Survivable stereotaktischen Chirurgie in Nagetiere
Summary
Die Überwachung der extrazellulären Neurotransmitter Ebenen in verschiedenen Hirnregionen der frei beweglichen Tieren bietet Einblicke über den Zusammenhang zwischen Neurotransmittern und Verhalten. In-vivo-Mikrodialyse mit elektrochemischer Detektion gekoppelt bietet eine hervorragende anatomische und chemische Auflösung, und Informationen darüber, wie basale Neurotransmission wird durch pharmakologische oder physiologische Manipulationen verändert.
Abstract
Die Fähigkeit, extrazelluläre basale Konzentrationen von Neurotransmittern im Gehirn der Tiere wach Maßnahme kann für die Bestimmung der Auswirkungen von unterschiedlichen systemischen Herausforderungen (pharmakologische oder physiologische) an das ZNS. Zum Beispiel kann man direkt zu messen, wie das Tier Mittelhirn Dopamin Projektionen zu Dopamin-freisetzenden Drogen wie d-Amphetamin oder natürliche Reize wie Nahrung reagieren. In diesem Video zeigen wir Ihnen, wie Sie führen Kanülen auf bestimmte Websites im Gehirn der Ratte Implantat, das Einsetzen und Implantat eine Mikrodialysesonde und wie Hochleistungs-Flüssigchromatographie mit elektrochemischer Detektion (HPLC-EC) gekoppelt zu verwenden, um die extrazelluläre Konzentration von Maßnahmen oxidierbare Neurotransmitter und Metaboliten. Lokale genaue Einführung von Medikamenten durch die Mikrodialysesonde ermöglicht raffinierte Arbeiten auf der Baustelle Spezifität in einer Verbindung s Wirkmechanismus. Diese Technik hat hervorragende anatomische und chemische Auflösung, aber nur bescheidene zeitliche Auflösung als Mikrodialyseproben sind in der Regel alle 20-30 Minuten verarbeitet werden, um nachweisbar Neurotransmitter Ebenen zu gewährleisten. Ergänzende ex vivo-Tools (dh, in Scheiben schneiden und Zellkultur Elektrophysiologie) kann mit der Überwachung in Echtzeit Neurotransmission zu unterstützen.
Protocol
Discussion
In-vivo-Mikrodialyse ist das Werkzeug der Wahl für die Messung mehrerer Neurotransmitter und Metaboliten in verschiedenen Gehirn Standorten eines lebenden Tieres. Allerdings ist es nur überwacht die extrazelluläre Konzentration von Neurotransmittern und es bietet nicht die zeitliche Auflösung zu Exozytose von Neurotransmittern in Echtzeit zu überwachen. Durch eine Version der Technik namens "net-flux", kann die tatsächliche Neurotransmitter-Konzentration an einem bestimmten Ort berechnet werden, was wiederum genaue Messungen…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Unterstützt durch DK065872 (ENP), eine Smith Family Foundation Award of Excellence in Biomedical Research (ENP), F31 DA023760.
Referências
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