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Split-Ubiquitin Basierend Membrane Yeast Two-Hybrid (Mythos) System: Ein wirksames Instrument zur Ermittlung von Protein-Protein-Wechselwirkungen
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Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions
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Split-Ubiquitin Basierend Membrane Yeast Two-Hybrid (Mythos) System: Ein wirksames Instrument zur Ermittlung von Protein-Protein-Wechselwirkungen

DOI:
10.3791/1698-v

•

14:04 min

•

February 01, 2010

•

, , ,
1Department of Biochemistry,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research (CCBR),University of Toronto

Capítulos

  • 00:00Título
  • 01:22Introduction
  • 01:41Selection of Bait and Appropriate MYTH System
  • 03:04Generation of tMYTH Baits by Gap Repair
  • 03:07a. Vector Preparation and Amplification of Gene of Interest
  • 05:30b. Yeast Transformation and Recovery of Bait Plasmid DNA
  • 07:03Bait Validation
  • 08:10MYTH Screening
  • 08:12a. Large Scale Yeast Transformation
  • 11:31b. Bait Dependency Test
  • 12:54Representative Results/ Outcome
  • 13:12Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

MYTHOS ermöglicht den empfindlichen Nachweis von transienten und stabilen Wechselwirkungen zwischen Proteinen, die im Modellorganismus Saccharomyces cerevisiae exprimiert werden. Es wurde erfolgreich angewendet, um exogene und Hefe integrale Membranproteine ​​zu studieren, um ihre Interaktionspartner in einem hohen Durchsatz Weise zu identifizieren.

Tags

Split-ubiquitinMembrane Yeast Two-hybridProtein-protein InteractionsMYTH SystemFull-length Transmembrane ProteinsSaccharomyces CerevisiaeBait ProteinPrey ProteinsUbiquitin MoietiesArtificial Transcription FactorPseudo-ubiquitin MoleculeDeubiquitinating EnzymesReporter Gene Expression

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