Summary

Optimierung der Aufbereitungstechnik für Tiebangchui mit Zanba auf Basis von CRITIC in Kombination mit der Box-Behnken Response Surface Methode

Published: May 12, 2023
doi:

Summary

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine effiziente und standardmäßige Entgiftungsverarbeitungsmethode für Zanba-Pfannengerichte Tiebangchui unter Verwendung von CRITIC in Kombination mit der Box-Behnken-Response-Surface-Methode.

Abstract

Die getrocknete Wurzel von Aconitum pendulum Busch., auf Chinesisch Tiebangchui (TBC) genannt, ist eine der bekanntesten tibetischen Arzneimittel. Es ist ein weit verbreitetes Kraut im Nordwesten Chinas. Viele Fälle von Vergiftungen sind jedoch aufgrund der intensiven Toxizität von TBC und der Tatsache, dass seine therapeutischen und toxischen Dosen ähnlich sind, aufgetreten. Daher ist es eine dringende Aufgabe, eine sichere und wirksame Methode zur Verringerung der Toxizität zu finden. Eine Recherche in den Klassikern der tibetischen Medizin zeigt, dass die Verarbeitungsmethode von TBC, die mit Zanba gebraten wird, in der “Verarbeitungsspezifikation der tibetischen Medizin der Provinz Qinghai” (2010) festgehalten wurde. Die konkreten Verarbeitungsparameter sind jedoch noch nicht klar. Ziel dieser Studie ist es daher, die Verarbeitungstechnologie von Zanba-Pfannengerichten zu optimieren und zu standardisieren.

Zunächst wurde ein Ein-Faktor-Experiment zu vier Faktoren durchgeführt: der Schichtdicke von TBC, der Menge an Zanba, der Verarbeitungstemperatur und der Zeit. Mit Monoester- und Diesteralkaloidgehalten in Zanba-gerührtem TBC als Indizes wurde CRITIC in Kombination mit der Box-Behnken-Response-Surface-Methode verwendet, um die Verarbeitungstechnologie von Zanba-gerührtem TBC zu optimieren. Die optimierten Verarbeitungsbedingungen von Zanba-Pfannengerichten waren eine TBC-Scheibendicke von 2 cm, dreimal mehr Zanba als TBC, eine Verarbeitungstemperatur von 125 °C und 60 Minuten Pfannengericht. Diese Studie ermittelte die optimierten und standardisierten Verarbeitungsbedingungen für die Verwendung von Zanba-Pfannen-TBC und lieferte damit eine experimentelle Grundlage für die sichere klinische Anwendung und industrielle Herstellung von Zanba-Pfannen-TBC.

Introduction

Die getrocknete Wurzel von Aconitum pendulum Busch und A. flavum Hand.-Mazz., eine der bekanntesten tibetischen Arzneimittel, wird auf Chinesisch Tiebangchui (TBC) genannt 1,2. Die getrockneten Wurzeln von TBC sind hilfreich, um Kälte und Wind zu vertreiben, Schmerzen zu lindern und Schock zu lindern. Es wurde im ersten Band der “Arzneimittelstandards (Tibetische Medizin) des Gesundheitsministeriums der Volksrepublik China” festgehalten, in dem es heißt, dass die getrockneten Wurzeln von TBC häufig zur Behandlung von rheumatoider Arthritis, Prellungen und anderen Erkältungskrankheiten verwendet werden3. Die klinische therapeutische Dosis von TBC ist jedoch ähnlich wie die toxische Dosis, und es wurde häufig über Vergiftungen oder Todesfälle aufgrund unsachgemäßer Anwendung berichtet4. Daher ist die Verringerung der Toxizität und die Erhaltung der Wirksamkeit von TBC im Laufe der Jahre zu einem Forschungsschwerpunkt geworden.

In der tibetischen Medizin ist die Verarbeitung eine der effektivsten Methoden, um die Toxizität von TBC abzuschwächen. Gemäß “Verarbeitungsspezifikation der tibetischen Medizin der Provinz Qinghai (2010)” sollten die Originalkräuter (TBC) in einen Eisentopf gegeben und mit Zanba gebraten werden, bis die Zanba gelb wird, danach wird Zanba entfernt und die Kräuter an der Luft getrocknet 5,6. Es wurden jedoch keine spezifischen Prozessparameter dokumentiert, was die Kontrolle der Verarbeitungstechnologie und der Qualität von Zanba-Pfannengerichten erschwert. Die CRITIC-Methode ist eine objektive Gewichtungsmethode, die Unschärfe und Subjektivität vermeiden und die Objektivität des Wiegens von7 verbessern kann. Die Box-Behnken-Antwortflächenmethode kann die Wechselwirkung zwischen den einzelnen Faktoren durch Polynomanpassung8 direkt widerspiegeln. Die Kombination der Box-Behnken-Antwortfläche und der CRITIC-Methode wird häufig verwendet, um die Verarbeitungstechnologie zu optimieren, um das optimierte Verarbeitungsprotokoll 9,10 zu erhalten. In dieser Arbeit wurden ein Monoester-Diterpenoid-Alkaloid (MDA) (Benzoylaconitin) und zwei Diester-Diterpenoid-Alkaloide (DDAs) (Aconitin, 3-Desoxyaconitin) als Bewertungsindizes verwendet. CRITIC in Kombination mit der Box-Behnken-Response-Surface-Methode wurde angewendet, um die Verarbeitungstechnologie von Zanba-gerührtem TBC zu optimieren und eine Standardverarbeitungsmethode für den klinisch sicheren Einsatz zu etablieren.

Protocol

Die Zanba-gerührte TBC-Verarbeitungsmethode wurde von CRITIC in Kombination mit der Box-Behnken-Response-Surface-Methode optimiert und standardisiert. Benzoylaconitein, Aconitin und 3-Desoxyaconitin wurden während dieses Verfahrens als Bewertungsindizes verwendet. 1. Vorbereitung der Probenlösung Bereiten Sie die Stammlösung der Referenzsubstanz vor. Wiegen Sie genau 9,94 mg Benzoylaconiten, 8,49 mg Aconitin und 6,25 mg 3-Desoxyaconitin (Materialtabelle</…

Representative Results

In dieser Studie hatte der verwendete Elutionsgradient eine gute Auflösung (Abbildung 1) für die drei Indexkomponenten in Zanba-gerührter TBC, wie nach wiederholtem Debuggen bestimmt. Die drei Indexkomponenten in Zanba-gerührtem TBC wiesen eine gute lineare Beziehung innerhalb eines bestimmten Konzentrationsbereichs auf (Tabelle 2). Die Präzision (Tabelle 5), die Stabilität (Tabelle 6), die Wiederholbarkeit (Tabelle 7) und die Probenrückgewinnung (<st…

Discussion

TBC ist ein wichtiges tibetisches Arzneimittel mit der Wirkung, Kälte zu vertreiben und Schmerzen zu lindern. Es wird in China seit Tausenden von Jahren hauptsächlich zur Behandlung von traumatischen Verletzungen und rheumatischer Arthralgie eingesetzt24,25,26. Diterpenoidalkaloide sind sowohl aktive als auch toxische Bestandteile von TBC27,28,29<sup class="…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Arbeit wurde finanziell unterstützt von der National Natural Science Foundation of China (Nr. 82130113), der China Postdoctoral Science Foundation (Nr. 2021MD703800), der Science Foundation for Youths of Science & Technology Department der Provinz Sichuan (Nr. 2022NSFSC1449) und dem Forschungsförderungsprogramm “Xinglin Scholars” der Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (Nr. 2022NSFSC1449) BSH2021009).

Materials

3-Deoxyaconitine Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. DST221109-033
Aconitine Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. DSTDW000602
Ammonium acetate Tianjin Kermel Chemical Reagent Co., Ltd Chromatographic grade
Benzoylaconitine Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. DSTDB005502
Design-Expert software Stat-Ease, Inc., Minneapolis, MN, USA version 13.0
Electronic analytical balance Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd. FA1004
High performance liquid chromatography SHIMADZU Co., Ltd. LC-20A
High-speed smashing machine Beijing Zhongxing Weiye Instrument Co., Ltd. FW-100
Millipore filter Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd φ13 0.22 Nylon66
stir-Fry machine Changzhou Maisi Machinery Co., Ltd Type 5
Tiebangchui Gannan Baicao Biotechnology Development Co., Ltd 20211012
Ultra pure water systemic RephiLe Bioscience, Ltd. Genie G
Ultrasonic cleansing machine Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd SB2200
Zanba 27 Chuanzang Road, Ganzi County

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Li, S., Yu, L., Li, C., Wang, N., Lai, X., Liu, Y., Zhang, Y. Optimization of Processing Technology for Tiebangchui with Zanba Based on CRITIC Combined with Box-Behnken Response Surface Method. J. Vis. Exp. (195), e65139, doi:10.3791/65139 (2023).

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