Name: En injection intraventriculaire Utero et lélectroporation dembryons de rat E16 (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 19 min 4 s
Description: Apprenez l'injection intraventriculaire in utero et l'électroporation chez les embryons de rat E16. Cette méthode permet la manipulation génétique dans un modèle où les techniques classiques sont difficiles.

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en injection intraventriculaire utero et l&#39;électroporation d&#39;embryons de rat e16

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E16 Rat Embryos

In utero in vivo par injection et l&#39;électroporation du néocortex du rat embryonnaire fournit un outil puissant pour la manipulation des progéniteurs individuelles le long des parois du ventricule latéral. Cette technique est maintenant largement utilisée pour étudier les processus impliqués dans corticogenesis par une sur-exprimant ou faire tomber les gènes et l&#39;observation des effets sur la prolifération cellulaire, la migration et la différenciation. En comparaison avec les stratégies KO traditionnelle, in utero électroporation fournit un moyen rapide de manipuler une population de cellules pendant une fenêtre temporelle spécifique. Dans ce protocole vidéo, nous exposons la méthodologie expérimentale pour la préparation de rats pour la chirurgie, ce qui expose les cornes utérines travers laporatomy, l&#39;injection d&#39;ADN dans les ventricules latéraux de l&#39;embryon en développement, électroporation d&#39;ADN dans le progéniteurs tapissant la paroi latérale, et le soin des animaux d&#39;après- chirurgie. Notre laboratoire utilise ce protocole pour les chirurgies sur des rats E15-E21, cependant il est plus couramment réalisée à E16 comme le montre cette vidéo.

En injection intraventriculaire Utero et l&#39;électroporation d&#39;embryons de rat E16

L'injection in vivo in utero et l'électroporation du néocortex embryonnaire de rat constituent un outil puissant pour la manipulation de progéniteurs individuels...

Bonjour, je m'appelle William Ti. Je viens du laboratoire Arnold Creek Stein. Aujourd'hui, moi et d'autres chercheurs allons vous montrer une injection intra-utérine d'embryons de rat au stade E 16. Bonjour, je m'appelle Laura Elias.Aujourd'hui, je vais vous montrer comment préparer les pipettes de microinjection et les charger pour les injections intraventriculaires et l'électroporation que nous allons réaliser aujourd'hui. Je vais également vous montrer comment effectuer les injections intraventriculaires et l'électroporation chez des embryons de rat à J16. Ainsi, les injections et l'électroporation in utero chez le rat sont particulièrement utiles, car le rat est un système dans lequel les manipulations génétiques ne sont pas aisément réalisables.D'accord, il existe un certain nombre d'instruments chirurgicaux que nous utilisons pour cette procédure. Nous utilisons un séparateur, deux paires de pinces à épiler, une paire à mâchoires striées et une autre paire présentant une petite dent à l'extrémité. Nous utilisons également une paire de pinces hémostatiques.Ceci est une paire de ciseaux, puis nous utilisons ces deux agrafeuses. Voici les plus grandes, que nous utilisons pour le

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En injection intraventriculaire Utero et l&#39;électroporation d&#39;embryons de souris E15

Électroporation in utero est une méthode utile pour transfecter des cellules progénitrices neuronales in vivo. Selon le placement des électrodes et la période de développement de l'électroporation, certains sous-ensembles de cellules corticales peuvent être ciblées. Cellules ciblées peuvent ensuite être analysées in vivo ou in vitro des effets de l'altération génétique.

In utero électroporation suivie par la culture neuronale primaire pour étudier la fonction des gènes dans un sous-ensemble des neurones corticaux

Électroporation in utero permet la livraison rapide dans un gène spatialement et temporellement contrôlée manière le développement du système nerveux central (SNC). Nous décrivons ici un très adaptables dans le protocole d'électroporation in utero qui peut être utilisé pour livrer des constructions d'expression dans de multiples domaines du SNC embryonnaire, y compris le télencéphale, diencéphale et la rétine.

Livraison efficace de gènes dans les Territoires du SNC multiples à l&#39;aide In Utero L&#39;électroporation

Cette étude décrit le développement...

En électroporation in vitro de la lèvre inférieure rhombique d&#39;embryons de souris Midgestation

Contrôle de l'expansion des cellules souches somatiques est un facteur majeur qui pèse sur leurs études et leur utilisation en thérapie. Ici, nous décrivons un système à contrôler temporellement les cellules souches neurales l'expansion au cours du développement et de l'âge adulte, ce qui peut être utilisé pour augmenter le nombre de neurones générés dans le cerveau de souris.

Expansion du embryonnaires et cellules souches neurales adultes par<em&gt; In Utero</em&gt; Électroporation ou virale par injection stéréotaxique

Source : Koza, P., et al. Génération de rats transgéniques à l'aide d'une approche par vecteur rétroviral lentiviral. J. Vis. Exp. (2020)Ce vidéo montre la livraison assistée par microinjection de vecteurs lentiviraux dans des embryons de rat fécondés afin d'obtenir une intégration stable du transgène pour la génération de rats transgéniques.

Transduction d'embryons fertilisés de rat via des vecteurs lentiviraux

Cette vidéo démontre l’administration de l’ADN plasmidique dans les cellules neuronales cérébelleuses d’embryons murins en utilisant l’électroporation in utero. Cette méthode est utile pour comprendre la fonction in vivo des gènes dans le développement normal du cerveau et les changements dans l’expression des gènes des cellules neuronales au cours de la progression tumorale.

Livraison de gènes basée sur l’électroporation in utero : une technique pour injecter de l’ADN plasmidique dans des cellules cérébelleuses embryonnaires d’embryons murins

Les gènes peuvent être manipulés au cours du développement du cortex ou de l'hippocampe du rat par électroporation in utero (IUE) à E16, pour permettre des modifications rapides et ciblées en matière de connectivité neuronale à des études ultérieures de comportement ou la neuropathologie chez les animaux adultes. Postnatal l'imagerie in vivo pour le contrôle de succès IUE est effectuée par la bioluminescence de l'activation de la luciférase co-transfecté.

Génération de rats transgéniques par voie topique<em&gt; In utero</em&gt; L&#39;électroporation et<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescence dépistage

Ce protocole décrit en détail comment transfecter spécifiquement différentes régions du système nerveux central C57BL/6 via électroporation in utero. Ce protocole comprend des instructions détaillées pour les transfections de régions qui se développent dans le cortex, l’hippocampe, le thalamus, l’hypothalamus, le noyau septal latéral et le striatum.

Cortex-, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, latéral Septal Nucleus- et le striatum spécifique<em&gt; In Utero</em&gt; L&#39;électroporation dans la souris C57BL / 6

Hétérotopie nodulaire périventriculaire (PNH) est la forme la plus courante de malformations du développement cortical (MCD) à l’âge adulte, mais sa base génétique reste inconnue dans des cas plus sporadiques. Nous avons récemment mis au point une stratégie pour identifier les gènes candidats nouveaux pour MCD et de confirmer directement leur rôle causal in vivo.

Une stratégie novatrice alliant CGH-Array, séquençage de l’exome-ensemble et électroporation de In Utero chez les rongeurs afin d’identifier les gènes pour les Malformations du cerveau

Apprenez l'injection intraventriculaire in utero et l'électroporation chez les embryons de rat E16. Cette méthode permet la manipulation génétique dans un modèle où les techniques classiques sont difficiles.

En injection intraventriculaire Utero et l'électroporation d'embryons de rat E16

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