Summary

Массовая электроакупунктурная операция для мышей или молодых крыс

Published: September 01, 2023
doi:

Summary

Здесь мы представляем протокол эффективной и быстрой электроакупунктуры (ЭА) на мышах или молодых крысах с использованием трехмерного (3D) напечатанного держателя. Этот метод позволяет одновременно работать на нескольких животных, экономя время и повышая эффективность эксперимента.

Abstract

Электроакупунктура (ЭА) широко используется для лечения различных заболеваний. Однако основной механизм лечения ЭА остается неясным, что препятствует его продвижению. Механистическое исследование требует использования мышей или крыс для решения этой проблемы. Однако эти животные не послушны экспериментальному процессу, который отнимает много времени. Чтобы решить эти проблемы, мы разработали напечатанный на 3D-принтере фиксатор объема тела мелких животных, чтобы повысить эффективность экспериментов EA на животных. В этом видео подробно показано, как использовать фиксатор для выполнения объемного ЭА на мышах или молодых крысах. Для выбора акупунктурных точек была выбрана передняя косая линия вершины височной (голова MS6) и точка Тяньшу (живот ST25) для проверки эффекта фиксирующего устройства при положении лежа на животе и положении лежа на спине. Использование напечатанного на 3D-принтере держателя для мелких животных позволяет обездвиживать и обрабатывать несколько грызунов одновременно, сокращая время и ресурсы, необходимые для эксперимента. Эта техника может быть применена к другим моделям животных путем 3D-печати различных размеров и потенциально может быть использована для различных условий фиксации. Прибор полезен для продвижения экспериментальных научных исследований в ЭА.

Introduction

Электроакупунктурная терапия (ЭА) – это уникальный метод, при котором акупунктурные иглы вводятся в кожу головы и подключаются к электроаппарату для стимуляции определенных точек1. В отличие от мануальной стимуляции, ЭА позволяет лучше контролировать стимуляцию, стабилизируя определенные частоты и формы волны для достижения оптимального терапевтического эффекта2. Согласно опросу, 81,2% медицинских учреждений в Китае используют ЭА или мануальную акупунктуру для лечения ДЦП, невралгии, паралича лицевого нерва и других состояний. Несмотря на свою популярность, специфический механизм эффективности ЭА до сих пор неизвестен, что препятствует ее продвижению и применению в восстановительном лечении неврологических заболеваний 1,2,3. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы полностью понять механизм эффективности ЭА и способствовать ее использованию в реабилитационном лечении неврологических заболеваний.

По мере того, как влияние иглоукалывания расширяется во всем мире, во многих исследованиях уже изучались механизмы ЭА, выполняемые на моделях грызунов, таких как крысы или мышь 1,2,3. В экспериментах EA на грызунах часто встречаются некоторые проблемы. Во-первых, как обездвижить грызунов без анестезии, так как иглоукалывание, проводимое на бодрствующих субъектах, больше отражает клиническую практику. Кроме того, некоторые эксперименты требуют, чтобы животные бодрствовали, чтобы наблюдать эффекты лечения 2,3. Еще одной проблемой является точное определение акупунктурных точек у мышей или крыс, которые соответствуют акупунктурным точкам у людей. Точная локализация акупунктурных точек у подопытных грызунов в настоящее время изучается многими учеными 4,5. В этом протоколе были выбраны MS6 и ST25, которые были четко определены у грызунов трансформацией анатомической локализации человека. MS6 обычно используется для лечения некоторых заболеваний головного мозга, таких как болезнь Паркинсона6. ST25 обычно используется для лечения желудочно-кишечных проблем, таких как диарея7. Эти две акупунктурные точки были выбраны в первую очередь для того, чтобы продемонстрировать, как грызуны могут быть эффективно обездвижены как в лежачем положении, так и в положении лежа. Более того, эти акупунктурные точки были тщательно изучены и дают важную информацию для исследовательских целей 6,7.

Предыдущий метод обездвиживания одной крысы для экспериментов не только отнимал много времени, но и был труден для выполненияодним человеком. Кроме того, из-за отказа животных от сотрудничества вероятность успеха на практике относительно низкая. Поэтому существует острая необходимость в создании легко устанавливаемой животной модели со стабильными характеристиками для повышения эффективности эксперимента. В этой статье был представлен напечатанный на 3D-принтере держатель для мелких животных, который может легко обездвиживать нескольких грызунов, что приводит к ограничению движений. Целью данной работы является введение ЭА-терапии группе молодых крыс или мышей, уделяя особое внимание стратегиям массового ограничения мышей, идентификации и стимуляции акупунктурных точек MS6 и ST25.

Protocol

Эксперименты в этом исследовании соответствуют принципу этики животных «3R» и были одобрены Комитетом по благополучию лабораторных животных и этнической принадлежности Армейского медицинского университета (AMUWEC20234543). 1. Подготовка устройства фиксации тела грызуна</st…

Representative Results

План этажа разработанного нами фиксатора тела животного показан на рисунке 1. Кроме того, была представлена 3D-графическая модель этого фиксатора для получения полного представления о конструкции (Дополнительный файл 1). Это устройство, которое позволяет обездв…

Discussion

Электроакупунктура (ЭА) – это форма иглоукалывания, которая включает в себя использование электрической стимуляции на акупунктурных иглах11. Данная методика предполагает использование микроимпульсных токов определенной интенсивности и частоты для стимуляции акупунктур?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Благодарим отделение нейрохирургии Второго филиала госпиталя Армейского медицинского университета за поддержку сайта. Финансирование: Работа выполнена при поддержке Фонда естественных наук Китая (82104696).

Materials

3D printing batch mice fixator MESH INVENT Custom made The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF).  
Electroacupuncture instrument Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory SDZ-III www.Hwato-med.com
Disposable sterile acupuncture needle Suzhou Medical Appliance Factory N/A 0.25 mm x 13 mm

Referências

  1. Lee, S., Kim, S. N. The effect of acupuncture on modulating inflammatory cytokines in rodent animal models of respiratory disease: A systematic review and meta-analysis. Frontiers in Immunology. 13, 878463 (2022).
  2. Xin, Y. Y., Wang, J. X., Xu, A. J. Electroacupuncture ameliorates neuroinflammation in animal models. Acupuncture in Medicine: Journal of the British Medical Acupuncture Society. 40 (5), 474-483 (2022).
  3. Mengzhu, S., et al. Electroacupuncture at Tianshu (ST25) and Zusanli (ST36) alleviates stress-induced irritable bowel syndrome in mice by modulating gut microbiota and corticotropin-releasing factor. Journal of traditional Chinese medicine. 42 (5), 732-740 (2022).
  4. Xu, D. S., et al. A new attempt of re-mapping acupoint atlas in the rat. Acupuncture Research. 44 (1), 62-65 (2019).
  5. Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
  6. Cao, L., et al. The effectiveness of acupuncture for Parkinson’s disease: An overview of systematic reviews. Complementary Therapies in Medicine. 50, 102383 (2020).
  7. Yang, L., et al. Effect of warming moxibustion Tianshu (ST 25, bilateral) and Qihai (CV 6) for the treatment of diarrhea-dominant irritable bowel syndrome: a patient-blinded pilot trial with orthogonal design. Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (4), 538-545 (2017).
  8. Delcour, M., et al. Early movement restriction leads to maladaptive plasticity in the sensorimotor cortex and to movement disorders. Scientific Reports. 8 (1), 16328 (2018).
  9. Zhifeng, W. A fixing device for mice body. China Patent. , (2023).
  10. Ismail, K. I., Yap, T. C., Ahmed, R. 3D-printed fiber-reinforced polymer composites by fused deposition modelling (FDM): Fiber length and fiber implementation techniques. Polymers. 14 (21), 4659 (2022).
  11. Lu, C., et al. Efficacy of electroacupuncture with different frequencies in the treatment of chemotherapy-induced peripheral neuropathy: A study protocol for a randomized controlled trial. Frontiers in Neurology. 13, 843886 (2022).
  12. Zhang, L., et al. Modulation of colonic function in irritable bowel syndrome rats by electroacupuncture at ST25 and the neurobiological links between ST25 and the colon. Frontiers in Neuroscience. 16, 930489 (2022).
  13. Wang, J. H., et al. Anti-inflammation mechanism of electro-scalp acupuncture in treatment of ischemic stroke based on IL-12 mediated JAK/STAT signaling pathway. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 42 (10), 1137-1144 (2022).
  14. Ren, D., et al. A novel design of a plate for posterolateral tibial plateau fractures through traditional anterolateral approach. Scientific Reports. 8 (1), 16418 (2018).
  15. Wu, L., Dong, Y., Zhu, C., Chen, Y. Effect and mechanism of acupuncture on Alzheimer’s disease: A review. Frontiers in Aging Neuroscience. 15, 1035376 (2023).
  16. Wu, L. Electroacupuncture for spinal cord injury: A scientific study of traditional medicine. Neurospine. 19 (3), 770-772 (2022).
  17. Gozzi, A., Zerbi, V. Modeling brain dysconnectivity in rodents. Biological Psychiatry. 93 (5), 419-429 (2023).
  18. Denic, A., Macura, S. I., Mishra, P., Gamez, J. D., Rodriguez, M., Pirko, I. MRI in rodent models of brain disorders. Neurotherapeutics. 8 (1), 3-18 (2011).
  19. Cong-hui, Q., et al. Efficacy observation of long-retaining scalp acupuncture plus interactive training for upper-extremity dysfunction after cerebral stroke. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19, 43-48 (2021).
  20. Kvist, L. J., Hall-Lord, M. L., Rydhstroem, H., Larsson, B. W. A randomised-controlled trial in Sweden of acupuncture and care interventions for the relief of inflammatory symptoms of the breast during lactation. Midwifery. 23 (2), 184-195 (2007).
  21. Boram, L., Chan-Young, K., Sun Haeng, L. Effectiveness and safety of auriculotherapy for breastfeeding: a systematic review. Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (5), 721-737 (2020).
check_url/pt/65648?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Yao, S., Wei, Y., Zhang, Y., Yang, X., Wu, Z. Bulk Electroacupuncture Operation for Mice or Young Rats. J. Vis. Exp. (199), e65648, doi:10.3791/65648 (2023).

View Video