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S. cerevisiaeの定量的プロテオミクスとタンパク質の複合体の同定
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Biologia
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JoVE Journal Biologia
Identification of protein complexes with quantitative proteomics in S. cerevisiae
DOI:

11:12 min

March 04, 2009

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Capítulos

  • 00:00Título
  • 00:45Introduction
  • 01:17Preparation of the Bait and SILAC Control Strain
  • 02:44Grinding of Cells
  • 04:05Pre-clearing Cell Lysate
  • 05:51Eluting From IgG Beads by TEV Protease Cleavage
  • 06:45Trichloroacetic Acid (TCA) Precipitation
  • 08:11EtOH/ Acetate Precipitation
  • 09:00Sample Analysis by Western Blotting and/ or Silver Staining
  • 09:30Representative Results/ Outcome
  • 10:15Conclusion

Summary

Tadução automática

ここでは、出芽酵母でのタンパク質複合体を識別するための新しい定量的プロテオミクスの手法を説明します。本研究では、我々は、高い特異性でERタンパク質、Scs2pの結合パートナーを同定するためにタンデム質量分析が続くアフィニティー精製と一緒にSILACメソッドを使用している。

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