JoVE Journal > Immunology and Infection
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Resultados
Discussion
Declarações
Acknowledgements
Materials
Referências
Tadução automática
Imunologia e Infecção

Bærbart papirbaseret immunassay kombineret med smartphone-applikation til kolorimetrisk og kvantitativ påvisning af dengue NS1-antigen

Published: January 26, 2024
doi:
10.3791/66130
, , ,
1Department of Pharmacy, Faculty of Mathematics and Natural Sciences,Universitas Islam Indonesia, 2School of Bioresources and Technology,King Mongkut’s University of Technology Thonburi, 3Department of Otolaryngology,Phramongkutklao Hospital and College of Medicine, 4Sensor Technology Laboratory, Pilot Plant Development and Training Institute,King Mongkut’s University of Technology Thonburi, 5Biosciences and Systems Biology Research Team, National Center for Genetic Engineering and Biotechnology,National Sciences and Technology Development Agency at King Mongkut’s University of Technology Thonburi

Summary

For at imødekomme presserende denguefeberdiagnostiske behov introducerer vi her en smartphone-app-integreret Dengue NS1 papirbaseret analytisk enhed (DEN-NS1-PAD) til kvantificering af Dengue NS1-antigenkoncentration i klinisk serum / blodprøver. Denne innovation forbedrer denguefeberstyring ved at hjælpe klinisk beslutningstagning i forskellige sundhedsindstillinger, selv ressourcebegrænsede.

Abstract

Dengue-virus (DENV) infektion, som overføres af Aedes myg, er et stort folkesundhedsproblem i tropiske og subtropiske lande. Med en årlig forekomst på ca. 10 millioner tilfælde og 20.000-25.000 dødsfald, især blandt børn, er der et presserende behov for praktiske diagnostiske værktøjer. Tilstedeværelsen af dengue non-strukturelle protein 1 (NS1) under tidlig infektion har været forbundet med cytokinfrigivelse, vaskulær lækage og endoteldysfunktion, hvilket gør det til en potentiel markør for svær denguefeber.

Papirbaserede immunoassays såsom laterale flowassays (LFA’er) og mikrofluidiske papirbaserede analytiske enheder (PAD’er) har vundet popularitet som diagnostiske tests på grund af deres enkelhed, hurtighed, billighed, specificitet og lette fortolkning. Imidlertid er konventionelle papirbaserede immunoassays til dengue NS1-detektion typisk afhængige af visuel inspektion, hvilket kun giver kvalitative resultater. For at imødegå denne begrænsning og øge følsomheden foreslog vi et meget bærbart NS1 dengue-detektionsassay på en papirbaseret analytisk enhed (PAD), nemlig DEN-NS1-PAD, der integrerer en smartphone-applikation som en kolorimetrisk og kvantitativ læser. Udviklingssystemet muliggør direkte kvantificering af NS1-koncentrationer i kliniske prøver.

Serum- og blodprøver opnået fra patienter blev brugt til at demonstrere systemets prototype ydeevne. Resultaterne blev opnået med det samme og kan anvendes til klinisk vurdering, både i veludstyrede sundhedsfaciliteter og ressourcebegrænsede omgivelser. Denne innovative kombination af et papirbaseret immunassay med en smartphone-applikation tilbyder en lovende tilgang til forbedret detektion og kvantificering af dengue NS1-antigen. Ved at øge følsomheden ud over det blotte øjes muligheder har dette system et stort potentiale for at forbedre klinisk beslutningstagning i denguefeberhåndtering, især i fjerntliggende eller underbetjente områder.

Introduction

Dengue-virus (DENV) infektion er den hurtigst spredende myggebårne sygdom1, og mere end 390 millioner mennesker er inficeret med 96 millioner symptomatiske infektioner, 2 millioner tilfælde af alvorlig sygdom og mere end 25.000 dødsfald om året forekommer i verden 1,2. Ifølge Verdenssundhedsorganisationen (WHO) er anslået 3,9 milliarder mennesker i fare for denguefeber; ~ 70% bor i Asien og Stillehavsområdet og hovedsageligt i Sydøstasien3. I 2019 var antallet af dengue-tilfælde rapporteret til WHO 4,2 millioner, og Thailand bidrog med mindst 136,000 dengue-tilfælde og 144 dødsfald fra dengue-infektion4. Dengue-udbruddet i Thailand forekommer i regntiden, fra april til december, i både byområder og landdistrikter, især i det nordøstlige område.

DENV-infektioner har forskellige kliniske manifestationer lige fra subkliniske symptomer, mild denguefeber (DF) til svær dengue hæmoragisk feber (DHF). Hovedkarakteristikken ved svær DHF-tilstand er øget vaskulær permeabilitet efterfulgt af chok og organdysfunktion1. Forståelse af den molekylære vej, der kan forårsage vaskulær lækage, er meget vigtig for at udvikle effektive dengue-behandlinger. Dengue non-structural protein 1 (NS1) er et udskilt glycoprotein under tidlig virusinfektion 5,6, og det fungerer som en cofaktor for viral RNA-replikation7. NS1 kan udløse cytokinfrigivelse og bidrage til vaskulær lækage ved binding til toll-lignende receptor 4 (TLR4) og endotelglycocalyx 8,9. In vitro forskning har vist, at NS1 interagerer med endotelceller og inducerer apoptose. Denne tilstand kan bidrage til endoteldysfunktion og vaskulær lækage10. NS1 antigen niveauer, korreleret med serum Interleukin (IL)-10 niveauer, blev øget signifikant hos patienter med svær klinisk sygdom11. Dengue NS1 bidrager også til sygdomspatogenese ved at inducere IL-10 og undertrykke DENV-specifikke T-celleresponser12,13. Derudover var dengue NS1-protein relateret til alvorlig klinisk sygdom, og koncentrationen af NS1 > 600 ng ml-1 i de første 3 dage af sygdommen var forbundet med udviklingen af DHF14.

Persistensen af dengue NS1-antigenet hos patienter med DHF kan anvendes som markør for svær dengue6. Der findes flere metoder til påvisning af NS1 i kliniske prøver, såsom enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) og hurtigtesten15. Guldstandarden til måling af koncentrationen af NS1-proteiner i kliniske omgivelser er ELISA-metoden. ELISA-metoden er imidlertid dyr og kræver kvalificeret personale og laboratoriefaciliteter16. Derfor er udviklingen af teknologi til påvisning og kvantificering af NS1-proteiner i point-of-care testen (POCT) stadig i gang. I det sidste årti er papirbaserede immunoassays såsom laterale flowassays (LFA’er) og mikrofluidiske papirbaserede analytiske enheder (μPAD’er) blevet populære som diagnostiske tests på grund af deres enkelhed, hurtighed, billighed og specificitet 17,18,19. I et papirbaseret immunassay er flere etiketter blevet brugt til at generere signaler, såsom guldnanopartikler (AuNP’er)20, magnetiske nanopartikler21,22, kvantepunkter23 og fluorescensmaterialer24,25. AuNP’er er de mest almindelige etiketter, der anvendes i papirbaserede immunoassays på grund af deres billige produktionsomkostninger, brugervenlighed, stabilitet og enkel udlæsning. I øjeblikket anvendes laterale flowassays (LFA’er) til dengue NS1 berømt i den kliniske indstilling26,27. Imidlertid bruger konventionel LFA-etiketdetektion almindeligvis det blotte øje og giver kun kvalitative resultater.

I det sidste årti er mere end 5 milliarder smartphones blevet brugt i vid udstrækning globalt, og der er potentiale for at udvikle bærbar detektion28,29. Smartphones har multifunktionelle kapaciteter såsom indbyggede fysiske sensorer, multi-core processorer, digitale kameraer, USB-porte, lydporte, trådløs og applikationssoftware, hvilket gør dem velegnede til brug i forskellige biosensorplatforme30. Desuden gør trådløse teknologier det muligt at sende data hurtigt og kan anvendes til overvågning i realtid og på stedet31. Mudanyali et al. kombinerede det papirbaserede immunassay og smartphones for at udvikle en bærbar, udstyrsfri, hurtig, billig og brugervenlig POCT-platform til malaria, tuberkulose og HIV32. Ling et al. rapporterede et lateralt flowassay kombineret med et smartphone-kamera til kvantitativ påvisning af alkalisk fosfataseaktivitet i mælk33. Hou et al. udviklede også et smartphone-baseret, dual-modality billeddannelsessystem til kvantitative signaler fra farve eller fluorescens i lateral flow assay34. Derudover kan brug af smartphone som kolorimetrisk og kvantitativ læser forbedre følsomheden, mens det blotte øje ikke med sikkerhed kan rapportere tilstedeværelsen af målet35.

DEN-NS1-PAD 36,37,38 (herefter kaldet enheden) præsenterer et gennembrud inden for dengue-diagnostik og tilbyder en bærbar og effektiv løsning. Ved hjælp af vokstrykt mikrofluidisk papirbaseret teknologi kvantificerer denne enhed NS1 med høj følsomhed og specificitet gennem billedbehandling. For yderligere at forbedre dens anvendelighed har vi udviklet en brugervenlig smartphone-app til kolorimetrisk og kvantitativ aflæsning. Klinisk validering ved hjælp af patientprøver fra thailandske hospitaler understreger dens umiddelbare indvirkning på patientvurdering i realtid. Vores innovation markerer et afgørende fremskridt inden for strømlinet point-of-care-denguefeberstyring, der lover at revolutionere diagnostik i ressourcebegrænsede sundhedslandskaber.

Protocol

Den etiske komité under Institutional Review Board, Royal Thai Army Medical Department, Phramongkutklao Hospital, Bangkok, Thailand (IRBRTA 1218/2562) gav godkendelse. Ved gennemførelsen af denne undersøgelse overholdt vi alle nødvendige etiske bestemmelser. 1. Enhedsfremstilling af det papirbaserede immunoassay BEMÆRK: Den papirbaserede immunoassay-enhed blev fremstillet efter tidligere etablerede metoder36,37<…

Representative Results

Valg af fremstillingsmetode er afgørende for at sikre reproducerbare assay-præstationer i papirbaserede immunoassay-enheder. I vores undersøgelse undersøgte vi forskellige fremstillingsprocesser og materialer i forbindelse med demonstration af et papirbaseret immunassay. Vores valgte metode bruger et vokstryksystem til at skabe hydrofobe barrierer inden for papirbaserede mikrofluidiske enheder. Denne tilgang skiller sig ud på grund af dens enkelhed, hastighed og ensartede resultater. Det skal bemærkes, at det giver…

Discussion

Et af de vigtige designparametre for et smartphone-baseret læsersystem er evnen til at levere reproducerbar billedbehandling af prøver. I denne undersøgelse blev billederne for enkelhed og bekvemmelighed taget fra tre forskellige smartphone-mærker med 12-13 MP-kameraer uden brug af en billedboks eller tilbehør. Variable betingelser for billedoptagelse, såsom kameraets opløsning, billedoptagelsestid, lysforhold og miljø, kan påvirke farveintensiteten af test- og kontrolpunkterne på enheden. Virkningen af forskel…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

MHP anerkender taknemmeligt stipendieforskningsfonden fra Universitas Islam Indonesia (UII). Forfatterne udtrykker deres taknemmelighed til Mr. Nutchanon Ninyawee for hans værdifulde ekspertise og hjælp gennem hele udviklingen af mobilapplikationen og hans bidrag til manuskriptet. Desuden sætter forfatterne pris på den økonomiske støtte fra Thailand Science Research and Innovation (TSRI), Basic Research Fund: Fiscal year 2023 (projektnr. FRB660073/0164) under Program Smart Healthcare of King Mongkut’s University of Technology Thonburi.

Materials

Materials
0.1 M phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.2) 
BBS containing 0.1% Tween 20, 10% sucrose, and 1% casein   the conjugate area treatment and blocking buffer
Borate buffered saline (BBS) (25 mM sodium borate and 150 mM sodium chloride at pH 8.2) supplemented with 1% BSA  the washing buffer during the conjugation process AuNPs with the antibody
Boric acid Merck 10043-35-3
Bovine serum albumin fraction V (BSA)   PAA Lab GmbH (Germany) K41-001 
Casein Merck 9005-46-3
Chromatography paper Grade 2  GE Healthcare 3002-911 
Clear laminate film 3M (Stationery shops)
Disodium hydrogen phosphate Merck 7558-79-4
Double tape side Stationery shops
Goat anti-mouse IgG antibody  MyBiosource (USA) MBS435013
Gold nanoparticles (40 nm)   Serve Science Co., Ltd. (Thailand)
Human IgG polyclonal antibody   Merck AG711-M
Mouse dengue NS1 monoclonal antibody  MyBiosource (USA) MBS834415
Mouse dengue NS1 monoclonal antibody  MyBiosource (USA) MBS834236
NS1 serotype 2 antigens MyBiosource (USA) MBS 568697
PBS 1X containing 0.1% Tween 20 was used as t elution buffer
Plastic backing card 10×30 cm Pacific Biotech Co., Ltd. (Thailand)
Poly-L-lysine (PLL) Sigma Aldrich P4832
Potassium Chloride Merck 104936
Potassium monophosphate Merck 104877
Sodium Chloride Merck 7647-14-5
Sodium tetraborate  Sigma Aldrich 1303-96-4
Sucrose Merck 57-50-1
Tween 20 Sigma Aldrich 9005-64-5
Instruments
CytationTM 5 multimode reader BioTek
Mobile phones Huawei Y7, iPhone 11, Samsung a20
Photo scanner Epson Perfection V30
Oven Memmert
Wax printer  Xerox ColorQube 8880-PS
Software
Could AutoML Vision Object Detection documentation Google Cloud
ImageJ National Institute of Health, Bethesda, MD, USA
Inkscape 0.91 Software
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Referências

  1. Cattarino, L., Rodriguez-Barraquer, I., Imai, N., Cummings, D. A. T., Ferguson, N. M. Mapping global variation in dengue transmission intensity. Science Translational Medicine. 12 (528), 1-11 (2020).
  2. World Health Organization (WHO). . Treatment, prevention and control global strategy for dengue prevention and control. , 1-34 (2012).
  3. . WHO Dengue and severe dengue Available from: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/dengue-and-severe-dengue (2020)
  4. Department of Disease Control Ministry of Health Thailand. . Weekly Disease Forecast Dengue. , (2020).
  5. Malavige, G. N., Ogg, G. S. Pathogenesis of vascular leak in dengue virus infection. Immunology. 151 (3), 261-269 (2017).
  6. Paranavitane, S. A., et al. Dengue NS1 antigen as a marker of severe clinical disease. BMC Infectious Diseases. 14 (1), 570 (2014).
  7. Muller, D. A., Young, P. R. The flavivirus NS1 protein: Molecular and structural biology, immunology, role in pathogenesis and application as a diagnostic biomarker. Antiviral Research. 98 (2), 192-208 (2013).
  8. Modhiran, N., et al. Dengue virus NS1 protein activates cells via Toll-like receptor 4 and disrupts endothelial cell monolayer integrity. Science Translational Medicine. 7 (304), 304ra102 (2015).
  9. Glasner, D. R., et al. Dengue virus NS1 cytokine-independent vascular leak is dependent on endothelial glycocalyx components. PLOS Pathogens. 13 (11), e1006673 (2017).
  10. Lin, C. -. F., et al. Antibodies from dengue patient sera cross-react with endothelial cells and induce damage. Journal of Medical Virology. 69 (1), 82-90 (2003).
  11. Adikari, T. N., et al. Dengue NS1 antigen contributes to disease severity by inducing interleukin (IL)-10 by monocytes. Clinical and Experimental Immunology. 184 (1), 90-100 (2016).
  12. Malavige, G. N., et al. Suppression of virus specific immune responses by IL-10 in acute dengue infection. PLoS Neglected Tropical Diseases. 7 (9), e2409 (2013).
  13. Malavige, G. N., et al. Serum IL-10 as a marker of severe dengue infection. BMC Infectious Diseases. 13 (1), 341 (2013).
  14. Libraty, D. H., et al. High circulating levels of the dengue virus nonstructural protein NS1 early in dengue illness correlate with the development of dengue hemorrhagic fever. The Journal of Infectious Diseases. 186 (8), 1165-1168 (2002).
  15. World Health Organization (WHO) and the Special Programme for Research and Tropical Diseases (TDR). . Dengue: guidelines for diagnosis, treatment, prevention and control — New edition. , (2009).
  16. Axelrod, T., Eltzov, E., Marks, R. S. Capture-layer lateral flow immunoassay: a new platform validated in the detection and quantification of dengue NS1. ACS Omega. 5 (18), 10433-10440 (2020).
  17. Kim, S. -. W., Cho, I. -. H., Lim, G. -. S., Park, G. -. N., Paek, S. -. H. Biochemical-immunological hybrid biosensor based on two-dimensional chromatography for on-site sepsis diagnosis. Biosensors and Bioelectronics. 98, 7-14 (2017).
  18. Fu, Q., et al. Development of a novel dual-functional lateral-flow sensor for on-site detection of small molecule analytes. Sensors and Actuators B: Chemical. 203, 683-689 (2014).
  19. Dzantiev, B. B., Byzova, N. A., Urusov, A. E., Zherdev, A. V. Immunochromatographic methods in food analysis. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 55, 81-93 (2014).
  20. Hu, J., et al. Advances in paper-based point-of-care diagnostics. Biosensors and Bioelectronics. 54 (4), 585-597 (2014).
  21. Zhong, Y., et al. Gold nanoparticles based lateral flow immunoassay with largely amplified sensitivity for rapid melamine screening. Microchimica Acta. 183 (6), 1989-1994 (2016).
  22. Figueredo, F., Garcia, P. T., Cortón, E., Coltro, W. K. T. Enhanced analytical performance of paper microfluidic devices by using Fe 3 O 4 nanoparticles, MWCNT, and graphene oxide. ACS Applied Materials & Interfaces. 8 (1), 11-15 (2016).
  23. Bahadır, E. B., Sezgintürk, M. K. Lateral flow assays: Principles, designs and labels. TrAC – Trends in Analytical Chemistry. 82, 286-306 (2016).
  24. He, M., Liu, Z. Paper-based micro fluidic device with upconversion fluorescence assay. Analytical Chemistry. 85, 11691-11694 (2013).
  25. Derikvand, F., Yin, D. L. T., Barrett, R., Brumer, H. Cellulose-based biosensors for esterase detection. Analytical Chemistry. 88 (6), 2989-2993 (2016).
  26. Kumar, S., Bhushan, P., Krishna, V., Bhattacharya, S. Tapered lateral flow immunoassay-based point-of-care diagnostic device for ultrasensitive colorimetric detection of dengue NS1. Biomicrofluidics. 12 (3), 034104 (2018).
  27. Sinawang, P. D., Rai, V., Ionescu, R. E., Marks, R. S. Electrochemical lateral flow immunosensor for detection and quantification of dengue NS1 protein. Biosensors and Bioelectronics. 77, 400-408 (2016).
  28. Zhang, D., Liu, Q. Biosensors and bioelectronics on smartphone for portable biochemical detection. Biosensors and Bioelectronics. 75, 273-284 (2016).
  29. Preechaburana, P., Suska, A., Filippini, D. Biosensing with cell phones. Trends in Biotechnology. 32 (7), 351-355 (2014).
  30. Laksanasopin, T., et al. A smartphone dongle for diagnosis of infectious diseases at the point of care. Science Translational Medicine. 7 (273), 273re1 (2015).
  31. Kim, J., et al. Noninvasive alcohol monitoring using a wearable tattoo-based iontophoretic-biosensing system. ACS Sensors. 1 (8), 1011-1019 (2016).
  32. Mudanyali, O., et al. Integrated rapid-diagnostic-test reader platform on a cellphone. Lab on a Chip. 12 (15), 2678 (2012).
  33. Yu, L., Shi, Z., Fang, C., Zhang, Y., Liu, Y., Li, C. Disposable lateral flow-through strip for smartphone-camera to quantitatively detect alkaline phosphatase activity in milk. Biosensors and Bioelectronics. 69, 307-315 (2015).
  34. Hou, Y., et al. Smartphone-based dual-modality imaging system for quantitative detection of color or fluorescent lateral flow immunochromatographic strips. Nanoscale Research Letters. 12 (1), 291 (2017).
  35. You, D. J., Park, T. S., Yoon, J. -. Y. Cell-phone-based measurement of TSH using Mie scatter optimized lateral flow assays. Biosensors and Bioelectronics. 40 (1), 180-185 (2013).
  36. Prabowo, M. H., Chatchen, S., Rijiravanich, P. Dengue NS1 detection in pediatric serum using microfluidic paper-based analytical devices. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 412, 2915-2925 (2020).
  37. Prabowo, M. H., et al. Clinical evaluation of a developed paper-based Dengue NS1 rapid diagnostic test for febrile illness patients. International Journal of Infectious Diseases. 107, 271-277 (2021).
  38. Prabowo, M. H., et al. Preparation and detection method for the diagnostic device of dengue NS1 detection in serum, cell medium, and buffer. Thai Patent. , (2019).
  39. Kong, T., et al. Accessory-free quantitative smartphone imaging of colorimetric paper-based assays. Lab on a Chip. 19 (11), 1991-1999 (2019).
  40. Jung, Y., Heo, Y., Lee, J. J., Deering, A., Bae, E. Smartphone-based lateral flow imaging system for detection of food-borne bacteria E. coli O157:H7. Journal of Microbiological Methods. 168, 105800 (2020).
  41. Chen, G., et al. Improved analytical performance of smartphone-based colorimetric analysis by using a power-free imaging box. Sensors and Actuators B: Chemical. 281, 253-261 (2019).
  42. Kim, H., et al. Smartphone-based low light detection for bioluminescence application. Scientific Reports. 7 (1), 40203 (2017).
  43. Kim, H., Awofeso, O., Choi, S., Jung, Y., Bae, E. Colorimetric analysis of saliva-alcohol test strips by smartphone-based instruments using machine-learning algorithms. Applied Optics. 56 (1), 84 (2017).
  44. Qin, Q., et al. Algorithms for immunochromatographic assay: review and impact on future application. The Analyst. 144 (19), 5659-5676 (2019).
  45. Yan, W., et al. Machine learning approach to enhance the performance of MNP-labeled lateral flow immunoassay. Nano-Micro Letters. 11 (1), 7 (2019).
  46. Srisa-Art, M., Boehle, K. E., Geiss, B. J., Henry, C. S. Highly sensitive detection of Salmonella typhimurium using a colorimetric paper-based analytical device coupled with immunomagnetic separation. Analytical Chemistry. 90 (1), 1035-1043 (2018).
  47. Santiago, G. A., et al. Performance of the Trioplex real-time RT-PCR assay for detection of Zika, dengue, and chikungunya viruses. Nature Communications. 9 (1), 1391 (2018).
  48. Lanciotti, R. S., Calisher, C. H., Gubler, D. J., Chang, G. J., Vorndam, A. V. Rapid detection and typing of dengue viruses from clinical samples by using reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Journal of Clinical Microbiology. 30 (3), 545-551 (1992).
  49. Yang, X., et al. Design and development of polysaccharide hemostatic materials and their hemostatic mechanism. Biomaterials Science. 5 (12), 2357-2368 (2017).
  50. Li, H., Han, D., Pauletti, G. M., Steckl, A. J. Blood coagulation screening using a paper-based microfluidic lateral flow device. Lab Chip. 14 (20), 4035-4041 (2014).
  51. Nilghaz, A., Shen, W. Low-cost blood plasma separation method using salt functionalized paper. RSC Advances. 5 (66), 53172-53179 (2015).
  52. Ataullakhanov, F. I., Pohilko, A. V., Sinauridze, E. I., Volkova, R. I. Calcium threshold in human plasma clotting kinetics. Thrombosis Research. 75 (4), 383-394 (1994).
  53. Pamies, R., et al. Aggregation behaviour of gold nanoparticles in saline aqueous media. Journal of Nanoparticle Research. 16 (4), 2376 (2014).
  54. Christau, S., Moeller, T., Genzer, J., Koehler, R., Von Klitzing, R. Salt-induced aggregation of negatively charged gold nanoparticles confined in a polymer brush matrix. Macromolecules. 50 (18), 7333-7343 (2017).
  55. Abe, K., Kotera, K., Suzuki, K., Citterio, D. Inkjet-printed paperfluidic immuno-chemical sensing device. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 398 (2), 885-893 (2010).
  56. Sameenoi, Y., Nongkai, P. N., Nouanthavong, S., Henry, C. S., Nacapricha, D. One-step polymer screen-printing for microfluidic paper-based analytical device (µPAD) fabrication. The Analyst. 139 (24), 6580-6588 (2014).
  57. Mora, M. F., et al. Patterning and modeling three-dimensional microfluidic devices fabricated on a single sheet of paper. Analytical Chemistry. 91 (13), 8298-8303 (2019).
  58. Ng, J. S., Hashimoto, M. Fabrication of paper microfluidic devices using a toner laser printer. RSC Advances. 10 (50), 29797-29807 (2020).
  59. Pal, S., et al. Multicountry prospective clinical evaluation of two enzyme-linked immunosorbent assays and two rapid diagnostic tests for diagnosing dengue fever. Journal of Clinical Microbiology. 53 (4), 1092-1102 (2015).

Tags

DengueNS1 AntigenPaper-based ImmunoassaySmartphone ApplicationColorimetric DetectionQuantitative DetectionMicrofluidic DevicePEC (paper-based Electrochemical) SensorPortable DiagnosticsPoint-of-care Testing
check_url/pt/66130?article_type=t

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citar este artigo
Prabowo, M. H., Chalermwatanachai, T., Surareungchai, W., Rijiravanich, P. Portable Paper-Based Immunoassay Combined with Smartphone Application for Colorimetric and Quantitative Detection of Dengue NS1 Antigen. J. Vis. Exp. (203), e66130, doi:10.3791/66130 (2024).
Baixar citação
Reimpressões e Permissões

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image