Burada uyaran ve sıçan kulak gecikmiş tip aşırı duyarlılık (DTH) reaksiyon ilerleme kaydetmek için bir yöntem gösteriyor. Bu sıçan kulak doku hazırlanması / bellek efektör T hücre yanıtının iki foton görüntüleme için bir gösteri izledi.
Abstract
Efektör / bellek T lenfositleri – Gecikmiş tip aşırı duyarlılık (DTH), ana oyuncuları CCR7 olan bir bağışıklık reaksiyonu . Burada, uyaran ve sıçan kulakta bir DTH reaksiyon ilerleme kaydetmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Efektör / bellek T hücre yanıtı – Bu sıçan kulak doku hazırlanması CCR7 iki foton görüntüleme için bir gösteri izledi.
Efektör / bellek T hücre hattı (Beeton, C J. görüntülenmiştir deneyler, Sayı: 8) – Bir evlat edinen DTH GFP etiketli Ova özel CCR7 intraperitoneal enjeksiyonu ile indüklenen. Hücreler daha sonra 48 saat önce meydan görselleştirme izin Texas-Kırmızı Ova ve Ova konjuge 1:1 karışımlar (Ova-TR) ile serum fizyolojik (kontrol kulak) ve diğer bir kulak enjekte sıçan denge sağlaması için izin verilir yerleşik antijen-sunan hücreler.
Biz bir görüntüleme motilite bir immün yanıt sırasında, ikinci harmonik üretimi, kolajen liflerinin görselleştirme ile birlikte derin dermal tabaka içinde hücreler için yararlı doku hazırlanması yöntemi açıklanmaktadır. Kulak doku 5 x 5 mm kareler (biraz daha büyük daha iyidir) oyulmuş ve sonra 37 görüntüleme odasında silikon gres kullanılarak güvenli ve oksijen kabarmış doku kültürü ortamı superfused Vetbond ™ kullanarak plastik kapak bordroları monte ° C .
Protocol
Kabul edilmiş DTH indüksiyonu İndüksiyon ve İzleme Lütfen vallahi makalesine bakın: Sıçanlarda Kabul edilmiş Gecikmeli-Tipi aşırı duyarlılık Christine Beeton George K. Chandy Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü, University of California, Irvine J. görüntülenmiştir Deneyler, Sayı 8 Burada, bu protokol fagositik antijen-sunan hücrele…
Matheu, M. P., Beeton, C., Parker, I., Chandy, K. G., D. Cahalan, M. Imaging Effector Memory T cells in the Ear After Induction of Adoptive DTH. J. Vis. Exp. (18), e907, doi:10.3791/907 (2008).