Este protocolo descreve um modelo neonatal de circulação extracorpórea (CEC), com parada circulatória e cardíaca como ferramenta para o estudo de danos cerebrais graves e outras complicações secundárias à CEC.
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Artigo de método
Modelo Animal Pediátrico de Ressuscitação Cardiopulmonar Extracorpórea Após Parada Circulatória Prolongada
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
A cardiopatia congênita (DCC) é a malformação congênita mais prevalente, com cerca de um milhão de nascimentos impactados em todo o mundo por ano. A investigação abrangente desta doença requer modelos animais apropriados e validados. Os leitões são comumente usados para pesquisa translacional devido à sua anatomia e fisiologia análogas. Este trabalho teve como objetivo descrever e validar um modelo de circulação extracorpórea (CEC) em leitões neonatais com parada circulatória e cardíaca (PCR) como ferramenta para o estudo de danos cerebrais graves e outras complicações da cirurgia cardíaca. Além de incluir uma lista de materiais, este trabalho fornece um roteiro para outros investigadores planejarem e executarem este protocolo. Depois que profissionais experientes realizaram vários ensaios, os resultados representativos do modelo demonstraram uma taxa de sucesso de 92%, com falhas atribuídas ao pequeno tamanho do leitão e à anatomia variante do vaso. Além disso, o modelo permitiu que os profissionais selecionassem entre uma ampla variedade de condições experimentais, incluindo tempos variados em AC, alterações de temperatura e intervenções farmacológicas. Em resumo, esse método usa materiais prontamente disponíveis na maioria dos ambientes hospitalares, é confiável e reprodutível e pode ser amplamente empregado para aprimorar a pesquisa translacional em crianças submetidas a cirurgia cardíaca.
Introdução
A cardiopatia congênita (CC) é a malformação congênita mais prevalente, com cerca de um milhão de nascimentos impactados em todo o mundo por ano1. Embora os avanços modernos na cirurgia cardiotorácica (STC) e no tratamento intensivo tenham melhorado as taxas de mortalidade, as comorbidades permanecem extremamente comuns 2,3,4,5. Anormalidades do neurodesenvolvimento, incluindo deficiências cognitivas e motoras, bem como dificuldades de aprendizagem, são relatadas em cerca de 25% a 50% desses pacientes
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Protocolo
O presente procedimento foi aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal (CEEA) do Centro de Medicina Comparada e Bioimagem da Catalunha (CEEA-CMCiB). O Governo da Catalunha também autorizou o protocolo experimental (nº 11652), número de identificação do arquivo FUE-2022-02381434 e ID QBXQ3RY3J. Profissionais experientes, incluindo veterinários certificados que fornecem supervisão e assistência, realizaram todos os experimentos. Leitões (Sus scrofa domestica), com 4-6 dias de idade, pesando 2,5-3,5 kg, foram utilizados para o presente estudo. Foi feita uma tentativa de equilibrar a distribuição de gênero para evitar vieses relacionados.
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Resultados
Durante um período de 6 meses, o protocolo completo foi realizado 12 vezes por uma equipe interdisciplinar de médicos intensivistas pediátricos, cardiologistas pediátricos, veterinários e técnicos (Figura Suplementar 2 e Figura Suplementar 3).
A Figura 1 e a Figura 2 demonstram a anatomia esperada dos animais utilizados neste protocolo. Os leitões incluídos tinham em média 4,8 dias de idade (4-6 dias).......
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Discussão
A circulação extracorpórea é comumente usada durante a cirurgia cardíaca para adultos, crianças e neonatos. Ele conta com um circuito extracorpóreo motorizado e um oxigenador de membrana que trabalham juntos para oxigenar o sangue e fornecer estabilização pulmonar e cardíaca. Estudos anteriores demonstraram que a CEC pode afetar adversamente muitos sistemas de órgãos (renal, cerebral, pulmonar, cardíaco, gastrointestinal) tanto em pacientes doentes quanto em pacientes previamente saudáveis 22,23,2.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Este projeto recebeu financiamento do programa de pesquisa e inovação Horizonte 2020 da União Europeia sob o acordo de subvenção nº 101017113, do Instituto de Salud Carlos III (PI20/00298), da Beca Carmen de Torres (Fundació Sant Joan de Déu) e do Vanderbilt Medical Scholars Program. Agradecemos a todos os funcionários do CMCiB, incluindo Jordi Grifols, María del Mar Arevalo, Juan Ricardo Gonzalez, Sara Capdevila, Josep Puig e Gemma Cristina Monte Rubi). Também agradecemos especialmente a Abril Culell Camprubí e ao Dr. Sergi Cesar Díaz por sua ajuda nos desenhos anatômicos.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 1,5% sevofluorano | Zoetis | 20070289 | |
| tubo endotraqueal de 2,5 mm | Henry Schein | 988-1782 | |
| Cateter de 3 Fr para acesso arterial periférico | Prodimed | 3872.1 | |
| Cateter de 4 Fr para acesso venoso periférico | Prodimed | 3872.13 | |
| 6 Cânula arterial pediátrica de ECMO francesa | Medtronic | 77206 | |
| 8 Cânula venosa pediátrica ECMO francesa | Medtronic | 68112 | |
| Adrenaline | B Braun | 469801-1119 | |
| Pinça Adson | Instrumentos Allgaier | 08-030-130 | Qualquer marca pode ser substituída pelo |
| manguito BP | Mindray | ||
| Buprenorfina (0,01 mg/kg) | Richter Pharma | #9004114000537 | |
| Gluconato de cálcio (2,25 mmol/10 mL) | B Braun | 570-12606194-1119 | |
| Dexmedetomidina (0,5-2,0 µ g/kg/min) | Orion farma | GTN 064321000017253 | |
| Doletol | vetoquinol | #3605870004904 | |
| Dopamina | hikma | A044098010 | |
| Fentanil (25-200 µ g/kg/min) | Kern Pharma | 756650.2H | |
| Sangue de porco doador fresco Tipo O | Qualquer | ||
| Trocador de calor | Maquet Gmbh & Co | MCP70107.2130 | |
| Heparina (1350 UI) | ROVI | 641641.1 | |
| Afastador Irwin | Aesculap | BV104R | Qualquer marca pode ser substituída |
| Cetamina (20 mg/kg) | Lubrificante Richter Pharma | #9004114000452 | |
| orotraqueal | |||
| Midazolam (0,3 mg/kg) | Serra Pamies | 619627.4 | |
| Pinça de mosquito | Aesculap | BH109R | Qualquer marca pode ser substituída |
| Pinça de agulha | Aesculap | BM016R | Qualquer marca pode ser substituída |
| Normal solução salina (0,9%) | B Braun Fisiovet | 5/469827/0610 | Qualquer marca pode ser substituída |
| Grampos de plástico para tubulação | Achim Schulz-Lauterbach | DBGM | Qualquer marca pode ser substituída |
| Cloreto de potássio (9 mEq) | B Braun | 3545156 | |
| Propofol (0,5 mg/kg) | Zoetis | 579742.7 | |
| Oxigenador de Membrana Quadrox | Maquet Gmbh & Co | BE-HMOSD 300000 | |
| Termômetro retal | Qualquer | ||
| console RotaFlow Sistema ECMO | Maquet Gmbh & Co | MCP00703177 | Sistema de ECMO Neonatal |
| Bisturi | Aesculap | BB074R | Qualquer marca pode ser substituída |
| Bicarbonato de sódio (1 M) | Fresenius Kabi | 634477.4 OH | |
| Tesoura cirúrgica | Talmed Inox | 112 | Qualquer marca pode ser substituída Sutura |
| (3/0 poli absorvível) | B Braun Novosyn (R) | 0068030N1 | Qualquer marca pode ser substituída |
Referências
- vander Linde, D., et al. Birth prevalence of congenital heart disease worldwide: A systematic review and meta-analysis. Journal of the American College of Cardiology. 58 (21), 2241-2247 (2011).
- Claessens, N. H. P., et al.
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Reimpressões e permissões
