嗜中性粒细胞之间的第一个细胞到达炎症免疫反应的工地上,和其职能和机制,已被广泛地在体外研究。我们展示一个标准密度梯度分离法,隔离人类使用市售的分离介质从整个血液中性粒细胞。
中性粒细胞的多形核粒细胞(PMN)在人类之间的第一个细胞到达炎症免疫反应的部位,最丰富的白细胞。由于其关键作用,在炎症,如中性粒细胞功能的运动,细胞因子的产生,的吞噬功能,和肿瘤细胞的作战广泛的研究。为特征的中性粒细胞的特定功能,其他血细胞分离干净,快速,可靠的方法是可取的,尤其是因为在体外研究中性粒细胞是短命的,应在2-4小时收集。在这里,我们展示了一个标准的密度梯度分离法,从全血使用市售分离介质,是一种混合物,钠metrizoate和右旋糖酐500人中性粒细胞隔离。由分层全血通过离心,密度梯度介质,中性粒细胞层的分离,剩余红细胞裂解的过程。细胞,然后洗净,计数,并在缓冲区所需浓度的悬浮。正确执行时,此方法已被证明收益率> 95%嗜中性粒细胞> 95%的可行性的样品。
密度梯度分离法是用来隔离从全血混合使用metrizoate钠和右旋糖酐500人中性粒细胞。这种方法是基于对Boyum(1968年)的单核白细胞分离法修改费兰特和通(1980)中性粒细胞分离。
从捐赠者收集后,全血用EDTA,柠檬酸或肝素抗凝。由于它们是短命的,中性粒细胞应收集2-4小时内使用。由分层全血通过离心,密度梯度介质,中性粒细胞层的分离,剩余红细胞裂解的过程。细胞,然后洗净,计算,并重新悬?…
资金从美国国立卫生研究院R01 HL56621。