Summary

כירורגיה Stereotaxic לשרוד במכרסמים

Published: October 06, 2008
doi:

Summary

ניטור של רמות הנוירוטרנסמיטר תאי מוח באזורים שונים של בעלי חיים באופן חופשי לנוע מציע תובנות על הקשר בין שחרור הנוירוטרנסמיטר והתנהגות. בשנת vivo microdialysis יחד עם זיהוי אלקטרוכימי מספק אנטומי מעולה ברזולוציה כימיים ומידע איך עצבית הבסיס משתנה על ידי מניפולציות תרופתי או פיזיולוגי.

Abstract

היכולת למדוד את רמות הבסיס תאיים של נוירוטרנסמיטורים במוח של חיות ער מאפשר לקביעת ההשפעות של אתגרים מערכתיים שונים (תרופתי או פיזיולוגי) של מערכת העצבים המרכזית. לדוגמה, ניתן למדוד ישירות איך הדופמין במוח התיכון של החיה תחזיות להגיב דופמין שחרור תרופות כמו גירויים d-אמפטמין או טבעיים כמו מזון. בסרטון הזה, אנו מראים לך איך שתל cannulas מדריך מיקוד לאתרים ספציפיים במוח חולדה, איך להוסיף שתל בדיקה microdialysis וכיצד להשתמש ביצועים גבוהים כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב עם זיהוי אלקטרוכימי (HPLC-EC) כדי למדוד רמות של תאי נוירוטרנסמיטורים oxidizable ומטבוליטים. מבוא מדויק מקומי של תרופות באמצעות החללית microdialysis מאפשר עבודה מעודן על סגוליות האתר מנגנון של מתחם הפעולה. טכניקה זו אנטומי מעולה ברזולוציה כימיים אבל רק ברזולוציה זמן צנוע כמו דגימות microdialysis מעובדים בדרך כלל כל 20-30 דקות כדי להבטיח רמות הנוירוטרנסמיטר לזיהוי. כלים משלימים לשעבר vivo (כלומר, פרוסה והתרבות תא electrophysiology) יכול לסייע עם ניטור בזמן אמת עצבית.

Protocol

תקציר שני בן חודש ממוצע C57BL/6J גיל עכברים או שווה ערך או שלושה חודשים הישן הגיל הממוצע חולדות Sprague Dawley או שווה ערך מורדמים עם קטמין (60 מ"ג / ק"ג ה-IP של חולדות: 100 מ"ג / ק"ג ip עבור עכברים) ו xylazine (10 מ"ג / kg, ip גם עבור מינים). הרגעה היא לנטר באמצ?…

Discussion

בשנת vivo microdialysis היא הכלי המועדף למדידת נוירוטרנסמיטרים מרובים מטבוליטים באתרים שונים של המוח החי. עם זאת, רק מפקחת רמות של תאי neurochemicals וזה לא מציעים את הפתרון זמן כדי לפקח exocytosis נוירוטרנסמיטר בזמן אמת. באמצעות גרסה של טכניקה המכונה "נטו השטף", ריכוז הנוירוטרנסמיטר בפועל באת…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

נתמך על ידי DK065872 (ENP), קרן משפחת סמית פרס הצטיינות במחקר ביו (ENP), F31 DA023760.

Materials

Materials are described in the protocol document

Referências

  1. Bungay, P. M., Newton-Vinson, P., Isele, W., Garris, P. A., Justice, J. B. Microdialysis of dopamine interpreted with quantitative model incorporating probe implantation trauma. J. Neurochem. 86, 932-946 (2003).
  2. Chen, K. C. Effects of tissue trauma on the characteristics of microdialysis zero-net-flux method sampling neurotransmitters. Journal of Theor. Biology. 238, 863-881 (2006).
  3. Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats. FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).
  4. Pothos, E. N., Creese, I., Hoebel, B. G. Restricted eating with weight loss selectively decreases extracellular dopamine in the nucleus accumbens and alters dopamine response to amphetamine, morphine and food intake. The Journal of Neuroscience. 15, 6640-6650 (1995).
check_url/pt/880?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents . J. Vis. Exp. (20), e880, doi:10.3791/880 (2008).

View Video