É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 01:24Splenic B-Lymphocyte Isolation and Stimulation
- 05:42Transfection of Producer Cells
- 07:26Infection of Stimulated Splenic B cells
- 08:12Flow Cytometry Analysis
- 08:40Rescue of AID-Deficiency by Transduction of AID-Deficient B Cells with a Recombinant Retrovirus
- 08:57Conclusion
Ein effizientes System der Struktur-und Funktionsanalyse eines Gens in einer<em> Ex vivo</em> Kultur der Milz B-Lymphozyten beschrieben. Diese Methode nutzt die Vorteile der rekombinanten retroviralen Produktion in ein Helfer frei, ecotrophic Verpackungs-Zelllinie. Stabile, vererbbare Expression eines Gens von Interesse innerhalb des primären Lymphozyten erreicht, was zu Generation Oberfläche Antikörper auf B-Zellen durchlaufen Klasse wechseln Rekombination.
Tags
Recombinant Retroviral ProductionB CellsTransgenic ExpressionReverse Genetic ApproachHeterologous Expression SystemPhenotype AnalysisGene Over-expressionHematopoetic SystemMouse GeneticsHuman Genes And DiseasesSynteny ConservationGene DisruptionsAllelic ReplacementTransgenic Mouse CreationCell Culture Model
