Intervento di Tuina nel modello di ratto indotto dall'iniezione di monoiodoacetato di sodio di osteoartrite del ginocchio

Summary

Questo protocollo descrive i metodi di intervento di Tuina nel modello di ratto di osteoartrite del ginocchio (KOA) indotto dall’iniezione di monoiodoacetato di sodio, che fornisce un riferimento per l’applicazione di Tuina in modelli animali di KOA. Questo protocollo studia anche il meccanismo efficace di Tuina per KOA e i risultati contribuiranno a promuoverne l’applicazione.

Abstract

L’artrosi del ginocchio (KOA), una comune malattia degenerativa delle articolazioni, è caratterizzata da dolore cronico e disabilità, che possono progredire fino a danni strutturali irreparabili dell’articolazione. Le indagini sul legame tra cartilagine articolare, muscoli, sinovia e altri tessuti che circondano l’articolazione del ginocchio in KOA sono di grande importanza. Attualmente, la gestione del KOA include modifiche dello stile di vita, esercizio fisico, farmaci e interventi chirurgici; tuttavia, manca ancora la delucidazione degli intricati meccanismi alla base del dolore correlato al KOA. Di conseguenza, il dolore da KOA rimane una sfida clinica chiave e una priorità terapeutica. È stato scoperto che Tuina ha un effetto regolatore sul sistema motorio, immunitario ed endocrino, spingendo l’esplorazione della possibilità che Tuina possa alleviare i sintomi del KOA, causati dalla sovraregolazione dei fattori infiammatori, e ulteriormente, se i fattori infiammatori nel muscolo scheletrico possono aumentare la progressione del KOA.

Sono stati randomizzati 32 ratti maschi di Sprague Dawley (SD) (180-220 g) in quattro gruppi di otto animali ciascuno: antiPD-L1 + Tuina (gruppo A), modello (gruppo B), Tuina (gruppo C) e chirurgia fittizia (gruppo D). Per i gruppi A, B e C, abbiamo iniettato 25 μL di soluzione di monoiodoacetato di sodio (MIA) (4 mg di MIA diluiti in 25 μL di soluzione salina sterile) nella cavità dell’articolazione del ginocchio destro e per il gruppo D, è stata iniettata la stessa quantità di soluzione fisiologica sterile. Tutti i gruppi sono stati valutati utilizzando i test meno stressanti (soglia di ritiro meccanico della zampa, latenza termica di ritiro della zampa, gonfiore dell’articolazione del ginocchio destro, punteggio Lequesne MG, temperatura cutanea) prima dell’iniezione e 2, 9 e 16 giorni dopo l’iniezione.

Introduction

L’artrosi del ginocchio (KOA) è un’artrosi degenerativa comune, caratterizzata da dolore cronico e disabilità, e la KOA relativamente grave porterà a danni strutturali irreversibili all’articolazione¹. L’elevata prevalenza globale di KOA è diventata una delle principali sfide per la salute pubblica globale ^2,3, che compromette seriamente la qualità della vita dei pazienti ^4,5. Gli studi hanno dimostrato che la KOA colpisce più di 260 milioni di persone in tutto il mondo⁶. Con l’invecchiamento della popolazione, il tasso di prevalenza totale di KOA in Cina raggiunge il 17,0% oltre i 40 anni, il che rappresenta un pesante onere per le famiglie delle^{persone colpite}.

Secondo la medicina cinese, il KOA appartiene alla categoria della “paralisi”⁹ e il Classico di Medicina Interna dell’Imperatore Giallo associa tendini, ossa e carne alla paralisi. Quindi, dobbiamo prestare attenzione alla connessione tra la cartilagine, il muscolo, la sinovia e altri tessuti intorno all’articolazione del ginocchio in KOA. Nella medicina moderna, sia l’infiammazione muscolare che quella ossea, che sono componenti principali dell’omeostasi immunitaria dell’artrite, guidano la progressione del dolore da KOA. Tuttavia, la maggior parte degli studi si concentra sull’infiammazione della cartilagine e sull’infiammazione sinoviale nelle articolazioni ossee e c’è una scarsità di articoli che esaminano i fenomeni infiammatori nei muscoli scheletrici. Pertanto, sono necessarie ulteriori ricerche sul ruolo del muscolo scheletrico nell’infiammazione per ottenere una comprensione più completa del KOA e fornire idee per modalità di trattamento più efficaci. In una revisione della letteratura, abbiamo scoperto che l’inibizione del ligando di morte programmata del fattore immuno-correlato 1 (PD-L1) ha esacerbato la progressione di KOA^10,11 e che c’era un’espressione differenziale di IL-15 e FOXO1 nel muscolo scheletrico dei pazienti con KOA ^12, così come una significativa infiammazione del muscolo scheletrico nei pazienti con KOA allo stadio terminale. che era anche associato a cambiamenti nell’andatura. È stato dimostrato che il muscolo scheletrico può anche secernere fattori strettamente correlati all’immunità infiammatoria come IL-6 e che il TNF-α è anche strettamente correlato alla via PD-L1 e KOA^13,14,15.

Attualmente, i trattamenti disponibili per KOA includono il controllo del peso, l’esercizio fisico, i farmaci e la chirurgia, che di solito includono iniezioni intra-articolari, farmaci analgesici, chirurgia artroscopica e osteotomia periprotesica del ginocchio¹⁶. Attualmente, la progressione della malattia da KOA non può essere completamente arrestata o invertita e, senza una chiara comprensione dei complessi meccanismi alla base del dolore da KOA, i pazienti con KOA sono a rischio di uso eccessivo di farmaci analgesici e di un’elevata incidenza di effetti collaterali⁸. La maggior parte delle strategie terapeutiche sono efficaci solo per brevi periodi e si concentrano solo sul sollievo temporaneo dei sintomi piuttosto che sulla patogenesi della malattia. Pertanto, il dolore da KOA rimane una priorità e una sfida per il trattamento, ponendo una seria sfida clinica. Tuttavia, Tuina può stimolare direttamente i muscoli scheletrici intorno all’articolazione interessata nel trattamento KOA e può fornire alcuni benefici. In combinazione con la descrizione precedente, è la terapia ideale per studiare il ruolo del tessuto muscolare scheletrico nel KOA e chiarire il ruolo del tessuto muscolare scheletrico nell’infiammazione può anche fornire un migliore supporto teorico per Tuina di KOA.

Gli studi hanno dimostrato che la massoterapia, la terapia manipolativa osteopatica e la manipolazione spinale possono aiutare ad alleviare il dolore e ripristinare la funzione corporea^17,18. Queste manipolazioni possono agire sull’infiammazione locale e alleviare gli spasmi e l’analgesia attraverso un’azione meccanica esterna. Possono alleviare il dolore dopo l’artroplastica totale del ginocchio, ridurre l’uso di farmaci analgesici, promuovere il recupero postoperatorio e migliorare l’equilibrio biomeccanico¹⁹. Il massaggio svedese è fattibile nel trattamento dell’osteoartrite e può ridurre lo stress e migliorare la qualità della vita²⁰. L’effetto terapeutico di Tuina su KOA è stato preceduto da alcuni studi.

In questo esperimento, il nostro team esplorerà se l’espressione di PD-L1 e dei relativi fattori infiammatori nel muscolo scheletrico può indurre KOA e promuoverne lo sviluppo sulla base del modello KOA indotto da MIA nei ratti. Tuina sarà anche implementato per vedere se può alleviare i sintomi di KOA causati dall’aumento dell’espressione del fattore infiammatorio. Tuina sarà combinato con l’inibizione di PD-L1 per dimostrare l’associazione tra la via PD-1 mediata da Tuina nell’infiammazione del muscolo scheletrico che influenza lo sviluppo di KOA e il dolore, gettando le basi per ulteriori studi multilivello sui meccanismi terapeutici dell’intervento di Tuina in KOA.

In sintesi, questo articolo descrive lo studio e l’elaborazione dei meccanismi dell’infiammazione del muscolo scheletrico nello sviluppo del KOA e del suo dolore, nonché gli effetti terapeutici del Tuina sul KOA, dal punto di vista dell’espressione del fattore immuno-infiammatorio, combinato con indicatori comportamentali correlati, per fornire prove di ricerca moderna per la teoria dello “squilibrio di tendini e ossa” nella medicina tradizionale cinese.

Protocol

Tutti gli esperimenti sono stati approvati e supervisionati dal Comitato per la cura e l’uso degli animali dell’Università di Medicina Tradizionale Cinese di Shanghai (numero di approvazione: SYXK2018-0040), che è conforme alle disposizioni della Dichiarazione di Helsinki dell’Associazione Medica Mondiale. 1. Preparazione dell’animale Ospita 32 ratti maschi Sprague Dawley (SD) di età compresa tra 8 settimane e un peso di 180-220 g in uno specifico apparato di stab…

Representative Results

Il protocollo descritto è stato implementato in un contesto clinico presso l’Ospedale Yueyang di Medicina Tradizionale Tradizionale Cinese e Occidentale Integrata. La Figura 1 mostra l’esatta posizione dei punti di agopuntura spinti nei ratti e la Tabella 1 illustra i benefici comuni della stimolazione di questi punti. La Tabella 2 e la Tabella 3 offrono prove convincenti di un notevole sollievo dal dolore ottenuto attraverso la terapia con…

Discussion

Questo studio ha lo scopo di valutare il miglioramento del KOA dopo l’intervento di Tuina utilizzando indicatori comportamentali standardizzati e di indagare i meccanismi di Tuina per il KOA e l’associazione tra muscolo scheletrico e KOA. A differenza delle terapie farmacologiche e chirurgiche, Tuina ha un effetto regolatore positivo sul sistema motorio, immunitario ed endocrino. Tuina può alleviare l’infiammazione e il dolore prodotti dalla malattia agendo su diversi obiettivi. Ad esempio, regolando la via TLR4 e il mi…

Materials

Anti-PD-L1	Abcam, Cambridge, MA, USA	ab80276
electric von Frey esthesiometer	IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA	ALMEMO 2450
GraphPad Prism 9.0	GraphPad Software		Software for stastistical analysis
monosodium iodoacetate	Sigma-Aldrich Inc	I9148	Resolved into normal saline for injection
pentasorbital sodium	Sigma-Aldrich Inc	P3761
Sprague Dawley (SD) male rats	Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd	No. SCXK (Hu) 2017-0012
thermal analgesia tester	IITC/Life Science	Model 390