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Protocolo para vacinas recombinantes RBD baseado SARS: Preparação de proteínas, Vacinação Animal e Detecção de Neutralização
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JoVE Journal Imunologia e Infecção
Protocol for Recombinant RBD-based SARS Vaccines: Protein Preparation, Animal Vaccination and Neutralization Detection

Protocolo para vacinas recombinantes RBD baseado SARS: Preparação de proteínas, Vacinação Animal e Detecção de Neutralização

DOI:
10.3791/2444-v

•

12:09 min

•

May 02, 2011

•

, , ,
1Lindsley F. Kimball Research Institute,New York Blood Center

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:01Introduction
  • 01:52Recombinant SARS-CoV RBD Protein Preparation
  • 04:40Mouse Immunization and Sample Collection
  • 05:56Preparation of SARS Pseudovirus in 293T Cells
  • 06:53SARS Pseudovirus Titration and Neutralization Assay
  • 11:10Evaluation of Recombinant RBD-induced Neutralizing Activity
  • 11:36Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Este protocolo descreve um procedimento geral para o estudo de ligação aos receptores recombinantes de domínio (RBD) com base em vacinas de subunidade contra a SARS. Ele inclui métodos para transfecção e expressão da proteína em células RBD 293T, a imunização de camundongos com RBD e detecção de atividade de neutralização dos soros do mouse usando um ensaio de neutralização estabelecida SARS pseudovirus.

Tags

Recombinant RBD-based SARS VaccinesProtein PreparationAnimal VaccinationNeutralization DetectionSubunit VaccinesMammalian Cell SystemAntigenicityImmunogenicitySARS-CoVRBD ProteinReceptor BindingNeutralizing AntibodiesCulture SupernatantMammalian 293T CellsTransfection MethodCalcium Phosphate Transfection

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