Мы представляем протокол манипуляций Tuina, выполненных на крысах с остеоартрозом коленного сустава, вызванным гипсом. Основываясь на предварительных результатах, он предположил, что эффективность метода основана на уменьшении воспаления и потери хряща.
Клинические испытания показывают, что манипуляция Tuina эффективна при лечении остеоартрита коленного сустава (KOA), в то время как для выяснения ее механизма необходимы дальнейшие исследования. Поэтому манипуляции на животных моделях остеоартроза коленного сустава имеют решающее значение. Этот протокол обеспечивает стандартный процесс манипуляций с Туиной на крысах КОА и предварительное исследование механизма Туина для КОА. Метод манипуляций с прессом и разминанием (разновидность манипуляции Туйна, которая относится к надавливанию и разминанию определенного участка поверхности тела) применяется на 5 акупунктурных точках вокруг коленного сустава крыс. Сила и частота манипуляций стандартизировались с помощью записей давления пальцами, а положение крысы во время манипуляции подробно описано в протоколе. Эффект манипуляции можно измерить с помощью болевых тестов и микроскопических данных синовиальной и хрящевой оболочки. Крысы с КОА показали значительное улучшение болевого поведения. Воспалительная инфильтрация синовиальной ткани была снижена в группе Туйна, а экспрессия фактора некроза опухоли (ФНО)-α была достоверно ниже. По сравнению с контрольной группой, апоптоз хондроцитов был меньше в группе Туина. В этом исследовании представлен стандартизированный протокол манипуляций с Туиной на крысах с КОА и предварительное доказательство того, что терапевтические эффекты Туина могут быть связаны с уменьшением воспаления синовиальной оболочки и отсроченного апоптоза хондроцитов.
Остеоартроз коленного сустава (КОА) – это дегенеративное заболевание, которое в основном проявляется болью в суставах. Фиброз, растрескивание, изъязвление и потеря суставного хряща являются основными причинами этого заболевания1. КОА имеет высокую распространенность и может оказывать глубокое влияние на повседневную жизнь пациентов, вызывая инвалидность в тяжелых случаях. Среди людей в возрасте 45-84 лет распространенность КОА увеличивается с возрастом, а распространенность среди людей в возрасте 85 лет и старше составляет 15%, с преобладанием у женщин 2,3%. Кроме того, KOA может стать серьезным экономическим бременем как для отдельного человека, так и для общества. Опрос показал, что прямые расходы на здравоохранение на душу населения достигают 8 858 долларов США ± 5 120 долларов СШАв год. Со старением общества КОА стала глобальной проблемой здравоохранения и серьезной социальной проблемой, а также актуальной проблемой для научных исследований.
Научно обоснованные исследования показали эффективность манипуляций Туина при лечении КОА5. Манипуляция Туина может облегчить боль и улучшить дисфункцию у пациентов с КОА, механизм которой связан с противовоспалительным действием 6,7. Ученые обнаружили, что манипуляции Туина эффективно ингибируют экспрессию воспалительных факторов интерлейкина (ИЛ)-β и 5-гидрокситриптамина и замедляют дегенерацию суставного хряща у кролика моделиКОА 8. Было высказано предположение, что Туина может способствовать кровообращению и метаболизму в месте поражения, что помогает устранить воспалительные факторы, такие как IL-1, IL-6 и фактор некроза опухоли (TNF)-α, тем самым облегчая клинические симптомы КОА9. Кроме того, пассивное движение сустава с помощью манипуляций Туина может способствовать проникновению и диффузии синовиальной жидкости в суставной хрящ и улучшает метаболизм питательных веществ в тканях10. Другие исследования показали, что манипуляции Туина могут эффективно улучшать биомеханические показатели у пациентов с КОА11. Манипуляции, применяемые к мягким тканям, могут улучшить распределение нагрузки по конечностям и улучшить функцию равновесия12,13. В то же время при некоторых манипуляциях с выравниванием суставов выравнивание нижних конечностей также может быть скорректировано для коррекции аномальной походки14,15.
Механизм действия манипуляций Туина при лечении КОА еще предстоит изучить, а потому необходимо экспериментальное исследование. Ключом к применению Tuina на экспериментальных животных является стандартизация методов моделирования, фиксации животных и вмешательства16. Метод моделирования определяет, может ли подопытное животное проявлять признаки заболевания. Между тем, соответствующие методы фиксации могут облегчить вмешательство манипуляции Туйна и лучше отразить эффект Туины. Стандартизация методов вмешательства является самой сложной частью манипуляции Туйна. В 2010 г. в базовой системе китайских стандартов акупунктуры упоминались стандарты акупунктурных точек для экспериментальных животных, обеспечивающие возможность проведения операций иглоукалывания и туйна в экспериментах на животных17. Тем не менее, по-прежнему существуют трудности со стандартизацией манипуляций с Туйной. Существует несколько видов манипуляций Туина18. Выбор конкретной манипуляции в основном зависит от заболевания, подлежащего лечению, и терапевтических теорий, которые предпочитает исполнитель. В исследовании Туйна для КОА больше внимания было уделено манипуляциям с точечным нажатием (нажатие на определенные акупунктурные точки большим пальцем или локтем), манипуляциям Ичичичань (манипуляция с надавливанием большим пальцем) и манипуляциям с нажимом и разминанием (что относится к надавливанию и разминанию определенной области поверхности тела пальцем или ладонью)19. Манипуляции с прессом и разминанием являются одной из наиболее широко используемых манипуляций Туины, которая сочетает в себе надавливание и разминание для перемещения подкожной клетчатки20. Манипуляции с прессом и разминанием, применяемые к акупунктурным точкам, могут улучшить кровообращение и облегчить боль и представляют собой терапевтический эффект Туйна на КОА19.
В этом протоколе будет подробно описана операция манипуляций с прессом и разминанием на крысах с КОА, включая выбранные акупунктурные точки, интенсивность и частоту манипуляций и положение тела крысы, чтобы обеспечить ориентир для будущих исследований.
В этом исследовании представлен протокол манипуляций Туина на крысах с КОА. С помощью тестов болевого поведения и гистоморфологических данных было высказано предположение, что такая серия манипуляций с Туйной, примененная к крысам с КОА, может уменьшить воспаление синовиальной оболо?…
The authors have nothing to disclose.
Работа выполнена при поддержке Шанхайского проекта строительства критически важных клинических специальностей (номер гранта: Shslczdzk04001); Парусная программа Шанхайской комиссии по науке и технике (номер гранта: 22YF1444300); Проекты в рамках бюджета Шанхайского университета традиционной китайской медицины (номер гранта: 2021LK091).
absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |