Acesso à diferenciação precoce de células T CD4+ foliculares específicas de vírus em camundongos infectados por LCMV agudo

Yao Lin; Shuai Yue; Yang Yang; Junjian He; Xiaofan Yang; Lilin Ye; Xiangyu Chen

doi:10.3791/66752

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Artigo de método

Acesso à diferenciação precoce de células T ^CD4+ foliculares específicas de vírus em camundongos infectados por LCMV agudo

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DOI:

10.3791/66752

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26 de abril de 2024

Yao Lin^*¹^,² , Shuai Yue^*³ , Yang Yang^*⁴ , Junjian He⁵ , Xiaofan Yang⁶ , Lilin Ye⁵ , Xiangyu Chen⁷

¹Department of Urology, South China Hospital, Medical School, Shenzhen University, ²Guangdong Key Laboratory for Biomedical Measurements and Ultrasound Imaging, National-Regional Key Technology Engineering Laboratory for Medical Ultrasound, School of Biomedical Engineering, Shenzhen University Medical School, ³Cancer Center, Daping Hospital & Army Medical Center of PLA, Third Military Medical University, ⁴Guangdong Provincial Key Laboratory of Immune Regulation and Immunotherapy, School of Laboratory Medicine and Biotechnology, Southern Medical University, ⁵Institute of Immunology, Third Military Medical University, ⁶Dermatology Hospital, Southern Medical University, ⁷Institute of Immunological Innovation and Translation, Chongqing Medical University

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

O presente estudo apresenta protocolos para avaliar o compromisso de destino precoce de células T_FH específicas do vírus e manipular a expressão gênica nessas células.

Resumo

As células T auxiliares foliculares (T_FH) são percebidas como uma linhagem independente de células T CD4⁺ que auxilia as células B cognatas na produção de anticorpos de alta afinidade, estabelecendo assim imunidade humoral de longo prazo. Durante a infecção viral aguda, o compromisso de destino das células T_FH específicas do vírus é determinado na fase inicial da infecção, e as investigações das células T_FHdiferenciadas precocemente são cruciais para entender a imunidade humoral dependente de células T e otimizar o design da vacina. No estudo, usando um modelo de camundongo de infecção pelo vírus da coriomeningite linfocítica aguda (LCMV) e o camundongo SMARTA (SM) transgênico TCR com células T CD4 ⁺ reconhecendo especificamente o epítopo da glicoproteína LCMV^{I-A b}GP_66-77, descrevemos procedimentos para acessar o compromisso de destino precoce de células T_FH específicas do vírus com base em colorações de citometria de fluxo. Além disso, ao explorar a transdução retroviral de células T SM CD4 ⁺ , métodos para manipular a expressão gênica em células T_FH específicas de vírus diferenciados precocemente também são fornecidos. Portanto, esses métodos ajudarão em estudos que exploram o(s) mecanismo(s) subjacente(s) ao comprometimento precoce de células T_FH específicas do vírus.

Introdução

Encontrando diferentes patógenos ou ameaças, as células T CD4 ⁺ virgens adaptam suas respostas imunes diferenciando-se em vários subconjuntos de células T auxiliares (T_H) com funções especializadas¹. No cenário de infecção viral aguda, uma grande parcela de células T CD4⁺ virgens se diferencia em células T auxiliares foliculares (T_FH) que fornecem ajuda às células B ^2,3. Diferente de outros subconjuntos de células T_H CD4 ⁺ (por exemplo, células T_H1, T_H2, T_H9 e T_H17), as células ....