O modelo de camundongo de hepatectomia parcial 2/3 (66%) é bem descrito na literatura, mas hepatectomias mais extensas mimetizando a síndrome do pequeno para o tamanho após o transplante de fígado raramente foram usadas. Descrevemos um procedimento de hepatectomia estendida de 78% em um modelo de camundongo que resulta em aproximadamente 50% de letalidade pós-operatória em camundongos saudáveis.
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Artigo de método
Hepatectomia estendida de 78% em modelo cirúrgico de camundongo
Neste artigo
Resumo
Resumo
A hepatectomia parcial 2/3 em camundongos é usada em pesquisas para estudar a capacidade regenerativa do fígado e explorar os resultados da ressecção hepática em vários modelos de doenças. Na hepatectomia parcial clássica de 2/3 em camundongos, dois dos cinco lobos do fígado, ou seja, os lobos esquerdo e mediano, representando aproximadamente 66% da massa hepática, são ressecados em bloco com uma sobrevida pós-operatória esperada de 100%. Hepatectomias parciais mais agressivas são tecnicamente mais desafiadoras e, portanto, raramente foram usadas em camundongos. Nosso grupo desenvolveu um modelo de camundongo de uma técnica de hepatectomia estendida na qual três dos cinco lobos hepáticos, incluindo os lobos superiores esquerdo, mediano e direito, são ressecados separadamente para remover aproximadamente 78% da massa hepática total. Essa ressecção estendida, em camundongos saudáveis, deixa um fígado remanescente que nem sempre pode sustentar uma regeneração adequada e oportuna. A falha na regeneração resulta em 50% de letalidade pós-operatória em 1 semana devido à insuficiência hepática fulminante. Este procedimento de hepatectomia estendida de 78% em camundongos representa um modelo cirúrgico único para o estudo da síndrome do pequeno para o tamanho e a avaliação de estratégias terapêuticas para melhorar a regeneração hepática e os resultados no cenário de transplante de fígado ou ressecção hepática estendida para câncer.
Introdução
Modelos de ressecção hepática cirúrgica de camundongos e ratos, descritos pela primeira vez em 1931, são os modelos experimentais mais comuns utilizados para estudar a base molecular da regeneração hepática. Eles também podem ser úteis na pesquisa científica translacional para testar e desenvolver estratégias para melhorar os resultados após ressecção hepática estendida ou transplante de enxertos hepáticos abaixo do ideal 1,2,3,4. As hepatectomias parciais (HP) em camundongos envolvem a remoção de aproximadamente 2/3 (66%) da massa hepática ....
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Protocolo
Os métodos descritos neste protocolo de procedimento foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais (IACUC) no Beth Israel Deaconess Medical Center (BIDMC). Todos os experimentos foram concluídos de acordo e em conformidade com as diretrizes da IACUC e das instalações de pesquisa animal do BIDMC.
1. Preparação pré-operatória do camundongo
- Raspe o abdômen do camundongo do meio do esterno até a região suprapúbica com uma tesoura.
- Induza anestesia geral com isoflurano a 1-4% em oxigênio a 100%. Quando anestesiado, coloque o camundongo em decúbito dorsal no campo cirúrgico com uma alm....
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Resultados
Espera-se que uma hepatectomia estendida de 78% bem-sucedida induza 50% de mortalidade em 1 semana em camundongos adultos saudáveis com idade entre 8e 12 semanas 16. Quando realizado corretamente, espera-se perda mínima de sangue. O sangramento residual que persiste pode ser controlado por pressão manual. A morte perioperatória dentro de 24 horas após a cirurgia é frequentemente causada por erros técnicos. As falhas técnicas incluem lesão inadvertida de grandes vasos sanguíneos, causando hemorragi.......
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Discussão
Para realizar com sucesso uma hepatectomia estendida de 78% causando 50% de letalidade em camundongos, é fundamental que cada lobo hepático seja ressecado com precisão. Esse nível de competência e precisão só pode ser alcançado se o procedimento for realizado repetidamente. A curva de treinamento varia entre os operadores, mas normalmente requer de 3 a 6 meses de prática. Uma ressecção hepática que remove menos de 78% do TLM resultaria em taxas de sobrevivência mais altas, enquanto uma ressecção hepática que remove mais .......
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Divulgações
Não há conflitos de interesse a serem divulgados.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado por bolsas NIH R01 DK063275 e HL086741 para CF. PB e TA são beneficiários de uma bolsa NRSA da bolsa de treinamento NHLBI T32 HL007734.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 2 x 2 Gaze | Covidien | 2146 | Cirurgia: dissecção |
| 5-O Nylon Monofilament Suture | Oasis | 50-118-0631 | Cirurgia: Fechamento da pele |
| 5-O Silk Suture | Fine Science Tools | 18020-50 | Cirurgia: ligadura do lobo do fígado |
| 5-O Vicryl | Suture | Ethicon NC9335902 | Cirurgia: Fechamento da parede abdominal |
| Addson Forceps | Braintree Scientific | FC028 | Cirurgia: dissecção |
| Cotonetes de Álcool (2) | BD | 326895 | Desinfetante |
| Buprenorfina Formulação de Liberação Prolongada | Zoopharm | N/A | Analgesia |
| Aparador Sem Fio | Braintree Scientific | CLP-9868-14 | |
| Fórceps Curvo | Braintree Scientific | FC0038 | Cirurgia: dissecção |
| Hemostat | Braintree Scientific | FC79-1 | Cirurgia: dissecção |
| Anestésico Inalante Isoflurano | Anestesia Geral | Patterson Veterinary | RXISO-250 |
| (2-slot) (2) | Braintree Scientific | ACD-001 | Cirurgia: para segurar pequenos afastadores |
| Fixador de Ímã (4-slot) | Braintree Scientific | ACD-002 | Cirurgia: para segurar pequenos |
| afastadores Microtesouras | Braintree Scientific | SC-MI 151 | Cirurgia: dissecção |
| Bandeja de operação | Braintree Scientific | ACD-0014 | Cirurgia: para estabelecimento de campo cirúrgico |
| Cotonete de iodopovidona 10% (2) | desinfetante | MDS093901ZZ Medline | |
| (15 lâminas) | Aspen Surgical Products | 371615 | Surgery: dissecção |
| Tesoura afiada (curva) | Braintree Scientific | SC-T-406 | Cirurgia: dissecção |
| Tesoura afiada (reta) | Braintree Scientific | SC-T-405 | Cirurgia: dissecção |
| Pequena Aplicadores de Algodão | Fisher Scientific | 23-400-118 | Cirurgia: dissecção |
| Fórceps de Tecido (Reto x2) | Braintree Scientific | FC1001 | Cirurgia: dissecção |
| Almofada de Aquecimento (18" x 26") | Bomba de | Aquecimento | TP 700 |
| Aquecimento | Stryker | TP 700 | |
| (2) | Braintree Scientific | ACD-005 | Cirurgia: para facilitar a exposição da cavidade peritoneal |
| Xenotec Isoflurane Small Animal Anesthesia | Braintree Scientific | EZ-108SA | Anestesia Geral: Contém vaborizador e console de Isoflurano, câmara de indução, regulador/mangueira, máscara facial (M) |
Referências
- Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28 (1), 3-11 (2008).
- Higgins, G., Anderson, R. Experimental pathology of the liver I. Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.
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Reimpressões e permissões
