هنا ، نقترح بروتوكولا لتوصيل عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية (LPS) عن طريق التنبيب الرغامي الفموي البلعومي غير الباضع. تقلل هذه الطريقة من صدمة الإجراء الجراحي للحيوان وتوصل بدقة LPS إلى القصبة الهوائية ثم إلى الرئتين.
لا يزال نموذج فأر إصابة الرئة الحادة (ALI) الناجم عن عديد السكاريد الدهني (LPS) أو الذيفان الداخلي من بين النماذج الأكثر استخداما في الدراسات التي أجريت على الحيوانات لإصابة الرئة الحادة أو الالتهاب الحاد. الطرق الحالية الأكثر استخداما في نماذج الفئران المصابة بإصابات الرئة الحادة هي الحقن داخل الصفاق من LPS وفغر القصبة الهوائية لتسريب القصبة الهوائية من LPS. ومع ذلك ، فإن الطريقة الأولى تفتقر إلى استهداف الرئة وتلف الأعضاء الأخرى ، والطريقة الأخيرة تحفز الصدمة الجراحية ، وخطر العدوى ، وانخفاض معدل البقاء على قيد الحياة. هنا ، نوصي بطريقة التنبيب الرغامي الفموي البلعومي غير الغازية لتقطير LPS في الفئران. في هذه الطريقة ، يتم إدخال LPS بشكل غير جراحي في القصبة الهوائية من خلال تجويف البلعوم الفموي ليتم غرسه في الرئة بمساعدة جهاز للتنبيب الرغامي. لا تضمن هذه الطريقة استهداف الرئة فحسب ، بل تتجنب أيضا الضرر وخطر الموت في الحيوانات. نتوقع أن يصبح هذا النهج مستخدما على نطاق واسع في مجال إصابة الرئة الحادة.
إصابة الرئة الحادة (ALI) هي متلازمة سريرية شائعة. في ظل مجموعة متنوعة من العوامل المسببة للأمراض ، يؤدي تعطيل الحاجز الفسيولوجي للخلايا الظهارية الرئوية والخلايا البطانية الوعائية إلى زيادة نفاذية السنخية ، مما يؤدي إلى انخفاض امتثال الرئة ، وذمة رئوية ، ونقص الأكسجة الشديد1. متلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS) هي أشد أشكال ALI. يعتبر الالتهاب غير المنضبط وتلف الإجهاد التأكسدي من الأسباب الرئيسية ل ALI ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة2 الأكثر حدة. عندما تصاب الخلايا الظهارية السنخية مباشرة بسبب الصدمة ، يتم تنشيط سلسلة الاستجابة الالتهابية للبلاعم السنخية ، مما يؤدي إلى التهاب في الرئة3. على الصعيد العالمي ، هناك أكثر من 3 ملايين مريض يعانون من متلازمة الضائقة التنفسية الحادة سنويا ، وهم يمثلون حوالي 10٪ من حالات دخول وحدة العناية المركزة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن معدل الوفيات في الحالات الشديدة يصل إلى 46٪ 4,5,6. لذلك ، هناك حاجة لإنشاء نموذج حيواني مناسب ل ALI لدراسة التسبب فيه. الفأر هو التجارب الأكثر استخداما في دراسة ALI لأن الجهاز التنفسي يمكن أن يحاكي الجهاز التنفسي البشري جيدا لدراسات ALI. علاوة على ذلك ، يظهر ALI على شكل تسلل هائل للخلايا الالتهابية ، وزيادة نفاذية الأوعية الدموية الرئوية ، والوذمة الرئوية. تعكس التغيرات في السيتوكينات الالتهابية في المصل ونسبة الوزن الجاف الرطب للرئة درجة ALI7.
في الوقت الحاضر ، تشمل الطرق الرئيسية لنمذجة ALI الناجم عن LPS في الفئران التنبيب الرغامي داخل الأنف والجراحة 8,9. هنا ، نقترح طريقة جديدة لتوصيل LPS إلى القصبة الهوائية عن طريق التنبيب الفموي البلعومي غير الباضع. تستخدم هذه الطريقة منبيبا مضيئا للعثور على القصبة الهوائية للفأر ثم توصيل LPS إلى القصبة الهوائية والرئة. هذه الطريقة يسلم LPS إلى الرئتين بشكل أكثر دقة من طريقة التسليم عن طريق الأنف. بالمقارنة مع التنبيب الرغامي الجراحي ، لا تتطلب هذه الطريقة جراحة ، وتتجنب التسبب في الجروح ، وتقلل الألم في الفئران10. لذلك ، يمكن استخدام هذه الطريقة لإنشاء نموذج ماوس أكثر إقناعا ل ALI.
في البداية ، نظرنا داخل تجويف الفم للعثور على موقع القصبة الهوائية19. ومع ذلك ، خلال هذه العملية ، اكتشفنا أن القصبة الهوائية للفئران C57 / BL ضيقة ، مما يجعل من الصعب العثور على الموقع الصحيح بهذه الطريقة دون مساعدة من معدات مثل المنظار الداخلي20. عند إجراء مزيد من الا…
The authors have nothing to disclose.
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم: 81903902) ، ومؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (رقم: 2019M663457) ، وبرنامج سيتشوان للعلوم والتكنولوجيا (رقم: 2020YJ0172) ، ومشروع Xinglin Scholar Research Premotion التابع لجامعة تشنغدو في الطب الصيني التقليدي (رقم: QJRC2022053).
Lipopolysaccharide | MERK | L4130 | LPS |
Microliter Syringes | SHANGHAI GAOGE INDUSTRY AND TRADE CO., LTD | 10028505008124 | To deliver LPS |
Mouse cannula | RWD Life Science | 803-03008-00 | Mouse cannula |
Mouse intubation kit | RWD Life Science | 903-03027-00 | Including a base, a riser, a intubator, a surgical forceps and some strings |
Pasteur pipette | Biosharp life science | BS-XG-03 | To verify the success of intubation |
Pentobarbital sodium | Beijing Chemical Co., China | 20220918 | To anesthetize mice |