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Identificar os efeitos das mutações BRCA1 em Recombinação Homóloga usando células que expressam BRCA1 tipo selvagem endógena
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Identifying the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination using Cells that Express Endogenous Wild-type BRCA1

Identificar os efeitos das mutações BRCA1 em Recombinação Homóloga usando células que expressam BRCA1 tipo selvagem endógena

DOI:
10.3791/2468-v

•

08:53 min

•

February 17, 2011

•

, ,
1Department of Biomedical Informatics,The Ohio State University, 2Departments of Molecular Immunology and Clinical Oncology,Tohoku University

Capítulos

  • 00:05Título
  • 02:01Preparation of Cell Line with an Integrated Recombination Substrate
  • 03:04Transfection to Deplete Endogenous BRCA1 and add back Mutant BRCA1
  • 05:19Analysis of Transfectants
  • 06:07Analysis of the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination via GFP-Expression
  • 07:54Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Nós fornecemos um método para testar variantes BRCA1 em um ensaio de cultura de tecidos com base homóloga de reparação de danos no DNA de recombinação, esgotando proteína BRCA1 endógenos de uma célula usando RNAi e substituindo-o por um mutante ponto BRCA1 que contém uma mudança de codificação.

Tags

BRCA1 MutationsHomologous RecombinationEndogenous BRCA1Missense MutationsFunctional AnalysisCell LinesRNAi TargetingBRCA1 MRNABRCA1 VariantAcute SilencingSecondary MutationsCompensation For Loss Of FunctionHeLa-derived Cell LineHomologous Recombination AssayRecombination SubstrateI-SceI Restriction Enzyme SiteGFP Allele

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