Larvfilépreparat: En metod för att visualisera intakta sensoriska nervceller och tillhörande epidermala celler

- För att orientera en larva för filédesektion, placera den i en silikonbelagd skål som innehåller kall saltlösning och identifiera dess dorsala och ventrala sidor. Trakealrör som löper längs dess längd markerar dorsala sidan, medan bukhålsbälten identifierar den ventrala sidan.

Sedan, med ventralsidan upp, sträck försiktigt larven och stifta varje ände till botten av skålen.

Använd dissekerande sax för att skära längs larvens ventrala mittlinje. Fäst nagelbandet på plattan för att platta till preparatet och ta bort inre strukturer för att avslöja den underliggande muskelvävnaden.

I exempelprotokollet kommer vi att se en detaljerad demonstration av larvfilépreparat och muskelborttagning för att se sensoriska da-nervceller och epidermala celler.

- Till att börja med, tillsätt tillräckligt med kall saltlösning till en silikon elastomer skål för att täcka bottenytan.

Sträck larven i den främre bakre riktningen och använd insektsstift, fäst huvudet och svansen på botten av skålen.

Använd tång, ta bort de inre organen, inklusive CNS, tarm och luftstrupe. Justera insektsstiften så att filén är spänd, men inte maximalt sträckt.

Lokalisera larvens dorsala mittlinje, där muskelvävnaden är frånvarande och placera sedan en tång som sticker in i insidan av denna gräns.

- För att minimera skador på epidermis, dissekera med de plattaste möjliga spetsarna.

- Dra sedan tången uppåt för att bryta fastsättningen av muskeln på kroppsväggen vid en ankarpunkt.

Justera insektspennorna för att maximalt sträcka larvfilén i alla riktningar.