ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में लारवल सीएनएस के विच्छेदन
Summary
हम इस लेख में प्रदर्शित कैसे तीसरे instar ड्रोसोफिला लार्वा से केंद्रीय तंत्रिका तंत्र टुकड़े करना.
Abstract
ड्रोसोफिला लार्वा के केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (CNS) जटिल और खराब समझ है. सीएनएस जांच immunohistochemistry का उपयोग करने के लिए विभिन्न उपन्यास और मार्कर प्रोटीन की अभिव्यक्ति की जांच करने के लिए है. पूरे लार्वा की धुंधला अव्यावहारिक है क्योंकि कठिन छल्ली शरीर गुहा के अंदर मर्मज्ञ से एंटीबॉडी को रोकता है. आदेश में इन ऊतकों दाग करने के लिए यह करने के लिए फिक्सिंग और धुंधला जानवर पहले काटना आवश्यक है. हम इस लेख में प्रदर्शित कैसे सीएनएस हानिकारक के बिना ड्रोसोफिला लार्वा टुकड़े करना. ठीक संदंश की एक जोड़ी के साथ आधे में लार्वा को फाड़ के द्वारा शुरू करो, और तब छल्ली "अंदर – बाहर" बारी करने के लिए सीएनएस बेनकाब. यदि विच्छेदन सावधानी से किया जाता है सीएनएस छल्ली के लिए संलग्न रहेगा. हम आम तौर पर निर्धारण और धुंधला कदम भर छल्ली से जुड़ी सीएनएस रखने के लिए, और केवल पूरी तरह से छल्ली से सीएनएस गिलास स्लाइड पर नमूने बढ़ते सिर्फ पहले हटायें. हम भी एक लार्वा ईव, CNS में न्यूरॉन्स की एक सबसेट में व्यक्त एक प्रतिलेखन कारक के साथ दाग सीएनएस के कुछ प्रतिनिधि छवियाँ दिखा. लेख कुछ इस तकनीक और संभावित कठिनाइयों पैदा हो सकता है कि व्यावहारिक का उपयोग करता है की एक चर्चा के साथ समाप्त.
Protocol
Discussion
इस वीडियो यह दर्शाता है कि कैसे तीसरे instar ड्रोसोफिला लार्वा से सीएनएस काटना. विच्छेदन के बाद, CNS के एक मानक immunohistochemistry प्रोटोकॉल का उपयोग दाग जा सकता है. वर्तमान में, अभी भी बहुत कैसे वयस्क तंत्रिका तंत्र के रूप में अ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| forceps | fine tipped | |||
| 9-well watch glass | ||||
| plastic petri dish |
Referências
- Lin, D. M., Goodman, C. S. Ectopic and increased expression of fasciclin II alters motoneuron growth cone guidance. Neuron. 13, 507-523 (1994).
- Park, Y., Fujioka, M., Kobayashi, M., Jaynes, J., Datta, S. even skipped is required to produce a trans-acting signal for larval neuroblast proliferation that can be mimicked by ecdysone. Development 128. , 1899-1909 (2001).
