Sondenstrategie für die Sudformel der Traditionellen Chinesischen Medizin bei Osteosarkom-Modellmäusen
Summary
Das Protokoll bietet einen detaillierten Standardisierungsprozess der Abkochformel und der Sondentechnik am Beispiel der Yiqi Jiedu-Abkochung im Osteosarkom-Mausmodell. Es beschreibt den Tierschutz und verbessert die Zuverlässigkeit von Forschungsdaten, indem es effektive Strategien zur Untersuchung der therapeutischen Wirksamkeit und der molekularen Mechanismen von Abkochrezepturen in vivo bietet.
Abstract
Die Suktionsformel ist die am häufigsten verwendete Darreichungsform in der traditionellen chinesischen Medizin und wird seit Tausenden von Jahren in der klinischen Praxis durch transorale Verabreichung angewendet, die sich durch schnelle Wirkung, einfache Absorption und individuelle Behandlung basierend auf den spezifischen Syndromen der Patienten auszeichnet. Die Qualität der Abkochformel ist direkt für die klinische Wirksamkeit der traditionellen chinesischen Medizin verantwortlich. Daher ist der Standardisierungsprozess der Abkochformel wichtig, um Unterschiede in der Abkochungsqualität zu vermeiden, die durch subjektive Faktoren verursacht werden. Aufgrund der Einschränkungen bei der Durchführung klinischer Experimente werden kleine Tiere, die menschliche Krankheiten tragen, wie Mäuse, häufig in der medizinischen Forschung eingesetzt, um die therapeutische Wirksamkeit und die umfassenden Mechanismen verschiedener Interventionen zu untersuchen, einschließlich der Abkochformel für die traditionelle chinesische Medizin. Folglich ist die geschickte Sondentechnik als wichtige transorale Verabreichungsmethode besonders wichtig, um mögliche Schäden an der Speiseröhre und das Verschütten von Medikamenten zu vermeiden, wodurch sichergestellt wird, dass jedem Modelltier die gleiche Menge an Arzneimitteln verabreicht wird, was zu genauen Versuchsergebnissen führt. Darüber hinaus sind die standardisierte Methode der Herstellung von Abkochformeln und eine geschickte Sondenstrategie notwendig, um das Wohlergehen der Tiere zu schützen und die Anzahl der verwendeten Tiere zu minimieren. Hier berichteten wir über einen detaillierten Standardisierungsprozess der Abkochformel und der Sondentechnik mit Yiqi Jiedu Abkochung im Osteosarkom-Mausmodell als Beispiel. Die Wirksamkeit wurde anhand des Tumorvolumens bewertet. Dieses Protokoll wird den Tierschutz maximieren und die Zuverlässigkeit der Forschungsdaten verbessern und somit wirksame Strategien für die zukünftige Untersuchung der therapeutischen Wirksamkeit und der molekularen Mechanismen der Abkochformel für die traditionelle chinesische Medizin in vivo bieten.
Introduction
Die Suktionsformel ist die am häufigsten verwendete Darreichungsform der traditionellen chinesischen Medizin und der flüssigen Arzneimittel 1,2. Die Abkochformel der traditionellen chinesischen Medizin wird verarbeitet, indem die Kräuter nach dem Einweichen in Wasser abgekocht und anschließend gefiltert werden, um den Bodensatz zu entsorgen.
Da die Abkochformel auf der Grundlage klinischer Notwendigkeiten individualisiert werden kann, insbesondere im Einklang mit den Merkmalen der evidenzbasierten Behandlung in der traditionellen chinesischen Medizin, wird diese Darreichungsform über transorale Verabreichung seit Tausenden von Jahren in der klinischen Praxis mit spezifischen und unersetzlichen Vorteilen angewendet 3,4. Die Qualität der Abkochformel steht in direktem Zusammenhang mit der klinischen Wirksamkeit. Daher muss die Abkochformel auf der Grundlage der Prinzipien für die standardisierten Abkochmethoden hergestellt werden, um sicherzustellen, dass die Wirkstoffe maximal extrahiert und geschützt werden3. In der Zwischenzeit sind abkochfertige Medikamente die Hauptform von rohen chinesischen Kräutern, die in der klinischen Praxis verwendet werden. Die Qualitätsstandards und Herstellungsmethoden der verschriebenen abkochfertigen Arzneimittel müssen den Bestimmungen des Chinesischen Arzneibuchsentsprechen 2. Darüber hinaus müssen die verschriebenen abkochfertigen Arzneimittel mindestens 30 Minuten lang in kaltem Trinkwasser eingeweicht werden, bevor sie in einem speziellen pharmazeutischen Topfdurch Erhitzen 5 abgekocht werden. Studien haben gezeigt, dass die meisten Wirkstoffe durch zweimaliges Abkochen extrahiert werden können, und der Verhaltenskodex für die Verabreichung von Abkochräumen traditioneller chinesischer Arzneimittel in medizinischen Einrichtungen schreibt ebenfalls vor, dass das Abkochen zweimal durchgeführt werdenmuss 4,6,7. Wenn spezielle chinesische Kräuter, wie z. B. eines mit harter Textur oder Tonika, verschrieben werden, wird empfohlen, die Abkochzeit zu verlängern. Die Abkochutensilien und Vorratsbehälter, die direkt mit der Abkochformel in Berührung kommen, ausgehend von dem Behälter, in dem die verschriebenen abkochfertigen Medikamente eingeweicht werden, sollten chemisch stabil sein und Deckel wie Aufläufe, Keramik, Glas und Edelstahl haben. Aluminium und gewöhnliche Kunststoffprodukte sollten jedoch nicht verwendet werden, während Eisen und andere ätzende Utensilien verboten werden sollten, um mögliche chemische Reaktionen zu vermeiden, die die therapeutische Wirksamkeit verringern und sogar schädliche Auswirkungen haben 4,6,7.
Aufgrund der Einschränkungen bei der Durchführung klinischer Experimente werden kleine Tiere, die menschliche Krankheiten tragen, wie Mäuse, häufig in der medizinischen Forschung verwendet, um die therapeutische Wirksamkeit und die umfassenden Mechanismen verschiedener Interventionen zu untersuchen, einschließlich der Abkochformel der traditionellen chinesischen Medizin 8,9; Im Gegensatz zum Menschen sollten die Abkochrezepturen jedoch jeden Tag zubereitet, miteinander gemischt und in der klinischen Praxis 2x täglich frisch verabreicht werden. Tiere sind nicht in der Lage, ihre Medikamente freiwillig rechtzeitig in der erforderlichen Dosierung einzunehmen, und die meisten Tierversuche im Zusammenhang mit der traditionellen chinesischen Medizin sind derzeit eine orale Verabreichung der Abkochformeln auf Sondenbasis. Die für In-vivo-Tierversuche verwendeten Abkochformeln sollten im Voraus hergestellt, aliquotiert, bei -20 °C gelagert und kurz vor der Verwendung aufgetaut werden 3,4,10. Darüber hinaus erhöhen minderwertige Tierimmobilisierung und die Manipulation der Sondennadel das Risiko unnötiger Verletzungen und negativer Emotionen. Daher ist die geschickte Sondentechnik als wichtige Methode der transoralen Arzneimittelverabreichung besonders wichtig, um mögliche Verletzungen der Speiseröhre und das Verschütten von Medikamenten zu vermeiden und so sicherzustellen, dass jedes Modelltier die gleiche Menge an verschriebener pflanzlicher Medizin erhält, um genaue experimentelle Ergebnisse zu erzielen. Hier stellen wir ein Sondenprotokoll für die Abkochungsformel der traditionellen chinesischen Medizin zur Verfügung.
Protocol
Representative Results
Discussion
Die klinische Wirksamkeit der in der traditionellen chinesischen Medizin verschriebenen Kräuter hängt weitgehend mit der verabreichten Dosis und Darreichungsform zusammen; Daher sind die Etablierung einer standardisierten Abkochstrategie und eines qualifizierten Verabreichungsprozesses in der klinischen Praxis sowie zur Verbesserung der Zuverlässigkeit experimenteller Ergebnisse erforderlich.
In dieser Studie haben wir zunächst eine detaillierte Strategie für das standardisierte Abkochen …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die aktuelle Arbeit wird durch Zuschüsse der (1) National Nature Science Foundation (81973877 und 82174408), (2) des National Key R&D Program of China (2020YFE0201600), (3) des Bauprojekts des Shanghai Top Priority Research Center (2022ZZ01009), (4) des Shanghai Collaborative Innovation Center of Industrial Transformation of Hospital TCM Preparation und (5) Forschungsprojekte im Rahmen des Budgets der Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (2021LK047) unterstützt.
Materials
| 143B cell line | ATCC | CRL-8303 | osteosarcoma cell line |
| Anesthesia machine | Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd | R500IP | The Equipment of Anesthesia mice |
| Automatic cell counter | Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd | IC1000 | Counting cells |
| BALB/c athymic mice | Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd. | Male | Animal |
| Barbed skullcap herb | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 20230606 | Decoction-ready medicines |
| Basement Membrane Matrix | Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd | 356234, BD, Matrigel | re-suspende cells |
| Centrifuge tube (15 mL) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 430790, Corning | Centrifuge the cells |
| Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm) | RWD Life Science Co., Ltd. | C21014-12 | Component of gastric perfusion device |
| Gauze | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | LC45 | Decoction filter |
| Ginseng | Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd. | 20220704-2 | Decoction-ready medicines |
| Hedyotis diffusa | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 2023071107 | Decoction-ready medicines |
| isoflurane | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | VETEASY | Anesthesia mice |
| Micro-volume syringe | Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd | 0-50 μL | Inject precise cells into the tibia |
| Phosphate-buffered saline | Beyotime Biotechnology | ST447 | wash the human osteosarcoma cells |
| Rubber bands | Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd. | XPJ | Fixing gauze on the measuring cup |
| Syringe (1 mL ) | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd. | SBM0040 | Component of gastric perfusion device |
| Trypsin (0.25%) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 25200056, Gibco | trypsin treatment of cells |
Referências
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