Summary

माउस में Cisterna मैग्ना से मस्तिष्कमेरु द्रव के सीरियल संग्रह के लिए एक तकनीक

Published: November 10, 2008
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Summary

ट्रांसजेनिक (टीजी) ई. के माउस मॉडल कैसे और क्यों Aβ या ताऊ स्तर सी.एस.एफ. में परिवर्तन की जांच के रूप में मानव रोगियों में रोग की प्रगति के लिए एक उत्कृष्ट अवसर प्रदान करते हैं. यहाँ, हम माउस से धारावाहिक सी.एस.एफ. नमूने के लिए एक परिष्कृत cisterna मैग्ना पंचर तकनीक प्रदर्शित करता है.

Abstract

अल्जाइमर रोग (ई.) एक प्रगतिशील neurodegenerative रोग है कि pathologically β-amyloid पेप्टाइड (Aβ) और hyperphosphorylated ताऊ प्रोटीन का intraneuronal संचय के कोशिकी बयान की विशेषता है है. क्योंकि मस्तिष्कमेरु द्रव (CSF) में मस्तिष्क की बाह्य अंतरिक्ष के साथ सीधे संपर्क में है, यह रोग प्रक्रियाओं के जवाब में मस्तिष्क में जैव रासायनिक परिवर्तन का एक प्रतिबिंब प्रदान करता है. ई. रोगियों से सी.एस.एफ. 42 Aβ (Aβ42) के रूप अमीनो एसिड, और कुल ताऊ और hyperphosphorylated ताऊ में वृद्धि में कमी को दर्शाता है, हालांकि इन परिवर्तनों के लिए जिम्मेदार तंत्र अभी भी पूरी तरह से नहीं समझ रहे हैं. ट्रांसजेनिक (टीजी) ई. के माउस मॉडल कैसे और क्यों Aβ या ताऊ स्तर सी.एस.एफ. बदलने में इस रोग की प्रगति के रूप में जांच के लिए एक उत्कृष्ट अवसर प्रदान करते हैं. यहाँ, हम माउस से सी.एस.एफ. नमूने के लिए एक परिष्कृत cisterna मैग्ना पंचर तकनीक प्रदर्शित करता है. यह अत्यंत कोमल नमूना तकनीक धारावाहिक सी.एस.एफ. नमूने 2-3 महीने के अंतराल पर एक ही माउस जो बहुत Aβ या ताऊ के स्तर में भिन्नता के बीच माउस के confounding प्रभाव कम से कम, यह समय पर सूक्ष्म परिवर्तन का पता लगाने के लिए संभव बनाने से प्राप्त की अनुमति देता है. ताऊ और एलिसा Aβ के साथ संयोजन में, इस तकनीक ई. माउस मॉडल में मस्तिष्क में सी.एस.एफ. Aβ42 और ताऊ के स्तर के बीच संबंध और उनके चयापचय की जांच करने के लिए डिज़ाइन अध्ययन के लिए उपयोगी हो जाएगा. टीजी चूहों में अध्ययन सी.एस.एफ. Aβ या ताऊ स्तर की क्षमता निगरानी रोग प्रगति के लिए जैविक मार्करों के रूप में इस्तेमाल किया जा के रूप में महत्वपूर्ण मान्यता प्रदान करते हैं, सकता है और उपचारात्मक उपायों के प्रभाव की निगरानी. के रूप में चूहों और बलिदान किया जा सकता है दिमाग जैव रासायनिक या histological परिवर्तन के लिए जांच की जा सकती, सी.एस.एफ. परिवर्तन अंतर्निहित तंत्र को बेहतर मूल्यांकन किया जा सकता है. इन आंकड़ों को मानव ई. सी.एस.एफ. परिवर्तन की व्याख्या के लिए जानकारीपूर्ण होने की संभावना हैं.

Protocol

गिलास केशिका ट्यूब पुलिंग गिलास केशिका ट्यूब Sutter साधन इंक (Borosilicate कांच, B100-75-10) से खरीदा है. एक Sutter पर पी 87 micropipette डांड़ी गर्मी सेट सूचकांक 300 पर और दबाव सूचकांक 330 पर सेट के साथ ज्वलंत. केशिका ट्यूब खींचो ?…

Discussion

हम detectable प्लाज्मा संदूषण के बिना चूहों से सी.एस.एफ. के धारावाहिक नमूने के लिए एक अत्यंत विश्वसनीय प्रोटोकॉल का वर्णन.

1. पूरी प्रक्रिया आम तौर पर माउस प्रति 10 मिनट (संज्ञाहरण सहित) लेता है. सी.एस.एफ. प्राप्त की मात…

Acknowledgements

हमारा काम NIH अनुदान NS048447 और AG017216to केडी द्वारा समर्थित है. ली लियू अपने पर्यवेक्षण और समर्थन के लिए मूल प्रोटोकॉल के विकास के दौरान डा. Heikki Tanila (क्वॉपिया, क्वॉपिया, फिनलैंड विश्वविद्यालय) को धन्यवाद देना चाहूंगा.

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Citar este artigo
Liu, L., Duff, K. A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse . J. Vis. Exp. (21), e960, doi:10.3791/960 (2008).

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