अस्थि मज्जा व्यापारियों से माइलॉयड वृक्ष के समान कोशिकाओं की संस्कृति
Summary
इस वीडियो में माउस अस्थि मज्जा से माइलॉयड वृक्ष के समान कोशिकाओं फर्क करने के लिए प्रक्रिया को दर्शाता है. माउस टिबिअ और जांध की हड्डी, और अस्थि मज्जा के प्रसंस्करण के अलगाव का प्रदर्शन कर रहे हैं. पहले और बाद में भेदभाव सेल आकारिकी का प्रदर्शन, चित्र, और आंकड़े सेल phenotype और आईएल -12 उत्पादन निम्नलिखित CPG का उपयोग परिपक्वता चित्रण दिखाए जाते हैं.
Abstract
माइलॉयड वृक्ष के समान कोशिकाओं (DCs) अक्सर जन्मजात और अनुकूली प्रतिरक्षा तंत्र और संक्रमण के लिए जल्दी प्रतिक्रिया के बीच संबंधों का अध्ययन किया जाता है. क्योंकि इन सबसे शक्तिशाली प्रतिजन कोशिकाओं पेश हैं, DCs तेजी से किया जा रहा है एक टीका वेक्टर के रूप में इस्तेमाल किया प्रतिजन विशिष्ट प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की प्रेरण का अध्ययन. इस वीडियो में, हम एक दाता माउस से tibias और femurs कटाई, अस्थि मज्जा प्रसंस्करण और इन विट्रो में फर्क DCs के लिए प्रक्रिया प्रदर्शित करता है. उत्तेजना निम्नलिखित DCs परिवर्तन के गुण: अपरिपक्व वृक्ष के समान कोशिकाओं शक्तिशाली phagocytes हैं, जबकि परिपक्व DCs प्रतिजन प्रस्तुति के साथ बातचीत और CD4 + CD8 + टी कोशिकाओं में सक्षम हैं. कार्यात्मक गतिविधि में यह परिवर्तन कोशिका की सतह मार्करों और cytokine उत्पादन की upregulation के साथ मेल खाती है. कई एजेंटों साइटोकिन्स और टोल की तरह रिसेप्टर ligands सहित परिपक्व DCs करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस वीडियो में, हम दो सह – stimulatory अणुओं, CD86 और CD40, और साइटोकाइन, आईएल -12 की अभिव्यक्ति के प्रवाह cytometric तुलना दिखाना CPG या नकली उपचार के साथ रात में उत्तेजना के बाद. भेदभाव के बाद, DCs आगे एक टीका वेक्टर के रूप में किया जा सकता है उपयोग के लिए चालाकी से या इन विट्रो में द्वारा प्रतिजन विशिष्ट प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न पेप्टाइड्स या प्रोटीन का उपयोग स्पंदन, या पुनः संयोजक वायरल vectors का उपयोग कर transduced.
Protocol
Discussion
DCs सहज और प्रतिरक्षा अनुकूली बातचीत के अध्ययन के लिए उपयोगी होते हैं, और एक टीका वेक्टर के रूप में नियोजित किया जा सकता है. इस वीडियो में, हम अस्थि मज्जा को अलग और इन विट्रो में अंतर माइलॉयड वृक्ष के समान कोशिकाओं…
Acknowledgements
जेबी प्राकृतिक विज्ञान और इंजीनियरिंग अनुसंधान परिषद () NSERC से studentships द्वारा समर्थित है. स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान कनाडा के द्वारा इस परियोजना के लिए सहायता प्रदान की गई है, अनुदान एमओपी 67,066.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| recombinant murine GM-CSF | Reagent | Peptrotech | 315-03 |
Referências
- Lutz, M. B., Kukutsch, N., Ogilvie, A. L., Rossner, S., Koch, F., Romani, N., Schuler, G. An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow. J. Immunol. Methods. 223, 77-92 (1999).
- Gilboa, E. DC-based cancer vaccines. J. Clin. Invest. 117, 1195-1203 (2007).
