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Ermittlung der Auswirkungen von BRCA1-Mutationen auf homologe Rekombination unter Verwendung von Zellen, die endogenes Wildtyp-BRCA1 Express
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Identifying the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination using Cells that Express Endogenous Wild-type BRCA1
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Ermittlung der Auswirkungen von BRCA1-Mutationen auf homologe Rekombination unter Verwendung von Zellen, die endogenes Wildtyp-BRCA1 Express

DOI:
10.3791/2468-v

•

08:53 min

•

February 17, 2011

•

, ,
1Department of Biomedical Informatics,The Ohio State University, 2Departments of Molecular Immunology and Clinical Oncology,Tohoku University

Capítulos

  • 00:05Título
  • 02:01Preparation of Cell Line with an Integrated Recombination Substrate
  • 03:04Transfection to Deplete Endogenous BRCA1 and add back Mutant BRCA1
  • 05:19Analysis of Transfectants
  • 06:07Analysis of the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination via GFP-Expression
  • 07:54Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Wir stellen eine Methode zur Prüfung von BRCA1-Varianten in einer Gewebekultur basierter Assay für die homologe Rekombination Reparatur von DNA-Schäden, die durch abbauende endogenen BRCA1-Protein aus einer Zelle mit RNAi und ersetzt sie mit einer BRCA1 Punktmutante, dass eine Codierung ändern enthält.

Tags

BRCA1 MutationsHomologous RecombinationEndogenous BRCA1Missense MutationsFunctional AnalysisCell LinesRNAi TargetingBRCA1 MRNABRCA1 VariantAcute SilencingSecondary MutationsCompensation For Loss Of FunctionHeLa-derived Cell LineHomologous Recombination AssayRecombination SubstrateI-SceI Restriction Enzyme SiteGFP Allele

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