Aphids संयंत्र वायरस के प्रभावी ट्रांसमीटरों हैं. वायरस के aphid microinjection, प्रक्रिया आज हम आपको दिखा देंगे, शोधकर्ताओं aphid के hemocoel में सीधे वायरस इंजेक्षन करने के लिए, पेट को दरकिनार, एक circulative तरीके से 2 वायरस संचरण के लिए प्रमुख बाधाओं में से एक की अनुमति तकनीक है. उसी तकनीक का भी आरएनएआई के लिए dsRNA इंजेक्षन करने के लिए प्रयोग किया जाता है.
Abstract
आलू loafroll (PLRV) परिवार Luteoviridae से, वायरस solanaceous पौधों को संक्रमित करता है. यह एफिड्स द्वारा फैलता है, मुख्य रूप से हरे रंग आड़ू aphid. जब एक असंक्रमित aphid एक संक्रमित संयंत्र पर खिलाती है यह संयंत्र फ्लोएम के माध्यम से वायरस अनुबंध. एक बार किया जाता है, वायरस कीट पेट से hemolymph (कीट रक्त) पास और तो लार ग्रंथि के माध्यम से गुजरती हैं, क्रम में करने के लिए वापस एक नए संयंत्र के लिए प्रेषित किया जा चाहिए. एक aphid अलग वायरस ले जब एक संयंत्र पर कुतरने हो सकता है, लेकिन केवल एक छोटा सा अंश पेट और लार ग्रंथि के माध्यम से गुजरती हैं, संचरण के लिए दो मुख्य बाधाओं अधिक पौधों को संक्रमित करने के लिए. प्रयोगशाला में, हम Physalis पौधों का उपयोग PLRV संचरण का अध्ययन. इस मेजबान में, लक्षण stunting और interveinal क्लोरज़ (हरी शेष नसों के साथ नसों के बीच पत्तियों की पीली) द्वारा विशेषता है. वीडियो है कि हम वर्तमान कीड़े कि वेक्टर PLVR वायरस और परीक्षण है कि क्या पेट वायरल संचरण को रोकने नहीं है पर aphid microinjection प्रदर्शन के लिए एक विधि दर्शाता है. वीडियो है कि हम वर्तमान कीड़े कि वेक्टर PLVR वायरस और परीक्षण चाहे पेट या लार ग्रंथि वायरल संचरण को रोकने नहीं है पर aphid microinjection प्रदर्शन के लिए एक विधि दर्शाता है.
Protocol
यह परीक्षण करने के लिए है अगर एक aphid एक वायरस सदिश करने के लिए सक्षम है, हम 2 दिनों के लिए संक्रमित ऊतकों पर aphids फ़ीड. फिर, हम यह एक स्वस्थ संयंत्र में 5 दिनों के लिए फ़ीड करने के लिए अनुमति देते हैं. संयंत्र तो fumigate…
Tamborindeguy, C., Gray, S., Jander, G. Testing the Physiological Barriers to Viral Transmission in Aphids Using Microinjection. J. Vis. Exp. (15), e700, doi:10.3791/700 (2008).