Alçı ile immobilize edilmiş diz osteoartriti olan sıçanlarda yapılan Tuina manipülasyonu için bir protokol sunuyoruz. Ön sonuçlara dayanarak, yöntemin etkinliğinin iltihaplanma ve kıkırdak kaybının azaltılmasına dayandığını öne sürdü.
Klinik çalışmalar, Tuina manipülasyonunun diz osteoartritinin (KOA) tedavisinde etkili olduğunu gösterirken, mekanizmasını keşfetmek için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır. Bu nedenle, diz osteoartritinin hayvan modellerinin manipülasyonu kritiktir. Bu protokol, KOA sıçanlarında Tuina manipülasyonu için standart bir süreç ve KOA için Tuina mekanizmasının ön araştırmasını sağlar. Pres ve yoğurma manipülasyon yöntemi (vücut yüzeyinin belirli bir bölgesinin preslenmesi ve yoğrulması anlamına gelen bir tür Tuina manipülasyonu), sıçanların diz eklemi etrafındaki 5 akupunktur noktasına uygulanır. Manipülasyonun kuvveti ve sıklığı parmak basıncı kayıtları ile standardize edildi ve manipülasyon sırasında sıçanın konumu protokolde ayrıntılı olarak açıklandı. Manipülasyonun etkisi ağrı davranış testleri ve sinovyal ve kıkırdaktaki mikroskobik bulgularla ölçülebilir. KOA sıçanları ağrı davranışında önemli bir iyileşme gösterdi. Tuina grubunda sinovyal doku inflamatuar infiltrasyonu azaldı ve tümör nekroz faktörü (TNF)-α ekspresyonu anlamlı olarak daha düşüktü. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, kondrosit apoptozu Tuina grubunda daha azdı. Bu çalışma, KOA sıçanlarında Tuina manipülasyonu için standart bir protokol ve Tuina’nın terapötik etkilerinin sinovyal inflamasyonu ve gecikmiş kondrosit apoptozunu azaltmakla ilişkili olabileceğine dair ön kanıt sunmaktadır.
Diz osteoartriti (KOA), esas olarak eklem ağrısı ile kendini gösteren dejeneratif bir hastalıktır. Fibrozis, çatlama, ülserasyon ve eklem kıkırdağı kaybı bu hastalığın başlıca nedenleridir1. KOA’nın prevalansı yüksektir ve hastaların günlük yaşamları üzerinde derin bir etkiye neden olarak ciddi vakalarda sakatlığa neden olabilir. 45-84 yaş arası kişilerde KOA prevalansı yaşla birlikte artar ve 85 yaş ve üzeri kişilerde görülme sıklığı %15 olup, kadınlarda baskındır 2,3. Buna ek olarak, KOA hem bireye hem de topluma ciddi bir ekonomik yük getirebilir. Bir anket, kişi başına KOA’daki doğrudan sağlık bakım maliyetlerinin yılda 8.858 $ ± 5.120 $’a ulaştığını gösterdi4. Toplumun yaşlanmasıyla birlikte KOA, dünya çapında bir sağlık sorunu ve önemli bir sosyal sorun haline geldiği gibi, bilimsel araştırmalar için güncel bir konu haline gelmiştir.
Kanıta dayalı çalışmalar, Tuina manipülasyonunun KOA5 tedavisinde etkinliğini göstermiştir. Tuina manipülasyonu, mekanizması anti-enflamatuar etkilerle ilişkili olan KOA hastalarında ağrıyı hafifletebilir ve işlev bozukluğunu iyileştirebilir 6,7. Bilim adamları, Tuina manipülasyonunun inflamatuar faktörler interlökin (IL)-β ve 5-hidroksitriptamin ekspresyonunu etkili bir şekilde inhibe ettiğini ve bir tavşan KOA model8’de eklem kıkırdağının dejenerasyonunu yavaşlattığını buldular. Tuina’nın lezyon bölgesinde kan dolaşımını ve metabolizmasını destekleyebileceğini, bunun da IL-1, IL-6 ve tümör nekroz faktörü (TNF)-α gibi enflamatuar faktörlerin temizlenmesine yardımcı olduğunu ve böylece KOA9’un klinik semptomlarını hafiflettiğini öne sürdü. Ek olarak, eklemin Tuina manipülasyonu yoluyla pasif hareketi, sinovyal sıvının eklem kıkırdağına nüfuz etmesini ve difüzyonunu teşvik edebilir ve doku besin metabolizmasınıiyileştirir 10. Diğer çalışmalar, Tuina manipülasyonunun KOA hastalarında biyomekanik indeksleri etkili bir şekilde iyileştirebileceğini göstermiştir11. Yumuşak dokulara uygulanan manipülasyonlar, uzuvlar üzerindeki stres dağılımını iyileştirebilir ve denge fonksiyonunu geliştirebilir12,13. Aynı zamanda, bazı eklem ayarlama manipülasyonları ile, anormal yürüyüşleri düzeltmek için alt ekstremitelerin hizalanması daayarlanabilir 14,15.
Tuina manipülasyonunun KOA tedavisinde etki mekanizması araştırılmaya devam etmektedir ve bu nedenle deneysel bir çalışma gereklidir. Tuina’nın deney hayvanlarında uygulanmasının anahtarı, modelleme, hayvan fiksasyonu ve müdahale yöntemlerinin standardizasyonudur16. Modelleme yöntemi, deney hayvanının hastalığın özelliklerini sergileyip sergileyemeyeceğini belirler. Bu arada, uygun fiksasyon yöntemleri Tuina manipülasyonunun müdahalesini kolaylaştırabilir ve Tuina’nın etkisini daha iyi yansıtabilir. Müdahale yöntemlerinin standardizasyonu Tuina manipülasyonunun en zor kısmıdır. 2010 yılında, Çin akupunktur standartlarının temel sistemi, deney hayvanları için akupunktur noktası standartlarından bahsederek, hayvan deneylerinde akupunktur ve Tuina operasyonlarına olanak sağlamıştır17. Bununla birlikte, Tuina manipülasyonunu standartlaştırmada hala zorluklar var. Tuina manipülasyonunun birden fazla türü vardır18. Spesifik manipülasyonun seçimi esas olarak tedavi edilecek hastalığa ve sanatçının tercih ettiği terapötik teorilere bağlıdır. Tuina’nın KOA için yaptığı çalışmada, nokta basma manipülasyonuna (başparmak veya dirsek ile belirli akupunktur noktalarına basma), Yizhichan itme manipülasyonuna (başparmağı kıpırdatarak itme manipülasyonu) ve pres ve yoğurma manipülasyonuna (vücut yüzeyinin belirli bölgesinin parmak veya avuç içi ile bastırılması ve yoğrulması anlamına gelir) daha fazla dikkat edilmiştir.19. Pres ve yoğurma manipülasyonu, deri altı dokusunu hareket ettirmek için presleme ve yoğurmayı birleştiren en yaygın kullanılan Tuina manipülasyonlarından biridir20. Akupunktur noktalarına uygulanan pres ve yoğurma manipülasyonu kan dolaşımını hızlandırabilir ve ağrıyı hafifletebilir ve Tuina’nın KOA19 üzerindeki terapötik etkisini temsil eder.
Bu protokolde, KOA sıçanları üzerinde pres ve yoğurma manipülasyonunun çalışması, gelecekteki araştırmalar için bir referans sağlamak amacıyla, seçilen akupunktur noktaları, manipülasyonun yoğunluğu ve sıklığı ve sıçanın vücut pozisyonu dahil olmak üzere ayrıntılı olarak açıklanacaktır.
Bu çalışma, KOA sıçanlarında Tuina manipülasyonu için bir protokol sağlar. Ağrı davranış testleri ve histomorfolojik bulgular sayesinde, KOA sıçanlarına uygulanan böyle bir dizi Tuina manipülasyonunun, KOA’nın hayvan modellerinde Tuina manipülasyonunun bir referansı olabilecek sinovyal inflamasyonu ve kıkırdak apoptozunu azaltabileceğini öne sürdü.
Protokol sırasında birkaç kritik prosedür vardır. İlk olarak, KOA modelini indüklemek için uygun bir yöntem se?…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma, Şanghay Kritik Klinik Uzmanlıklar İnşaat Projesi (Hibe Numarası: Shslczdzk04001) tarafından desteklenmiştir; Şanghay Bilim ve Teknoloji Komisyonu’nun Yelken programı (Hibe Numarası: 22YF1444300); Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi bütçesi dahilindeki projeler (Hibe Numarası: 2021LK091).
absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |