骨肉腫モデルマウスにおける漢方薬の煎じ薬の強制経口投与戦略
Summary
プロトコルは例として骨肉腫のマウス モデルのYiqi Jieduの煎じ薬の煎じ薬の煎じ薬の方式および強制経口の技術の詳しい標準化プロセスを提供する。動物保護について説明し、研究データの信頼性を向上させ、in vivoでの煎じ薬処方の治療効果と分子メカニズムを調査するための効果的な戦略を提供します。
Abstract
煎じ薬は、伝統的な漢方薬で最も一般的に使用されている剤形であり、経口投与によって何千年もの間臨床診療に適用されており、患者の特定の症候群に基づいて迅速な効果、吸収の容易さ、および個別化された治療を特徴としています。煎じ薬の品質は、伝統的な漢方薬の臨床効果に直接関係しています。したがって、主観的要因によって引き起こされる煎じ薬の品質の違いを避けるために、煎じ薬処方の標準化プロセスが重要です。一方、臨床実験の実施には限界があるため、マウスなどのヒトの病気を媒介とする小動物は、漢方薬の煎じ薬を含むさまざまな介入の治療効果と包括的なメカニズムを調査するために医学研究によく使用されます。したがって、経口投与法として重要な経口投与法として、食道の損傷や薬剤のこぼれを防ぐために熟練した強制経口投与技術が特に重要であり、これにより、各モデル動物に均等な量の薬が投与され、正確な実験結果が得られます。さらに、煎じ薬調製剤の標準化された方法と熟練した強制経口投与戦略は、動物福祉を保護し、使用される動物の数を最小限に抑えるために必要です。ここでは、骨肉腫マウスモデルにおけるYiqi Jiedu煎じ薬を用いた煎じ薬処方と強制経口投与技術の詳細な標準化プロセスを報告しました。有効性は腫瘍体積によって評価された。従ってこのプロトコルは動物保護を最大にし、研究データの信頼性を改善し、生体 内の従来の漢方薬のための煎じ薬の方式の治療効果そして分子メカニズムを将来調査するための有効な作戦を提供する。
Introduction
煎じ薬は、伝統的な漢方薬と液体の薬の最も一般的に使用される剤形です1,2。伝統的な漢方薬の煎じ薬は、ハーブを水に浸した後、水で煎じ、濾過してかすを捨てることによって処理されます。
煎じ薬の処方は、特に伝統的な中国医学における証拠に基づく治療の特徴に沿って、臨床的必要性に基づいて個別化できるため、経口投与によるこの剤形は、何千年もの間臨床診療に適用され、具体的でかけがえのない利点があります3,4.煎じ薬の品質は、臨床効果に直接関係しています。したがって、煎じ薬処方は、有効成分が最大限に抽出され、保護されるように、標準化された煎じ薬法の原則に基づいて調製する必要があります3。一方、煎じ薬対応薬は、臨床診療で使用される生の漢方薬の主な形態です。処方された煎じ薬の品質基準と製造方法は、中国薬局方2の規定に準拠している必要があります。さらに、処方された煎じ薬は、冷たい飲料水に少なくとも30分間浸してから、加熱して特別な医薬品ポットで煎じる必要があります5。研究によると、ほとんどの有効成分は2回煎じることによって抽出でき、医療機関における伝統的な漢方薬の煎じ薬室の管理に関する実践規範も、煎じ薬を2回行うように規定しています4,6,7。硬い食感のものや強壮剤などの特別な漢方薬が処方されている場合は、煎じ薬時間を延長することをお勧めします。処方された煎じ薬が浸されている容器から始めて、煎じ薬製剤と直接接触する煎じ薬器具および貯蔵容器は、化学的に安定しており、キャセロール、セラミック、ガラス、ステンレス鋼などの蓋が付いている必要があります。ただし、アルミニウムや通常のプラスチック製品は使用しないでくださいが、鉄やその他の腐食性器具は、治療効果を低下させ、有害な影響を引き起こす可能性のある化学反応を避けるために禁止する必要があります4,6,7。
臨床実験の実施には限界があるため、マウスなどのヒトの病気を媒介する小動物は、伝統的な漢方薬の煎じ薬を含むさまざまな介入の治療効果と包括的なメカニズムを調査するために医学研究でよく使用されます8,9;ただし、人間とは異なり、煎じ薬の処方は毎日調製し、混合し、臨床診療で1日2回新たに投与する必要があります。動物は自発的に薬を必要な用量で時間通りに服用することができず、現在、漢方薬に関連する動物実験のほとんどは、煎じ薬の強制経口投与です。in vivo動物実験に使用される煎じ薬式は、事前に調製し、分注し、-20°Cで保存し、使用直前に解凍する必要があります3,4,10。さらに、標準以下の動物の固定化と強制経口注射針の操作は、不必要な怪我や否定的な感情のリスクを高めます。したがって、経口薬物送達の重要な方法として、食道損傷や薬物のこぼれの可能性を回避し、各モデル動物に同量の処方された漢方薬を投与して正確な実験結果を得るために、熟練した強制経口投与技術が特に重要です。ここでは、漢方薬の煎じ薬の強制経口投与プロトコルを提供します。
Protocol
Representative Results
Discussion
伝統的な漢方薬で処方されたハーブの臨床効果は、投与量と剤形に大きく関連しています。したがって、標準化された煎じ薬戦略および熟練した投与プロセスの確立は、臨床診療において、ならびに実験結果の信頼性を向上させるためにも必要である。
この研究では、まず、伝統的な漢方薬の臨床診療で使用される漢方薬の標準化された煎じ薬の詳細な戦略を提供し、?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
現在の研究は、(1)国家自然科学基金(81973877および82174408)、(2)中国国家重点研究開発プログラム(2020YFE0201600)、(3)上海最優先研究センター建設プロジェクト(2022ZZ01009)、(4)上海共同イノベーションセンター病院中医薬準備の産業変革、および(5)上海中医薬大学の予算内の研究プロジェクト(2021LK047)からの助成金によってサポートされています。
Materials
| 143B cell line | ATCC | CRL-8303 | osteosarcoma cell line |
| Anesthesia machine | Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd | R500IP | The Equipment of Anesthesia mice |
| Automatic cell counter | Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd | IC1000 | Counting cells |
| BALB/c athymic mice | Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd. | Male | Animal |
| Barbed skullcap herb | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 20230606 | Decoction-ready medicines |
| Basement Membrane Matrix | Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd | 356234, BD, Matrigel | re-suspende cells |
| Centrifuge tube (15 mL) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 430790, Corning | Centrifuge the cells |
| Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm) | RWD Life Science Co., Ltd. | C21014-12 | Component of gastric perfusion device |
| Gauze | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | LC45 | Decoction filter |
| Ginseng | Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd. | 20220704-2 | Decoction-ready medicines |
| Hedyotis diffusa | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 2023071107 | Decoction-ready medicines |
| isoflurane | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | VETEASY | Anesthesia mice |
| Micro-volume syringe | Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd | 0-50 μL | Inject precise cells into the tibia |
| Phosphate-buffered saline | Beyotime Biotechnology | ST447 | wash the human osteosarcoma cells |
| Rubber bands | Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd. | XPJ | Fixing gauze on the measuring cup |
| Syringe (1 mL ) | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd. | SBM0040 | Component of gastric perfusion device |
| Trypsin (0.25%) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 25200056, Gibco | trypsin treatment of cells |
Referências
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