이런 산화물로 hESCs과 hMSCs을 라벨링하는 MR 영상과 생체내 추적 비침습에 대한 Nanoparticles
Summary
새로운 줄기 세포 요법의 평가는 생체내에 주입된 세포를 추적 비 invasively하는 것이 중요합니다. 이 동영상은 생체내의 후속 MR 영상에 대한 생체내의 철 산화물 기반의 콘트라스트 에이전트와 인간 mesenchymal와 배아 줄기 세포를 레이블하는 방법을 보여줍니다.
Abstract
최근에는 줄기 세포 연구는 발달 생물학, 각종 질병 및 재생 의료에 미치는 잠재적인 영향을 더 잘 이해하게되었다. 생체내에서 반복 이식 줄기 세포를 모니터링하는 비침습 방법은 크게 메커니즘을 이해하는 능력을 향상시킬 것이라는 제어 줄기 세포 죽음과 줄기 세포 engraftment을 향상 영양 요인과 신호 경로를 확인합니다. MR 영상은 근처의 미세한 해부 해상도 줄기 세포의 생체내 묘사에 대한 효과적인 도구로 입증되었습니다. MR과 함께 줄기 세포를 감지하기 위해서는 세포가 세포 특정 MR 대비 요원으로 표시해야합니다. 이 목적 들어, superparamagnetic의 철 산화물 입자 (SPIO)으로 철 산화물 nanoparticles은, 때문에 세포 검출과 우수한 biocompatibility 위해 고감도의 적용됩니다. SPIO 입자는 철 산화물 코어와 T2 – 가중 MR 영상에서 감소 신호를 발생 지역 현장 inhomogeneities를 만들어 dextran, carboxydextran 또는 전분 코팅, 그리고 기능으로 구성되어 있습니다. 이 프레 젠 테이션은 MR 영상과 레이블 세포의 생체내 추적에 후속 비침습에 대한 임상 적용 MR 대비 에이전트와 함께 줄기 세포의 라벨에 대한 기술을 설명합니다.
Protocol
Discussion
줄기 세포의 비침습 묘사는 거의 모든 줄기 세포 기반 치료를 모니터링 중요합니다. 표시 줄기 세포의 생체내의 속도론에의 더 나은 이해로 MR 이미지에 대한 시각, 합리적인 방법과 줄기 세포 기반 요법보다 효과적인 사용을 초래할 수 있습니다. 우리가 임상 적용 대조 대리인 및 이미징 기술을 사용 이후, 우리의 제공 프로토콜은 환자의 어플 리케이션에 쉽게 번역되어야합니다. 우리의 방법의 잠재적인 임상 ?…
Acknowledgements
이 프로젝트는 재생 의료에 대한 캘리포니아 연구소에서 레온 J. Thal 시드 부여에 의해 지원되었다. 토바 이어스 헤닝는 독일 연구 협회 (DFG, HE 4578/1-2)에서 급비 연구에 의해 투자되었다. 우리는 기꺼이 그 인간의 배아 줄기 세포의 문화에 대한 그의 조언 후아의 Meneses을 인정 싶어요.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| Gelatin | Reagent | Sigma | G1890 | dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 % |
| PBS (Ca++ Mg++ freed) | Reagent | GIBCO | 14190-144 | |
| Trypsin-EDTA 0.05% | Reagent | Invitrogen | 25300-120 | |
| Trypsin-EDTA 0.25% | Reagent | Invitrogen | 25200-114 | |
| FBS characterized | Reagent | Hyclone | SH30071.03 | |
| Cell Strainer (40 μm Nylon) | Tool | BD Falcon | 352340 | |
| Knockout DMEM | Reagent | GIBCO | 10829018 | |
| Knockout Serum Replacer | Reagent | GIBCO | 10828028 | |
| b-Mercaptoethanol | Reagent | Sigma | 7522 | |
| non-essential amino acids | Reagent | GIBCO | 11140050 | |
| FGF-2 | Reagent | R&D Systems | 233-FB-025 | |
| Glutamine | Reagent | GIBCO | 25030081 | |
| Penicillin/Streptomycin | Reagent | GIBCO | 15140-122 | |
| Ferumoxides (Endorem) | Reagent | Guerbet | ||
| Ferucarbotran (Resovist®) | Reagent | Bayer Schering AG |
Referências
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents. 228, 760-767 (2003).
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment. Radiology. 234, 197-205 (2005).
- Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. Cell labeling with the positive MR contrast agent. Gadofluorine M. Eur Radiol. 17, 1226-1234 (2007).
