Cisterna 마그나 마우스에서 뇌척수의 직렬 그룹에 대한 기술
Summary
AD의 형질 (TG) 마우스 모델을 어떻게 그리고 왜 Aβ 또는 타우 수준 CSF의 변화에 질병이 인간의 환자에서 진행됨에 따라 조사를 위해 좋은 기회를 제공합니다. 여기, 우리는 마우스 시리얼 CSF 샘플링을위한 세련된 cisterna 마그나 찔린 기법을 보여줍니다.
Abstract
알츠하이머 병 (AD)는 병적 β – 아밀로이드 펩티드 (Aβ)와 hyperphosphorylated 타우 단백질의 세포외 intraneuronal 축적의 증착에 의해 특징 진보적인 neurodegenerative 질병입니다. 중추 신경계 (CSF)는 두뇌의 세포외 공간에 직접 접촉하기 때문에, 그것은 병적인 과정에 대한 응답으로 뇌의 생화학 변화의 반영을 제공합니다. 이러한 변화에 책임이있는 메커니즘이 아직 완전히 이해되지 않습니다하지만 AD 환자의 CSF는 42 아미노 산성 Aβ (Aβ42)의 형태, 총 타우와 타우 hyperphosphorylated 증가에서 감소를 보여줍니다. AD의 형질 (TG) 마우스 모델을 어떻게 그리고 왜 Aβ 또는 타우 수준 CSF의 변화에 질병이 진행됨에 따라 조사에 좋은 기회를 제공합니다. 여기, 우리는 마우스 CSF 샘플링을위한 세련된 cisterna 마그나 찔린 기법을 보여줍니다. 이것은 매우 부드러운 샘플링 기술은 시리얼 CSF 샘플이 크게 시간이 지남에 따라 미묘한 변경을 감지하는 것이 가능하게, Aβ 또는 타우 수준 사이 마우스 변화의 혼란함을 주죠 효과를 최소화 2~3개월 간격으로 같은 마우스에서 구할 수 있습니다. Aβ 및 타우 엘리사와 함께이 기술은 AD 마우스 모델에서 뇌의 CSF Aβ42과 타우의 수준 사이의 관계, 그들의 신진 대사를 조사하기위한 연구에 유용합니다. TG 생쥐의 연구 모니터링 질병 진행에 대한 생물 학적 마커로 사용할 수 CSF의 Aβ 또는 타우 수준의 잠재적으로 중요한 검증을 제공할 수있다, 그리고 치료 개입의 효과를 모니터합니다. 생쥐가 희생될 수 있고 두뇌가 생화학 또는 histological 변경 검사를 할 수 있듯이, CSF 변경 기본 메커니즘은 더 나은 평가하실 수 있습니다. 이 데이터는 인간의 광고 CSF 변경의 해석에 대한 정보를 수있다.
Protocol
Discussion
우리는 감지 플라즈마 오염없이 마우스에서 CSF의 시리얼 샘플링에 대한 신뢰성이 높은 프로토콜을 설명했다.
1. 전체 절차는 일반적으로 마우스를 따라 10 분 (마취 포함) 정도 소요됩니다. CSF 획득의 볼륨 마우스 변종에 따라 좌우됩니다. P301L (JNPL3) 마우스 3 μl – 15 10 μl의 수율을 제공하면서 우리가 used2 PS / APP 더블 TG 생쥐에서 평균 거래량이 5 μl (3-7 μl)입니다. 시리얼 샘플링의 경우, 7-8 μl의 최대 안전 2~3…
Acknowledgements
우리 작품은 NIH 보조금 NS048447 및 AG017216to KD에 의해 지원됩니다. 리 리우는 원래 프로토콜의 개발 기간 동안 자신의 감독 및 지원에 대한 박사 Heikki Tanila을 (쿠오 피오 대학, 쿠오 피오, 핀란드) 감사드립니다.
Referências
- Liu, L., et al. Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice. Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).
- Holcomb, L., et al. Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes. Nat Med. 4, 97 (1998).
- Lewis, J., et al. Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein. Nat Genet. 25, 402 (2000).
- DeMattos, R. B., et al. Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer’s disease. J Neurochem. 81, 229 (2002).
- Planel, E., et al. Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia. J Neurosci. 27, 3090 (2007).
- Refolo, L. M., et al. A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer’s disease. Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).
