Um procedimento de estimulação cardíaca controlada para avaliação das funções diastólicas dependentes da frequência cardíaca em modelos murinos de insuficiência cardíaca

Summary

O presente protocolo descreve a obtenção da relação pressão-volume por meio da estimulação transesofágica, que serve como uma ferramenta valiosa na avaliação da função diastólica em modelos murinos de insuficiência cardíaca.

Abstract

A insuficiência cardíaca com fração de ejeção preservada (ICFEP) é uma condição caracterizada por disfunção diastólica e intolerância ao exercício. Embora testes hemodinâmicos ou ressonância magnética possam ser usados para detectar disfunção diastólica e diagnosticar ICFEP em humanos, tais modalidades são limitadas na pesquisa básica usando modelos de camundongos. Um teste ergométrico em esteira é comumente usado para esse fim em camundongos, mas seus resultados podem ser influenciados pelo peso corporal, força muscular esquelética e estado mental. Aqui, descrevemos um protocolo de estimulação atrial para detectar alterações no desempenho diastólico dependentes da frequência cardíaca (FC) e validar sua utilidade em um modelo de ICFEP em camundongos. O método envolve anestesia, intubação e análise de alça pressão-volume (PV) concomitante à estimulação atrial. Neste trabalho, um cateter de condutância foi inserido por via apical do ventrículo esquerdo e um cateter de estimulação atrial foi colocado no esôfago. Alças PV basais foram coletadas antes que a FC fosse retardada com ivabradina. As alças PV foram coletadas e analisadas em incrementos de FC variando de 400 bpm a 700 bpm via estimulação atrial. Usando esse protocolo, demonstramos claramente o comprometimento diastólico dependente da FC em um modelo de ICFEP metabolicamente induzida. Tanto a constante de tempo de relaxamento (Tau) quanto a relação pressão-volume diastólico final (EDPVR) pioraram à medida que a FC aumentou em comparação com camundongos controle. Em conclusão, este protocolo de estimulação atrial controlada é útil para detectar disfunções cardíacas dependentes de FC. Ele fornece uma nova maneira de estudar os mecanismos subjacentes da disfunção diastólica em modelos de camundongos com ICFEP e pode ajudar a desenvolver novos tratamentos para essa condição.

Introduction

A insuficiência cardíaca representa uma das principais causas de hospitalização e morte em todo o mundo, e a insuficiência cardíaca com fração de ejeção preservada (ICFEP) é responsável por cerca de 50% de todos os diagnósticos de insuficiência cardíaca. A ICFEP é caracterizada por disfunção diastólica e intolerância ao exercício, e as anormalidades hemodinâmicas associadas, como disfunção diastólica, podem ser claramente detectadas por meio de testes hemodinâmicos com estresse físico ou ressonância magnética ^1,2.

Em modelos experimentais, entretanto, as modalidades disponíveis para....

Protocol

Este protocolo animal foi aprovado pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais e seguiu as normas para experimentação animal e atividades relacionadas da Universidade de Tóquio. Para o presente estudo, foram utilizados camundongos machos C57/Bl6J com 8-12 semanas de idade. Os animais foram obtidos de fonte comercial (ver Tabela de Materiais). Um modelo de ICFEP foi estabelecido administrando-se uma dieta hiperlipídica por 15 semanas em conjunto com o éster metílico de NG-nitro-L-arginina, conforme descrito anteriormente¹⁰.

1. Preparo do cateter e calibração da pressão/volume....

Results

Os dados basais da alça PV são exibidos na Figura 1 e na Tabela 1. No início do estudo (na ausência de estimulação), não houve diferenças significativas em parâmetros diastólicos, como a constante de tempo de relaxamento (Tau), a taxa mínima de mudança de pressão (dP/dt min) e EDPVR entre os camundongos controle e HFpFEP. No entanto, os camundongos HFpEF exibiram pressão arterial e pressão arterial (Ea) mais elevadas, como mostrado na Figura 1, .......

Discussion

Apresentamos uma metodologia para avaliar as relações pressão-volume com a aplicação da estimulação transesofágica. A intolerância ao exercício é uma das principais características da ICFEP, porém não existem técnicas disponíveis para a avaliação da função cardíaca em camundongos durante o exercício. Nosso protocolo de estimulação artificial oferece uma ferramenta valiosa para detectar disfunção diastólica, que pode não ser aparente em condições de repouso.

Para obter uma alça fotovoltaica de .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Sutura de seda 2-0, sterlie	Alfresa Pharma Corporation, Osaka, Japão	62-9965-57	Suprimentos cirúrgicos
Cateter de eletrodo tetrapolar 2-Fr	Fukuda Denshi, Japão e UNIQUE MEDICAL, Japão	Suprimentos cirúrgicos	feitos sob medida
Albumina Soro bovino	Nacalai Tesque, Inc., Kyoto, Japão	01859-47
Diversos C57 / BI6J mouse	Jackson Laboratory		animais
Cateter de condutância	Millar Instruments, Houston, TX	PVR 1035
Cautério elétrico, Kit de faca de eletrocautério	ellman-Japão, Osaka, Japão	1-1861-21	Suprimentos cirúrgicos
Etomidate	Tokyo Chemical Industory Co., Ltd., Tóquio Japão	E0897	anestésica
S44G Estimulador de pulso quadrado	Astro-Med, Oeste Warwick, RI		Equipamento de estimulação
Isoflurane	Viatris Inc., Tóquio, Japão	8803998	Anestésico
Ivabradina	Tokyo Chemical Industory Co., Ltd., Tóquio Japão	I0847
Software LabChart	ADInstruments, Sydney, Austrália	LabChart 7	Equipamento hemodinâmico
MPVS Ultra	Millar Instruments, Houston, TX	PL3516B49	Equipamento hemodinâmico
Brometo de pancronium	Sigma Aldrich Co., St. Louis, MO	15500-66-0	PE10 anestésico
	Research Center  Co. Ltd., Tóquio, Japão	62101010	Suprimentos Cirúrgicos
PowerLab 8/35	ADInstruments, Sydney, Austrália	PL3508/P	Equipamento hemodinâmico
PVR 1035	Millar Instruments, Houston, TX	842-0002	Equipamento hemodinâmico
Uretano (carbamato de etila)	Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japão	050-05821	anestésica
	transônica, Ithaca, NY	MA1PRB	Suprimentos cirúrgicos