ثقافة الخلايا الجذعية من الدم النخاعي السلائف نخاع العظم
Summary
هذا الفيديو يوضح الإجراء للتمييز بين الخلايا الجذعية من نخاع العظم النخاعي الماوس. وأظهرت عزلة الماوس الساق وعظم الفخذ ، ومعالجة نخاع العظم. وتظهر الصور يتظاهرون مورفولوجية الخلية قبل وبعد التمايز ، والشخصيات التي تصور النمط الظاهري الخلية ونضوج IL – 12 الإنتاج التالية باستخدام CPG.
Abstract
وكثيرا ما تستخدم الخلايا الجذعية النخاعي (DCS) لدراسة التفاعلات بين آليات المناعة الفطرية والتكيف والاستجابة المبكرة للعدوى. لأن هذه هي أقوى مستضد تقديم الخلايا ، ويجري البلدان النامية تستخدم بشكل متزايد كناقل لقاح لدراسة تحريض مستضد محددة الاستجابات المناعية. في هذا الفيديو ، نبدي الداخلي للحصاد وtibias femurs ماوس من المانحين ، ومعالجة نخاع العظم والتفريق البلدان النامية في المختبر. تغيير خصائص البلدان النامية التحفيز التالية : الخلايا الجذعية غير الناضجة هي البالعات قوية ، في حين أن البلدان النامية قادرة على تنضج العرض والتفاعل مع مستضد CD4 + و + CD8 خلايا تي. هذا التغيير في النشاط الوظيفي يتوافق مع upregulation من علامات سطح الخلية والإنتاج خلوى. ويمكن استخدام العديد من وكلاء للبلدان النامية ناضجة ، بما في ذلك السيتوكينات وعدد يغاندس مستقبلات شبيهة. في هذا الفيديو ، ونظهر مقارنات تدفق cytometric للتعبير عن جزيئات تنشيطية شارك في اثنين ، و CD86 CD40 ، وخلوى و، IL – 12 ، في أعقاب التحفيز بين عشية وضحاها مع العلاج CPG أو وهمية. بعد التمايز ، ويمكن التلاعب بها البلدان النامية مزيد من استخدام كناقل لقاح أو لتوليد مستضد محددة الاستجابات المناعية التي ينبض في المختبر باستخدام الببتيدات أو بروتينات أو transduced باستخدام ناقلات فيروسية المؤتلف.
Protocol
Discussion
البلدان النامية هي مفيدة لدراسات التفاعلات المناعية الفطرية والتكيفية ، ويمكن استخدامها كناقل اللقاح. في هذا الفيديو ، وقد برهنا على خطوات لعزل النخاع العظمي والخلايا الجذعية التفريق النخاعي في المختبر. بعد فترة الثقافة ، ويمكن تصور هذه الخلايا مجهريا كل من الخلايا الملتصقة و…
Acknowledgements
معتمد من قبل JB منحة دراسية من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث (NSERC). تم تقديم الدعم لهذا المشروع من قبل المعاهد الكندية لأبحاث الصحة والمنح MOP – 67066.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| recombinant murine GM-CSF | Reagent | Peptrotech | 315-03 |
Referências
- Lutz, M. B., Kukutsch, N., Ogilvie, A. L., Rossner, S., Koch, F., Romani, N., Schuler, G. An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow. J. Immunol. Methods. 223, 77-92 (1999).
- Gilboa, E. DC-based cancer vaccines. J. Clin. Invest. 117, 1195-1203 (2007).
