Une technique de recueil de série du liquide céphalorachidien de la grande citerne de souris
Summary
Modèles de souris transgéniques (Tg) de AD offrent une excellente occasion d'examiner comment et pourquoi les niveaux de Aß ou de tau dans le LCR changements que la maladie progresse chez les patients humains. Ici, nous démontrons une technique raffinée cisterna magna perforation pour l'échantillonnage CSF de série de la souris.
Abstract
La maladie d'Alzheimer (MA) est une maladie neurodégénérative progressive qui est pathologiquement caractérisée par un dépôt extracellulaire de β-amyloïde de peptide (Aß) et l'accumulation intraneuronale de protéines tau hyperphosphorylée. Parce que le liquide céphalorachidien (LCR) est en contact direct avec l'espace extracellulaire du cerveau, il fournit un reflet des changements biochimiques dans le cerveau en réponse à des processus pathologiques. LCR de patients atteints de MA montre une baisse dans les 42 acides aminés sous forme de Aß (Aß42), et augmente au total tau et hyperphosphorylée tau, bien que les mécanismes responsables de ces changements ne sont pas encore entièrement compris. Modèles de souris transgéniques (Tg) de AD offrent une excellente occasion d'examiner comment et pourquoi les niveaux de Aß ou de tau dans le LCR changements que la maladie progresse. Ici, nous démontrons une technique raffinée cisterna magna perforation pour l'échantillonnage de LCR chez des souris. Cette technique d'échantillonnage très doux permet série LCR d'être obtenu à partir de la même souris à 2-3 mois d'intervalle ce qui minimise considérablement l'effet de confusion entre la souris variabilité des niveaux de Aß ou tau, ce qui permet de détecter de subtiles altérations dans le temps. En combinaison avec Aß et la protéine tau ELISA, cette technique sera utile pour des études visant à étudier la relation entre les niveaux de CSF Aß42 et tau, et leur métabolisme dans le cerveau de souris modèles AD. Des études chez des souris Tg pourrait fournir une validation importante que le potentiel de Aßi LCR ou les niveaux de tau d'être utilisés comme marqueurs biologiques pour la surveillance progression de la maladie, et de surveiller les effets des interventions thérapeutiques. Comme les souris peuvent être sacrifiés et les cerveaux peuvent être examinés pour des changements biochimiques ou histologiques, les mécanismes sous-jacents aux changements CSF peut être mieux évaluée. Ces données sont susceptibles d'être instructive pour l'interprétation des changements humains LCR AD.
Protocol
Discussion
Nous avons décrit un protocole très fiable pour l'échantillonnage de série de LCR chez des souris sans contamination du plasma détectable.
1. Toute la procédure prend généralement 10 min par la souris (y compris l'anesthésie). Le volume de LCR obtenus dépend du souches de souris. Dans le PS / APP doubles souris Tg, nous used2, le volume moyen est d'environ 5 pl (3 à 7 pi), tandis que le P301L (JNPL3) souris 3 donnent un rendement d'environ 10 ul ul-15. Pour l'échantillonnage de série, un maximum de 7…
Acknowledgements
Notre travail est soutenu par des subventions du NIH et de NS048447 AG017216to KD. Li Liu tiens à remercier le Dr Heikki Tanila (Université de Kuopio, Kuopio, Finlande) pour sa supervision et du soutien lors du développement du protocole original.
Referências
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