Kabul edilmiş DTH indüksiyonu sonra Kulak Görüntüleme Efektör Bellek T hücreleri
Summary
Burada uyaran ve sıçan kulak gecikmiş tip aşırı duyarlılık (DTH) reaksiyon ilerleme kaydetmek için bir yöntem gösteriyor. Bu sıçan kulak doku hazırlanması / bellek efektör T hücre yanıtının iki foton görüntüleme için bir gösteri izledi.
Abstract
Efektör / bellek T lenfositleri – Gecikmiş tip aşırı duyarlılık (DTH), ana oyuncuları CCR7 olan bir bağışıklık reaksiyonu . Burada, uyaran ve sıçan kulakta bir DTH reaksiyon ilerleme kaydetmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Efektör / bellek T hücre yanıtı – Bu sıçan kulak doku hazırlanması CCR7 iki foton görüntüleme için bir gösteri izledi.
Efektör / bellek T hücre hattı (Beeton, C J. görüntülenmiştir deneyler, Sayı: 8) – Bir evlat edinen DTH GFP etiketli Ova özel CCR7 intraperitoneal enjeksiyonu ile indüklenen. Hücreler daha sonra 48 saat önce meydan görselleştirme izin Texas-Kırmızı Ova ve Ova konjuge 1:1 karışımlar (Ova-TR) ile serum fizyolojik (kontrol kulak) ve diğer bir kulak enjekte sıçan denge sağlaması için izin verilir yerleşik antijen-sunan hücreler.
Biz bir görüntüleme motilite bir immün yanıt sırasında, ikinci harmonik üretimi, kolajen liflerinin görselleştirme ile birlikte derin dermal tabaka içinde hücreler için yararlı doku hazırlanması yöntemi açıklanmaktadır. Kulak doku 5 x 5 mm kareler (biraz daha büyük daha iyidir) oyulmuş ve sonra 37 görüntüleme odasında silikon gres kullanılarak güvenli ve oksijen kabarmış doku kültürü ortamı superfused Vetbond ™ kullanarak plastik kapak bordroları monte ° C .
Protocol
Referências
- Koo, G. C., et al. Blockade of the voltage-gated potassium channel Kv1.3 inhibits immune responses in vivo. J Immunol. 158, 5120-5128 (1997).
- Gaga, M., Frew, A. J., Varney, V. A., Kay, A. B. Eosinophil activation and T lymphocyte infiltration in allergen-induced late phase skin reactions and classical delayed-type hypersensitivity. J Immunol. 147, 816-822 (1991).
- Flugel, A., Odoardi, F., Nosov, M., Kawakami, N. Autoaggressive effector T cells in the course of experimental autoimmune encephalomyelitis visualized in the light of two-photon microscopy. J Neuroimmunol. 191, 86-97 (2007).
- Kawakami, N., et al. Live imaging of effector cell trafficking and autoantigen recognition within the unfolding autoimmune encephalomyelitis lesion. J Exp Med. 201, 1805-1814 (2005).
- Miller, M. J., Wei, S. H., Parker, I., Cahalan, M. D. Two-photon imaging of lymphocyte motility and antigen response in intact lymph node. Science. 296, 1869-1873 (2002).
- Matheu, M. P. B., A, C. G. a. r. c. i. a., Chi, V., Rangaraju, S., Safrina, O., Monaghan, K., Uemura, M. I., Li, D., Pal, S., Monuki, E., Flugel, A., Pennington, M. W., Parker, I., Chandy, G. K., Calahan, M. D. In Situ Imaging of Effector/Memory T Cells During DTH and Suppression by Kv1.3 Channel Block. Immunity. , (2008).
