Маркировка ЭСК и hMSCs с Оксид железа наночастиц для неинвазивного в естественных условиях слежения с МРТ
Summary
Для оценки методов лечения, новых стволовых клеток важно неинвазивно трек вводили клетки в живом организме. Это видео покажет вам, как ярлык человека мезенхимальных и эмбриональных стволовых клеток с железом на основе оксида контрастных средств в естественных условиях для последующего МРТ в естественных условиях.
Abstract
В последние годы исследования стволовых клеток привела к лучшему пониманию биологии развития, различные заболевания и его потенциальное влияние на регенеративную медицину. Неинвазивный метод мониторинга пересаженные стволовые клетки многократно в естественных условиях в значительной степени повысит нашу способность понять механизмы, которые контролируют стволовых клеточной смерти и определить трофических факторов и сигнальных путей, которые улучшают приживления стволовых клеток. МРТ было доказано, что эффективным инструментом в естественных условиях изображением стволовые клетки с почти микроскопические разрешение анатомического. Для того, чтобы обнаружить стволовые клетки с MR, клетки должны быть помечены ячейки конкретных контрастных агентов MR. Для этой цели, оксид железа наночастицы, такие как суперпарамагнитных оксида железа частиц (Спио), применяются, из-за их высокой чувствительностью для обнаружения клеток и их отличную биосовместимость. Спио частицы состоят из основного оксида железа и декстрана, carboxydextran или крахмала пальто, и функции путем создания локальных неоднородностей поля, которые вызывают снижение сигнала на Т2-взвешенных МРТ. Эта презентация будет демонстрировать методы маркировки стволовыми клетками с клинически применимый агентов MR контраст для последующего неинвазивной в естественных условиях отслеживание меченых клеток с МРТ.
Protocol
Discussion
Неинвазивные изображением стволовых клеток имеет решающее значение для мониторинга практически любой стволовых клеток терапия. Лучшего понимания кинетики естественных меченых стволовых клеток, как визуализация на МРТ, может привести способ рационального и более эффективного использования ст…
Acknowledgements
Этот проект был поддержан Леон Дж. Тал грант SEED Калифорнийского института регенеративной медицины. Тобиас Хеннинг было профинансировано исследований стипендию от немецкого исследовательская ассоциация (DFG, Его 4578/1-2). Мы хотим выразить искреннюю признательность Хуанито Менесес за его советы по культуре эмбриональных стволовых клеток человека.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| Gelatin | Reagent | Sigma | G1890 | dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 % |
| PBS (Ca++ Mg++ freed) | Reagent | GIBCO | 14190-144 | |
| Trypsin-EDTA 0.05% | Reagent | Invitrogen | 25300-120 | |
| Trypsin-EDTA 0.25% | Reagent | Invitrogen | 25200-114 | |
| FBS characterized | Reagent | Hyclone | SH30071.03 | |
| Cell Strainer (40 μm Nylon) | Tool | BD Falcon | 352340 | |
| Knockout DMEM | Reagent | GIBCO | 10829018 | |
| Knockout Serum Replacer | Reagent | GIBCO | 10828028 | |
| b-Mercaptoethanol | Reagent | Sigma | 7522 | |
| non-essential amino acids | Reagent | GIBCO | 11140050 | |
| FGF-2 | Reagent | R&D Systems | 233-FB-025 | |
| Glutamine | Reagent | GIBCO | 25030081 | |
| Penicillin/Streptomycin | Reagent | GIBCO | 15140-122 | |
| Ferumoxides (Endorem) | Reagent | Guerbet | ||
| Ferucarbotran (Resovist®) | Reagent | Bayer Schering AG |
Referências
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents. 228, 760-767 (2003).
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment. Radiology. 234, 197-205 (2005).
- Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. Cell labeling with the positive MR contrast agent. Gadofluorine M. Eur Radiol. 17, 1226-1234 (2007).
