إنشاء نموذج للفئران الناسور الفموي الأنفي
Summary
توضح هذه المقالة إجراء خطوة بخطوة لإنشاء نموذج الفئران مع الناسور الفموي. تم إنشاء الناسور الفموي الأنفي عن طريق استخدام الكي العيني الساخن لإتلاف جزء خط الوسط من الحنك الصلب ، مما أدى إلى تكوين فتحة بين تجاويف الفم والأنف.
Abstract
تقدم هذه الدراسة طريقة تستخدم الكي العيني الساخن لتطوير نموذج قابل للتطبيق لفحص الناسور الفموي الأنفي. تم استخدام الفئران C57BL / 6 لإنشاء نموذج الناسور الفموي الأنفي (ONF). لإنشاء ONF ، تم تخدير الفئران وشل حركتها وكشف حنكها الصلب. أثناء العملية الجراحية ، تم إحداث إصابة مخاطية كاملة السماكة 2.0 × 1.5 مم في خط الوسط من الحنك الصلب باستخدام الكي العيني. كان من الضروري التحكم في حجم ONF وتقليل النزيف من أجل ضمان نجاح التجربة. تم التحقق من فعالية نموذج ONF في اليوم 7 بعد العملية ، بما في ذلك التقييمات التشريحية والوظيفية. أكد وجود الحاجز الأنفي داخل تجويف الفم وتدفق الماء المعقم من الخياشيم عند الحقن في تجويف الفم الإنشاء الناجح لنموذج ONF. أظهر النموذج ناسور فموي أنفي عملي وناجح ، يتميز بمعدل وفيات منخفض ، وتغيرات كبيرة في الوزن ، واختلاف ضئيل في حجم ONF. قد تنظر الدراسات المستقبلية في اعتماد هذه المنهجية لتوضيح آليات التئام جروح الحنك واستكشاف علاجات جديدة للناسور الفموي الأنفي.
Introduction
الناسور الفموي الأنفي (ONF) ، وهو فتحة غير طبيعية بين تجاويف الفم والأنف ، يظهر سريريا كعيب في منطقة هيكلية من العملية السنخية إلى اللهاة ، والتي تحدث عادة كمضاعفات بعد إصلاح الحنك المشقوق1. يعاني المرضى الذين يعانون من ONF من ارتجاع الطعام واضطرابات النطق وضعف وظيفة البلعوم ، مما يؤثر بشكل كبير على نوعية حياتهم2،3،4. يتراوح معدل ONF بعد الجراحة من 2.4٪ إلى 55٪ بسبب عوامل مثل عرض الشق ونوع Veau والطريقة الجراحية5،6،7،8. بالإضافة إلى ذلك ، فإن معدل التكرار بعد إصلاح ONF مرتفع ، يتراوح من 0٪ إلى 43٪ 9.
أظهرت العديد من العلاجات الجديدة مؤخرا واعدة في مجال ONF ، بما في ذلك المواد المختلفة والأدوية والتقنيات الجديدة 10،11،12،13،14،15،16،17. يعد التقييم الدقيق للآثار العلاجية أمرا ضروريا لأنه يوفر الأساس لاختيار علاجات ONF وتطويرها. ومع ذلك ، فإن الحصول على تقييم صالح على المدى القصير للآثار العلاجية بخلاف الجراحة يمثل تحديا ، حيث تختلف خصائص ONFs بين المرضى المختلفين. لذلك ، يعد إنشاء نموذج مرض ONF ضروريا للتحقق من فعالية طرق العلاج هذه.
لعدة عقود ، ابتكر الباحثون نموذج الناسور الفموي الأنفي (ONF) في أنواع حيوانية مختلفة ، بما في ذلك الفئران18،19 ، والخنازيرالصغيرة 20،21 ، والخنازيرالصغيرة 22 ، 23 ، حيث تمتلك هذه الأنواع حنكا صلبا كبيرا مناسبا للتلاعب الجراحي. ومع ذلك ، فإن الفئران لديها تسلسل جيني وجينوم كامل مشابه لجينوم البشر ، مما يجعلها نموذجا مهما للبحث وتطوير أدوية جديدة24،25،26. علاوة على ذلك ، تقدم الفئران اختلافا طفيفا من دفعة إلى أخرى ، مما يجعلها خيارا مناسبا لإنشاء نموذج ONF12،13،27.
ومع ذلك ، لم يتم وصف الخطوات التفصيلية لإنشاء ONF ، ولم يتم أخذ استقرار حجم ONF في الاعتبار. بالإضافة إلى ذلك ، اعتمد التحقق من تكوين ONF فقط على الملاحظة28 ، دون ضمان الاتصال المباشر بين تجاويف الفم والأنف. لم يتم إثبات ذلك من خلال وسائل أخرى ، مثل فقدان الفأر لوزن الجسم بسبب صعوبات في الأكل بسبب ONF. علاوة على ذلك ، لم يتم النظر في الاختلاف الطبيعي في حجم الجرح ، وهو أمر بالغ الأهمية للدراسات حول الأدوية أو المواد التي تعزز أو تمنع التئام الجروح. لذلك ، هناك حاجة ماسة لإنشاء نموذج ONF مستقر ومصدق عليه.
كان الهدف من هذه الدراسة هو تطوير نموذج عملي ل ONF يعالج القضايا المذكورة أعلاه ، على أمل أن يكون هذا البروتوكول بمثابة أساس للبحث المستقبلي حول آليات التئام الجروح الحنكية والعلاجات الجديدة ل ONF.
Protocol
Representative Results
Discussion
استكشف الباحثون العديد من المواد والأدوية والتقنيات الجديدة لعلاج ONF10،11،12،13،14،15،16،17. مع التقدم في العمليات الجراحية ، تم تقليل حدوث وتكرار O…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذا العمل من قبل برنامج البحث والتطوير ، ومستشفى غرب الصين لطب الأسنان ، وجامعة سيتشوان (RD-02-202107) ، وبرنامج دعم العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (2022NSFSC0743) ، ومؤسسة سيتشوان لعلوم ما بعد الدكتوراه (TB2022005) منحة إلى H. Huang.
Materials
| Germinator | Electron Microscopy Sciences | 66118-20 | Heating and disinfection equipment |
| Latex gloves | Allmed | or similar | |
| Lights | Olympus | A1813 | |
| Meloxicam | MedChemExpress | HY-B0261 | crushed; 5 mg/kg |
| Microsurgical instruments (scissors and tweezers) | Jiangsu Tonghui Medical Devices Co. | M-Y-0087 | Surgical instrument |
| Ophthalmologic cautery | Suqian Wenchong Medical Equipment Co. | 1.00234E+13 | Surgical instrument |
| Sterile cotton, | Yancheng Begu Technology Co. | or similar | |
| Sterile metal foil | Biosharp | or similar | |
| Sterile sheets | 3M | XH003801129 | or similar |
| Surgical drapes | Yancheng Begu Technology Co. | or similar | |
| Syringes | Yancheng Begu Technology Co. | S-015301 | or similar |
| Tape | Bkmamlab | or similar | |
| Temperature maintenance device | Harvard Apparatus | LE-13-2104 | |
| Zoletil50 | Virbac | 80 mg/kg |
Referências
- Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679 (2019).
- Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K. A statistical analysis of incidence, etiology, and management of palatal fistula. National Journal of Maxillofacial Surgery. 10 (1), 43-46 (2019).
- Mahajan, R. K., Kaur, A., Singh, S. M., Kumar, P. A retrospective analysis of incidence and management of palatal fistula. Indian Journal of Plastic Surgery. 51 (3), 298-305 (2018).
- Huang, H., et al. Validation of the Chinese Velopharyngeal Insufficiency Effects on Life Outcomes Instrument. Laryngoscope. 129 (11), E395-E401 (2019).
- Sakran, K. A., et al. Evaluation of Postoperative Outcomes in Two Cleft Palate Repair Techniques without Relaxing Incisions. Plastic and Reconstructive Surgery. , (2023).
- Sakran, K. A., et al. Evaluation of late cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions. Journal of Stomatology, Oral and Maxillofacial Surgery. 124 (4), 101403 (2023).
- Sakran, K. A., et al. The Sommerlad-Furlow modified palatoplasty technique: postoperative complications and implicating factors. Laryngoscope. 133 (4), 822-829 (2023).
- Sakran, K. A., et al. Early cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions. The Cleft Palate-Craniofacial Journal. , (2022).
- Chen, J., Yang, R., Shi, B., Xu, Y., Huang, H. Obturator manufacturing for oronasal fistula after cleft palate repair: a review from handicraft to the application of digital techniques. Journal of Functional Biomaterials. 13 (4), 251 (2022).
- Yussif, N., Wagih, R., Selim, K. Propylene mesh versus acrylic resin stent for palatal wound protection following free gingival graft harvesting: a short-term pilot randomized clinical trial. BMC Oral Health. 21 (1), 208 (2021).
- Miron, R. J., et al. Platelet-rich fibrin and soft tissue wound healing: a systematic review. Tissue Engineering Part B: Reviews. 23 (1), 83-99 (2017).
- Ballestas, S. A., et al. Improving hard palate wound healing using immune modulatory autotherapies. Acta Biomaterialia. 91, 209-219 (2019).
- Ferreira, C. L., et al. Electrical stimulation enhances early palatal wound healing in mice. Archives of Oral Biology. 122, 105028 (2021).
- Lindley, L. E., Stojadinovic, O., Pastar, I., Tomic-Canic, M. Biology and Biomarkers for Wound Healing. Plastic and Reconstructive Surgery. 138 (3 Suppl), 18s-28s (2016).
- Xu, Y., et al. Rapid Additive Manufacturing of a Superlight Obturator for Large Oronasal Fistula in Pediatric Patient. Laryngoscope. 133 (6), 1507-1512 (2022).
- Leenstra, T. S., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. The healing process of palatal tissues after palatal surgery with and without implantation of membranes: an experimental study in dogs. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 9 (5), 249-255 (1998).
- In de Braekt, M. M., van Alphen, F. A., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. Wound healing and wound contraction after palatal surgery and implantation of poly-(L-lactic) acid membranes in beagle dogs. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 50 (4), 359-365 (1992).
- Suragimath, G., Krishnaprasad, K. R., Moogla, S., Sridhara, S. U., Raju, S. Effect of carbonated drink on excisional palatal wound healing: A study on Wistar rats. Indian Journal of Dental Research. 21 (3), 330-333 (2010).
- Zhu, T., Park, H. C., Son, K. M., Yang, H. -. C. Effects of dimethyloxalylglycine on wound healing of palatal mucosa in a rat model. BMC Oral Health. 15 (1), 60 (2015).
- Kirschner, R. E., et al. Repair of oronasal fistulae with acellular dermal matrices. Plastic and Reconstructive Surgery. 118 (6), 1431-1440 (2006).
- Rohleder, N. H., et al. Repair of oronasal fistulae by interposition of multilayered amniotic membrane allograft. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (1), 172-181 (2013).
- Kesting, M. R., et al. Repair of oronasal fistulas with human amniotic membrane in minipigs. British Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 48 (2), 131-135 (2010).
- Ayvazyan, A., et al. Collagen-gelatin scaffold impregnated with bFGF accelerates palatal wound healing of palatal mucosa in dogs. Journal of Surgical Research. 171 (2), e247-e257 (2011).
- Takao, K., Miyakawa, T. Genomic responses in mouse models greatly mimic human inflammatory diseases. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (4), 1167-1172 (2015).
- Rongvaux, A., et al. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nature Biotechnology. 32 (4), 364-372 (2014).
- Shan, L., Flavell, R. A., Herndler-Brandstetter, D. Development of humanized mouse models for studying human NK cells in health and disease. Methods in Molecular Biology. 2463, 53-66 (2022).
- Keswani, S. G., et al. Role of salivary vascular endothelial growth factor (VEGF) in palatal mucosal wound healing. Wound Repair and Regeneration. 21 (4), 554-562 (2013).
- Amanso, A. M., et al. Local delivery of FTY720 induces neutrophil activation through chemokine signaling in an oronasal fistula model. Regenerative Engineering and Translational Medicine. 7 (2), 160-174 (2021).
- Antiorio, A. T. F. B., et al. Administration of meloxicam to improve the welfare of mice in research: a systematic review (2000 – 2020). Veterinary Research Communications. 46 (1), 1-8 (2022).
