תיוג hESCs ו hMSCs עם ברזל אוקסיד חלקיקים עבור פולשני של מעקב vivo עם MR Imaging
Summary
להערכת טיפולים בתאי גזע חדש חשוב הלא פולשני המסלול התאים מוזרקים in vivo. סרט הווידאו הזה יראה לכם כיצד לתייג אדם בתאי גזע mesenchymal ו עובריים עם סוכני תחמוצת ברזל מבוסס בניגוד in vivo עבור הבאים MR הדמיה in vivo.
Abstract
בשנים האחרונות, מחקר בתאי גזע הוביל להבנה טובה יותר של הביולוגיה ההתפתחותית, מחלות שונות וההשפעה הפוטנציאלית על רפואה רגנרטיבית. שיטה לא פולשנית כדי לפקח על בתאי גזע המושתלים שוב ושוב in vivo היה מאוד לשפר את היכולת שלנו להבין את מנגנוני הבקרה תא גזע מוות לזהות גורמים trophic ועל מסלולי איתות כי לשפר תא גזע engraftment. MR הדמיה הוכח להיות כלי יעיל עבור בתיאור vivo בתאי גזע עם רזולוציה ליד אנטומי מיקרוסקופיים. על מנת לזהות בתאי גזע עם MR, התאים צריכים להיות מתויג עם תא ספציפי סוכנים בניגוד MR. לענין זה, חלקיקים תחמוצת ברזל, כגון ברזל פאראמגנטי חלקיקי תחמוצת (SPIO), מוחלים, בגלל רגישות גבוהה שלהם לאיתור התא biocompatibility מעולה שלהם. SPIO חלקיקים מורכבים הליבה תחמוצת ברזל ומעיל dextran, carboxydextran או עמילן, ותפקוד על ידי יצירת שדה inhomogeneities המקומי, הגורמות אות ירד ב T2 משוקלל תמונות MR. מצגת זו תדגים טכניקות תיוג בתאי גזע עם החלים קלינית סוכני MR בניגוד עבור שלאחר מכן לא פולשנית של מעקב vivo של תאים שכותרתו עם MR הדמיה.
Protocol
Discussion
תיאור פולשני בתאי גזע חיוני לניטור כמעט כל תא גזע טיפול מבוסס. הבנה טובה יותר של קינטיקה ב vivo בתאי גזע שכותרתו, כמו דמיינו על תמונות MR, יכול להוביל את הדרך רציונלי ושימוש יעיל יותר של תא טיפולים מבוססי גזע. מאז אנו משתמשים סוכנים בניגוד החלים קלינית שיטות הדמיה, פרוטוקולים שהוצגו …
Acknowledgements
פרויקט זה מומן על ידי מענק ג'יי טל! SEED ליאון ממכון קליפורניה עבור רפואה רגנרטיבית. טוביאס הנינג המחקר מומן על ידי מענק מן האגודה הגרמנית למחקר (DFG, HE 4578/1-2). אנחנו רוצים להכיר תודה Meneses חואניטו את עצתו על תרבות בתאי גזע עובריים אנושיים.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| Gelatin | Reagent | Sigma | G1890 | dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 % |
| PBS (Ca++ Mg++ freed) | Reagent | GIBCO | 14190-144 | |
| Trypsin-EDTA 0.05% | Reagent | Invitrogen | 25300-120 | |
| Trypsin-EDTA 0.25% | Reagent | Invitrogen | 25200-114 | |
| FBS characterized | Reagent | Hyclone | SH30071.03 | |
| Cell Strainer (40 μm Nylon) | Tool | BD Falcon | 352340 | |
| Knockout DMEM | Reagent | GIBCO | 10829018 | |
| Knockout Serum Replacer | Reagent | GIBCO | 10828028 | |
| b-Mercaptoethanol | Reagent | Sigma | 7522 | |
| non-essential amino acids | Reagent | GIBCO | 11140050 | |
| FGF-2 | Reagent | R&D Systems | 233-FB-025 | |
| Glutamine | Reagent | GIBCO | 25030081 | |
| Penicillin/Streptomycin | Reagent | GIBCO | 15140-122 | |
| Ferumoxides (Endorem) | Reagent | Guerbet | ||
| Ferucarbotran (Resovist®) | Reagent | Bayer Schering AG |
Referências
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents. 228, 760-767 (2003).
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment. Radiology. 234, 197-205 (2005).
- Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. Cell labeling with the positive MR contrast agent. Gadofluorine M. Eur Radiol. 17, 1226-1234 (2007).
