Survivable stereotaxische Chirurgie in Knaagdieren
Summary
De controle van de extracellulaire neurotransmitter niveaus in verschillende gebieden van de hersenen van vrij bewegende dieren biedt inzichten over het verband tussen neurotransmitters en gedrag. In vivo microdialyse gekoppeld met elektrochemische detectie zorgt voor een uitstekende anatomische en chemische resolutie, en informatie over hoe basale neurotransmissie wordt aangepast door farmacologische of fysiologische manipulaties.
Abstract
De mogelijkheid om extracellulaire basale niveaus van neurotransmitters in de hersenen van de dieren wakker te meten maakt voor de bepaling van de effecten van verschillende systemische problemen (farmacologische of fysiologische) naar het centrale zenuwstelsel. Bijvoorbeeld, kan men direct meten hoe het dier middenhersenen dopamine projecties te reageren op dopamine-releasing drugs zoals d-amfetamine of natuurlijke prikkels, zoals voedsel. In deze video laten we zien hoe u begeleiden canules richten op specifieke plaatsen in de hersenen van de rat implantaat, hoe in te voegen en implantaat een microdialyse probe en hoe high performance vloeistofchromatografie gekoppeld met elektrochemische detectie (HPLC-EG) te gebruiken om de extracellulaire spiegels van meten oxideerbare neurotransmitters en metabolieten. Lokale precieze introductie van drugs door de microdialyse probe zorgt voor verfijnde werk op het terrein specificiteit in mechanisme van een verbinding is van de actie. Deze techniek heeft uitstekende anatomische en chemische resolutie, maar slechts bescheiden tijdsresolutie als microdialyse monsters worden meestal verwerkt elke 20-30 minuten naar detecteerbare neurotransmitter niveaus te garanderen. Aanvullende ex vivo tools (dat wil zeggen, slice en celcultuur elektrofysiologie) kan helpen met het toezicht op real-time neurotransmissie.
Protocol
Discussion
In vivo microdialyse is het middel bij uitstek voor het meten van meerdere neurotransmitters en metabolieten in verschillende plaatsen de hersenen van een levend dier. Echter, het controleert alleen de extracellulaire spiegels van neurotransmitters en het biedt niet de tijd resolutie om neurotransmitter exocytose monitoren in real time. Door middel van een versie van de techniek genaamd "netto-flux", kan de eigenlijke neurotransmitter concentratie op een bepaalde locatie worden berekend, die op hun beurt kunnen nauwkeurige metinge…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ondersteund door DK065872 (ENB), een Smith Family Foundation Award of Excellence in Biomedical Research (ENB), F31 DA023760.
Referências
- Bungay, P. M., Newton-Vinson, P., Isele, W., Garris, P. A., Justice, J. B. Microdialysis of dopamine interpreted with quantitative model incorporating probe implantation trauma. J. Neurochem. 86, 932-946 (2003).
- Chen, K. C. Effects of tissue trauma on the characteristics of microdialysis zero-net-flux method sampling neurotransmitters. Journal of Theor. Biology. 238, 863-881 (2006).
- Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats. FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).
- Pothos, E. N., Creese, I., Hoebel, B. G. Restricted eating with weight loss selectively decreases extracellular dopamine in the nucleus accumbens and alters dopamine response to amphetamine, morphine and food intake. The Journal of Neuroscience. 15, 6640-6650 (1995).
