클린룸 환경 및 세포 치료를 위한 미생물 제어 및 모니터링 전략
Summary
이 프로토콜은 클린룸 환경에서 미생물 바이오버든을 최소화하기 위한 모범 사례를 요약하고 환경 모니터링, 공정 모니터링 및 제품 멸균 테스트와 같은 전략을 포함합니다. 이는 현재 우수 조직 관행 표준 및 현재 우수 제조 관행 표준을 충족하는 데 필요한 제조 및 테스트 시설과 관련이 있습니다.
Abstract
강력한 가운, 세척, 환경 모니터링 및 인력 모니터링 조치를 통합하는 잘 검증되고 전체적인 프로그램은 세포 치료제 제조 제품군 및 해당 테스트 실험실에서 미생물 바이오버든을 최소화하여 시설이 통제 상태로 운영되고 있는지 확인하는 데 중요합니다. 멸균 테스트와 같은 품질 관리 조치를 통해 제품 안전을 보장하는 것은 최소 조작(섹션 361) 및 최소 조작 이상(섹션 351) 인간 세포, 조직, 세포 및 조직 기반 제품(HCT/P) 모두에 대한 규제 요구 사항입니다. 이 비디오에서는 미국 약전(USP) 및 미국 국립보건원(NIH) 대체 멸균 테스트 방법에서 제공하는 가운, 세척, 재료 스테이징, 환경 모니터링, 공정 모니터링 및 직접 접종을 사용한 제품 멸균 테스트를 포함하여 클린룸 환경에서 작동하기 위한 최상의 무균 관행을 개발하고 통합하는 방법에 대한 단계별 가이드를 제공합니다. 이 프로토콜은 현행 우수 조직 관리 기준(cGTP) 및 현행 우수 제조 관리 기준(cGMP)을 충족할 것으로 예상되는 시설에 대한 참조 가이드입니다.
Introduction
환경 모니터링(EM), 공정 모니터링 및 제품 멸균 테스트를 통해 강력한 미생물 모니터링 프로그램을 구현하는 것은 세포 치료 실험실에서 현행 우수 조직 관리 기준(cGTP) 및 현행 우수 제조 관리 기준(cGMP)에 대한 규제 요건입니다1. 또한 미국 식품의약국(FDA)은 제품의 품질 관리(QC) 테스트를 수행하는 실험실에서도 무균 충전 작업에 사용되는 것과 유사한 시설 및 관리 기능을 사용해야 한다고 예상합니다2.
이 프로토콜에는 네 가지 주요 섹션이 있습니다 : 1) 직원 가운, 청소 및 재료 스테이징을 포함한 무균 관행; 2) 생존 가능한 공기 및 표면 배양 및 생존 불가능한 입자 공기 모니터링을 포함한 EM; 3) 침전 플레이트 및 장갑을 낀 손가락 끝 샘플링을 포함한 공정 모니터링; 4) 미국 약전(USP) 방법3 또는 NIH 대체 무균 테스트 방법4를 통한 제품 무균 테스트. 이러한 조치를 함께 사용하면 시설이 통제 상태를 유지하도록 하는 효과적인 방법이 될 수 있습니다.
여기에 설명된 기술은 새로운 것이 아닙니다. 그러나 규제 기관 및 전문 기관의 현재 표준은 세부 사항이 부족하여 미생물 모니터링이 부재하거나 표준화되지 않은 관행을 구현하고 있으며, 특히 현장 제조 및 제품 멸균 테스트가 빠른 속도로 부상하고 있는 학술 센터에서 발생합니다 1,5,6 . 이 프로토콜은 최종 사용자 검증 및 위험 평가와 함께 사용할 때 규제 요구 사항을 충족하는 미생물 모니터링 및 제어 프로그램을 만들기 위한 가이드로 사용할 수 있습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 프로토콜에는 무균 기술의 유지 관리와 클린룸 및 BSC 내의 단방향 공기 흐름을 포함하여 몇 가지 중요한 영역이 있습니다. 모범 사례에는 난기류를 최소화하기 위해 천천히 의도적으로 이동하는 것이 포함됩니다. 무균 조작은 위에서가 아니라 제품 측면에서 수행해야합니다. 폐쇄 시스템 처리 및 최종 멸균 된 원료의 사용이 권장됩니다. 중요한 영역에서 말하고 벽이나 장비에 기대는 것은 피?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 국립 보건원 임상 센터 (National Institutes of Health Clinical Center)의 교내 연구 프로그램 (Intramural Research Program)의 지원을 받았다. 내용은 전적으로 저자의 책임이며 국립 보건원의 공식 견해를 나타내지 않습니다.
Materials
| 20-25°C Incubator | Lab preference | ||
| 30-35°C Incubator | Lab preference | ||
| Alcohol-based hand sanitizer | Lab preference | ||
| BacT/ALERT Dual-T instrument | BioMerieux Industry | ||
| Beard cover | Lab preference | ||
| Biosafety cabinet (BSC) | Lab preference | ||
| Cleanroom shoes | Lab preference | ||
| Fluidthioglycollate medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
| Handheld cleaning mop | Contec | 2665LF | |
| Hypodermic needle | Lab preference | ||
| iFA+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412990 | |
| iFN+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412991 | |
| Isokinetic head | Lab preference | ||
| Laser particle counter | TSI Incorporated | 9500-01 | |
| LpH III | Steris | 1S16CX | |
| Mirror | Lab preference | ||
| Non-sterile bouffant | Lab preference | ||
| Non-sterile gloves | Lab preference | ||
| Non-sterile shoe covers | Lab preference | ||
| Non-sterile sleeve covers | Lab preference | ||
| Parafilm | Lab preference | ||
| Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
| Plastic bag | Lab preference | ||
| Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, irradiated |
| Sabouraurd Dextrose Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, irradiated |
| Safety glasses | Lab preference | ||
| Scrubs (top and bottom) | Lab preference | ||
| Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
| Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
| Sterile alcohol wipe | Lab preference | ||
| Sterile boot covers | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile coveralls | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile face mask | Lab preference | ||
| Sterile gloves | Lab preference | ||
| Sterile hood | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile low-lint wipes | Texwipe | TX3210 | |
| Sterile mop cleaning pads | Contec | MEQT0002SZ | |
| Sterile sleeve covers | Kimberly Clark | 36077 | |
| Sterile spreading rod | Fisher Scientific | 14665231 | |
| Sterile syringe | Lab preference | ||
| Tacky mats | Lab preference | ||
| Tryptic Soy Agar (TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Broth (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
| Tubing | Lab preference | ||
| Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
| Viable air sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
| Vortex | Lab preference |
Referências
- Cundell, T., Atkins, J. W., Lau, A. F. Sterility testing for hematopoietic stem cells. Journal of Clinical Microbiology. , (2023).
- United States Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing – Current Good Manufacturing Practice. United States Food and Drug Administration. , (2004).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<71> Sterility Tests in USP43-NF38. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2022).
- England, M. R., Stock, F., Gebo, J. E. T., Frank, K. M., Lau, A. F. Comprehensive evaluation of compendial USP<71>, BacT/Alert Dual-T, and Bactec FX for detection of product sterility testing contaminants. Journal of Clinical Microbiology. 57 (2), 01548 (2019).
- Gebo, J. E. T., East, A. D., Lau, A. F. A side-by-side comparison of clinical versus current good manufacturing practices (cGMP) microbiology laboratory requirements for sterility testing of cellular and gene therapy products. Clinical Microbiology Newsletter. 43 (21), 181-191 (2021).
- Gebo, J. E. T., Lau, A. F. Sterility testing for cellular therapies: What is the role of the clinical microbiology laboratory. Journal of Clinical Microbiology. 58 (7), 01492 (2020).
- International Organization for Standardization. ISO 14644-1:2015 Cleanrooms and associated controlled environments – Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration. International Organization for Standardization. , (2015).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 13 Revised 2022 (TR 13) Fundamentals of an Environmental Monitoring Program. Parenteral Drug Association, Inc. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1116> Microbiological Evaluation of Cleanrooms and Other Controlled Environments in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Guinet, R., et al. Multicenter study on incubation conditions for environmental monitoring and aseptic process simulation. PDA journal of pharmaceutical science and technology. 71 (1), 43-49 (2017).
- Gordon, O., Berchtold, M., Staerk, A., Roesti, D. Comparison of different incubation conditions for microbiological environmental monitoring. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. 68 (5), 394-406 (2014).
- Anders, H. J., et al. Multisite qualification of an automated incubator and colony counter for environmental and bioburden applications in pharmaceutical microbiology. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1072> Disinfectants and Antiseptics. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1071> Rapid Microbial Tests for Release of Sterile Short-Life Products: A Risk-Based Approach in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. PUSP<1223> Validation of Alternative Microbiological Methods in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 33, Revised 2013 (TR 33) Evaluation, Validation and Implementation of Alternative and Rapid Microbiological Methods. Parenteral Drug Association, Inc. , (2013).
- Putnam, N. E., Lau, A. F. Comprehensive study identifies a sensitive, low-risk, closed-system model for detection of fungal contaminants in cell and gene therapy products. Journal of Clinical Microbiology. 59 (11), 0135721 (2021).
- Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation. Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products Annexes (PE 009-16 (Annexes)). Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation Scheme. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<825> Radiopharmaceuticals – Preparation, Compounding, Dispensing, and Repackaging in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
