MRイメージングと生体内追跡非侵襲のための酸化鉄ナノ粒子で標識ヒトES細胞とhMSCs
Summary
新しい幹細胞療法の評価のためにそれはin vivoで注入された細胞を非侵襲的に追跡することが重要です。このビデオでは、生体内でのその後のMRイメージングのための生体内で酸化鉄ベースの造影剤によるヒト間葉や胚性幹細胞を標識する方法を紹介します。
Abstract
近年では、幹細胞研究、発生生物学、様々な疾患と再生医療への影響の可能性についてのより良い理解につながっている。生体内で何度も移植された幹細胞を監視する非侵襲的方法は非常に我々の能力のメカニズムを制御する幹細胞の死を理解し、幹細胞の生着を向上させる栄養因子とシグナル伝達経路を特定するためにを高めるであろう。 MR画像は、近くに微細な解剖学的分解能を持つ幹細胞のin vivo描写のための効果的なツールであることが証明されています。 MRで幹細胞を検出するためには、細胞が細胞特異的MRの造影剤で標識する必要があります。この目的のために、このような超常磁性酸化鉄粒子（SPIO）のような酸化鉄ナノ粒子は、、のための細胞の検出とその優れた生体適合性のための彼らの高感度で、適用されます。 SPIO粒子は酸化鉄のコアとT2強調MR画像上で減少信号を発生するローカルフィールドの不均一性を、作成することによって、デキストラン、carboxydextranまたは澱粉コート、および関数で構成されています。このプレゼンテーションでは、MRイメージングと標識された細胞の生体内追跡、その後の非侵襲的に臨床的に適用可能なMR造影剤と幹細胞の標識のためのテクニックのデモンストレーションを行います。
Protocol
Discussion
幹細胞の非侵襲的な描写は、ほぼすべての幹細胞ベースの治療を監視するために重要です。標識された幹細胞のin vivo動態ののより良い理解は、のようなMR画像上で可視化、合理的に方法および幹細胞ベースの治療をより効果的に使用する可能性があります。我々は臨床的に適用される造影剤とイメージング技術を使用しているため、私たちの提示プロトコルは、患者のアプリケーションに簡単に翻訳する必?…
Acknowledgements
このプロジェクトは、再生医療のためのカリフォルニア工科大学からレオンJ.タールのSEEDの助成金によってサポートされていました。トビアスヘニングは、ドイツ研究協会（DFG、HE 4578/1-2）から奨学金研究によって資金を供給された。我々は感謝してヒト胚性幹細胞の培養上彼のアドバイスをファニートのMenesesを確認応答したい。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| Gelatin | Reagent | Sigma | G1890 | dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 % |
| PBS (Ca++ Mg++ freed) | Reagent | GIBCO | 14190-144 | |
| Trypsin-EDTA 0.05% | Reagent | Invitrogen | 25300-120 | |
| Trypsin-EDTA 0.25% | Reagent | Invitrogen | 25200-114 | |
| FBS characterized | Reagent | Hyclone | SH30071.03 | |
| Cell Strainer (40 μm Nylon) | Tool | BD Falcon | 352340 | |
| Knockout DMEM | Reagent | GIBCO | 10829018 | |
| Knockout Serum Replacer | Reagent | GIBCO | 10828028 | |
| b-Mercaptoethanol | Reagent | Sigma | 7522 | |
| non-essential amino acids | Reagent | GIBCO | 11140050 | |
| FGF-2 | Reagent | R&D Systems | 233-FB-025 | |
| Glutamine | Reagent | GIBCO | 25030081 | |
| Penicillin/Streptomycin | Reagent | GIBCO | 15140-122 | |
| Ferumoxides (Endorem) | Reagent | Guerbet | ||
| Ferucarbotran (Resovist®) | Reagent | Bayer Schering AG |
Referências
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents. 228, 760-767 (2003).
- Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment. Radiology. 234, 197-205 (2005).
- Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. Cell labeling with the positive MR contrast agent. Gadofluorine M. Eur Radiol. 17, 1226-1234 (2007).
