Secção de vibratomo de rim murino inteiro: uma técnica para gerar seções finas de rim murino

0 vistas3:14 min • April 30th, 2023

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Para preparar seções finas de um rim de camundongo, primeiro obtenha um rim de camundongo recém-colhido. Transfira o rim para um papel de filtro e seque-o para garantir a adesão ideal ao suporte da amostra do vibrato.

Em seguida, monte o rim, com o lado do ureter voltado para baixo, usando uma fina camada de cola de cianoacrilato aplicada na base do porta-amostras do vibratomo, prendendo o rim na posição vertical. Transfira o suporte da amostra para uma bandeja tampão.

Encha a bandeja com um tampão adequado para mergulhar totalmente a superfície superior do rim. Um banho de gelo envolve a bandeja para evitar danos aos tecidos devido ao acúmulo de calor durante o corte. Defina a lâmina do vibratomo para um ângulo, velocidade e amplitude apropriados. Ajuste o parâmetro de espessura para obter seções de tecido da espessura desejada.

Durante a operação, a lâmina vibra lateralmente e avança, penetrando através da amostra de tecido. A lâmina vibratória permite o corte com menos pressão e minimiza a deformação do tecido, gerando cortes uniformes de tecido renal de interesse, mantendo a morfologia do tecido.

Enquanto isso, monte uma placa de vários poços contendo uma solução tampão resfriada adequada para imitar as condições fisiológicas do tecido. Agora, transfira as seções de tecido fatiadas para o tampão. Finalmente, armazene as seções de tecido em baixa temperatura até uma análise posterior a jusante.

Use uma pinça de ponta romba para agarrar e remover suavemente o rim preparado da solução KRB gelada. Coloque imediatamente o rim em papel absorvente por aproximadamente 2 a 4 segundos para remover o excesso de umidade externa. Role suavemente o rim sobre o papel absorvente para garantir que todos os lados do parênquima tenham secado para que haja uma adesão ideal do rim ao estágio de vibrato.

Aplique imediatamente uma fina camada de cola de cianoacrilato na base da placa da amostra do vibratomo e use uma pinça sem corte para colocar o rim, com o lado do ureter voltado para baixo, na área coberta de cola. Aplique suavemente a pressão para baixo na parte superior do rim com a borda plana da pinça por aproximadamente 10 a 20 segundos para secar a cola.

Prenda firmemente a placa de amostra na parte inferior da bandeja tampão e ajuste o nível da solução KRB para que a parte superior do rim fique totalmente imersa. Para seccionamento automático do vibrato, selecione as posições inicial e final do ciclo de corte da lâmina do vibrato, 0.5 a 1 centímetro à distância do rim, para garantir que todo o plano do rim esteja sendo seccionado.

Inicie o processo de corte automático, certificando-se de que a lâmina entre em contato com o rim. Usando uma pinça, colete as seções que são liberadas do rim e transfira-as imediatamente para poços individuais.

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Última atualização: 22 agosto 2026