | |
| Masson’s Trichrome Stain Kit | Solarbio | G1340 | |
| Microtome | Leica | RM2235 | |
| Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
| Rabbit polyclonal | anti-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
| Tweezers | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB2-115 |
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