आयरन ऑक्साइड के साथ hESCs और hMSCs लेबल vivo में ट्रैकिंग में गैर इनवेसिव के लिए एमआर इमेजिंग नैनोकणों के साथ
Summary
नई स्टेम सेल के उपचारों के मूल्यांकन के लिए गैर invasively के लिए महत्वपूर्ण है vivo में इंजेक्शन कोशिकाओं को ट्रैक. यह वीडियो तुम्हें दिखाने कैसे vivo में बाद एमआर इमेजिंग के लिए vivo में मानव mesenchymal और लोहे के आक्साइड आधारित विपरीत एजेंटों के साथ भ्रूण स्टेम कोशिकाओं लेबल होगा.
Abstract
हाल के वर्षों में, स्टेम सेल अनुसंधान के विकास जीव विज्ञान, विभिन्न रोगों और पुनर्योजी चिकित्सा पर अपने संभावित प्रभाव का एक बेहतर समझ के लिए नेतृत्व किया गया है. एक गैर इनवेसिव विधि प्रतिरोपित स्टेम कोशिकाओं vivo में बार – बार की निगरानी काफी हमारे तंत्र को समझने की क्षमता में वृद्धि होगी कि नियंत्रण स्टेम कोशिका मृत्यु और पौष्टिकता संबंधी कारकों और संकेत मार्ग है कि स्टेम सेल engraftment में सुधार की पहचान. एमआर इमेजिंग के लिए एक प्रभावी उपकरण के पास सूक्ष्म संरचनात्मक संकल्प के साथ स्टेम कोशिकाओं के vivo चित्रण में होना सिद्ध किया गया है. आदेश में एमआर के साथ स्टेम कोशिकाओं का पता लगाने के लिए, कोशिकाओं के लिए सेल विशिष्ट एमआर विपरीत एजेंटों के साथ लेबल किया जा है. इस प्रयोजन के लिए, लोहे के आक्साइड नैनोकणों, superparamagnetic लोहे के आक्साइड कणों (SPIO) जैसे, उनके सेल का पता लगाने और उनके उत्कृष्ट biocompatibility के लिए उच्च संवेदनशीलता की वजह से से लागू कर रहे हैं. SPIO कण एक लोहे के आक्साइड कोर और एक dextran carboxydextran, स्टार्च या कोट, स्थानीय क्षेत्र inhomogeneities, कि टी 2 भारित एमआर छवियों पर एक कम संकेत के कारण बनाने के द्वारा और समारोह के बना रहे हैं. इस प्रस्तुति चिकित्सकीय लागू एमआर विपरीत एजेंटों के साथ स्टेम सेल के बाद एमआर इमेजिंग के साथ लेबल की कोशिकाओं के vivo पर नज़र रखने के लिए गैर इनवेसिव के लिए लेबलिंग के लिए तकनीक का प्रदर्शन करेंगे.
Protocol
Discussion
स्टेम सेल के एक गैर इनवेसिव चित्रण वस्तुतः किसी भी स्टेम सेल आधारित चिकित्सा की निगरानी के लिए महत्वपूर्ण है. लेबल स्टेम कोशिकाओं के vivo कैनेटीक्स में की एक बेहतर समझ, के रूप में एमआर छवियों पर कल्पना, एक तर्कसं?…
Acknowledgements
यह परियोजना एक लियोन पुनर्योजी चिकित्सा के लिए कैलिफोर्निया इंस्टीट्यूट से जे थाल बीज अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था. टोबीस हेनिंग एक जर्मन रिसर्च एसोसिएशन (DFG, महामहिम 4578/1-2) से वजीफा रिसर्च द्वारा वित्त पोषित किया गया था. हम मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं की संस्कृति पर अपनी सलाह के लिए आभार Juanito Meneses को स्वीकार करना चाहते हैं.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| Gelatin | Reagent | Sigma | G1890 | dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 % |
| PBS (Ca++ Mg++ freed) | Reagent | GIBCO | 14190-144 | |
| Trypsin-EDTA 0.05% | Reagent | Invitrogen | 25300-120 | |
| Trypsin-EDTA 0.25% | Reagent | Invitrogen | 25200-114 | |
| FBS characterized | Reagent | Hyclone | SH30071.03 | |
| Cell Strainer (40 μm Nylon) | Tool | BD Falcon | 352340 | |
| Knockout DMEM | Reagent | GIBCO | 10829018 | |
| Knockout Serum Replacer | Reagent | GIBCO | 10828028 | |
| b-Mercaptoethanol | Reagent | Sigma | 7522 | |
| non-essential amino acids | Reagent | GIBCO | 11140050 | |
| FGF-2 | Reagent | R&D Systems | 233-FB-025 | |
| Glutamine | Reagent | GIBCO | 25030081 | |
| Penicillin/Streptomycin | Reagent | GIBCO | 15140-122 | |
| Ferumoxides (Endorem) | Reagent | Guerbet | ||
| Ferucarbotran (Resovist®) | Reagent | Bayer Schering AG |
Referências
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents. 228, 760-767 (2003).
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment. Radiology. 234, 197-205 (2005).
- Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. Cell labeling with the positive MR contrast agent. Gadofluorine M. Eur Radiol. 17, 1226-1234 (2007).
